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Epicentre TSM99K2 說明書

 更新時間:2017-09-28 點擊量:1879

世界*實驗材料供應商 Epicentre Technologies 正式授權上海起發為(wei) 其中國代理, Epicentre Technologies 在一直是行業(ye) 的*,一直為(wei) 廣大科研客戶提供zui為(wei) 的產(chan) 品和服務,上海起發一直秉承為(wei) 中國科研客戶帶來的產(chan) 品,的服務,簽約 Epicentre Technologies 就是為(wei) 了給廣大科研客戶帶來更加完善的產(chan) 品和服務,您的滿意將是我們(men) zui大的收獲

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Epicentre®(一家Illumina公司)成立於(yu) 1987年,使用其在酶製造領域的專(zhuan) 業(ye) 知識,為(wei) 生命科學研究生產(chan) 創新套件。Epicenter製造的試劑盒和試劑有助於(yu) 突破基因組學和轉錄組學研究。產(chan) 品可用於(yu) 基因表達分析,和RNA純化,PCR和RT-PCR,克隆,體(ti) 外轉錄和微生物基因組學。

Epicenter的產(chan) 品在範圍內(nei) 在各種應用領域的學術,商業(ye) 和政府實驗室中得到應用,包括基礎研究,藥物發現,癌症研究,傳(chuan) 染病研究,微生物學和個(ge) 性化醫學。

2011年1月10日,Epicentre被Illumina公司收購。該公司從(cong) 威斯康星州麥迪遜總部繼續經營Illumina的全資子公司。

EZ-Tn5™ <KAN-2>Tnp Transposome™ Kit

EZ-Tn5™<KAN-2> Tnp Transposome™試劑盒

在活細菌中產生隨機基因敲除

  • 在廣泛的宿主範圍的細菌細胞類型中產生具有改善的遺傳學或功能的突變體以前來自Epicentre
  • 表征新基因和基因功能
  • 鑒定涉及發病機製,生物膜發育的基因
  • 解開代謝途徑
  • 確定必需的基因和調控元件
  • 100多個不同應用的引用

應用

  • 在細菌細胞中快速產生敲除突變體。
  • 敲入細菌菌株發育的基因。
  • 用可見的遺傳標記“標記”細菌進行環境定位研究。
  • 細菌染色體的直接測序。

EZ-Tn5™ Transposome™ complexes are formed between an EZ-Tn5™ Transposon and EZ-Tn5™ Transposase, and provide a simple and reliable method for generating a library of random gene knockouts in vivo.* Just electroporate the EZ-Tn5 Transposome into any of a broad range of living bacterial cells and select for a marker encoded by the EZ-Tn5 Transposon (Fig. 1). Because there is no need for cell conjugation, suicide vectors, or specific host factors, EZ-Tn5 Transposomes are ideal for creating mutants in species that have poorly described genetic systems or lack adequate molecular tools.

Ready-to-use EZ-Tn5 Transposomes* are available containing a kanamycin selectable marker (<KAN-2>). This marker is readily expressed in many Gram-negative bacteria. You can also create your own EZ-Tn5 Transposome using one of the EZ-Tn5 pMOD™ Transposon Construction Vectors and EZ-Tn5 Transposase.

圖1.可以使用使用MasterPure™Complete 純化試劑盒分離的基因組和轉座子末端同源的引物直接測序細菌中的EZ-Tn5™轉座子插入位點

所有EZ-Tn5轉座子在每端都含有*的引物結合位點進行雙向測序。因此,可以使用細菌基因組作為(wei) 模板並且每個(ge) 轉座子提供的引物直接測序基因敲除。轉座子插入使用EZ-Tn5轉<R6Kγ製成ORI / KAN-2> TNP轉座試劑盒可救出和側(ce) 翼測序。

EZ-Tn5已經在許多不同的微生物,包括Acinetobactor,彎曲杆菌,大腸杆菌,分枝杆菌,變形杆菌,假單胞菌,酵母屬,沙門氏菌,錐蟲屬,Xylella等中進行了轉座瘤介導的插入。獲得的轉座克隆的數量高度依賴於(yu) 宿主細胞的轉化效率(表1)。

優(you) 點

  • 快速誘變方法比化學誘變更簡單易用。
  • 比使用具有自質粒的微轉座子更有效。
  • 廣泛的宿主範圍:到目前為止,已經轉移了超過60種革蘭氏陰性和革蘭氏陽性菌。
表1.使用EZ-Tn5 TM Tranposomes TM誘變的細菌菌株的實例
放線杆菌胸膜肺炎放線芽孢杆菌(
Agrobacterium tumefaciens)
枯草芽孢杆菌
Bartonella henselae 
Bdellovibrio bacteriovorus 
彎曲杆菌空腸彎曲
杆菌(Clavibacter michiganensis

subsp。sepedonicus 
白喉棒狀杆菌
陰溝腸杆菌
大腸杆菌
土拉弗朗西斯菌
杜克雷嗜血杆菌
卡他莫拉菌
鳥分枝杆菌
牛分枝杆菌
(BCG)
結核分枝杆菌的
粘細菌angiococcus 
淋球菌
惡臭假單胞菌
丁香假單胞菌
馬紅球菌
立克prowazekii 
鼠傷寒沙門氏菌
粘質沙雷氏菌
Silicibacter pomeroyi 
螺原體蟎
化膿性鏈球菌
野油菜黃單
葉緣焦枯病菌
發酵單胞菌
表2. 通過電穿孔1μlEZ-Tn5 TM <KAN> Tnp Transposome TM產生的Kan R轉座子插入克隆的數目
大腸杆菌> 10 5普通變形杆菌> 10 3
沙門氏菌> 10 4恥垢分枝杆菌> 10 2
假單胞菌屬> 10 2 

*由已發行和/或未決(jue) 所覆蓋,許可或轉讓給Epicentre®(Illumina®公司)。

 

品名規格貨號
EZ-Tn5™ <KAN-2>Tnp Transposome™ Kit 10 ReactionsTSM99K2

 

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