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cytoskeleton AAC01說明書

 更新時間:2018-08-17 點擊量:1800

Cytoskeleton,Inc。很高興(xing) 為(wei) 藥物篩選,信號轉導和細胞骨架研究提供廣泛的試劑盒和產(chan) 品。我們(men) 專(zhuan) 注於(yu) 生產(chan) 純化蛋白質和易於(yu) 使用的試劑盒,以研究生物化學和細胞過程。我們(men) 的試劑盒可用於(yu) 少量樣品,用於(yu) 基礎研究或小屏幕(Biochem Kits™),也可用於(yu) 大屏幕的高通量樣品CytoDYNAMIX Screens™)。

除了我們(men) 現有的產(chan) 品,我們(men) 還在產(chan) 品線中為(wei) 微管,微管蛋白,運動蛋白,小G蛋白效應物,GAP,GEF和其他幾種蛋白提供藥物篩選服務。

 

乙酰賴氨酸抗體小鼠單克隆抗體

窗體(ti) 頂端

1x25 ul(Cat。#AAC01-S)

1x200 ul(Cat。#AAC01)

 

宿主/同種型
小鼠/ IgG2b

克隆
3C6.08.20

物種反應性
所有物種

 

 

抗乙酰賴氨酸抗體(ti) 是泛乙酰賴氨酸小鼠單克隆抗體(ti) ,是Signal-Seeker™產(chan) 品係列的一部分。抗乙酰賴氨酸抗體(ti) 可識別通過賴氨酸殘基的ε胺基上的乙酰化進行翻譯後修飾的蛋白質。發生在所有蛋白質的30-50%,特別是組蛋白,p53,微管蛋白和肌球蛋白。使用乙酰化蛋白質的專(zhuan) 有混合物來產(chan) 生高度穩健的抗體(ti) ,該抗體(ti) 已被證明可識別IP,WB,ChIP和IF應用中的各種乙酰化蛋白質。與(yu) 如下所示的其他市售抗體(ti) 相比,該抗乙酰基 - 賴氨酸抗體(ti) 具有許多優(you) 點。

 

 

 

 

驗證的應用程序

 

Western Blot使用乙酰賴氨酸抗體(ti)

細胞骨架的抗乙酰賴氨酸抗體(ti) Cat。#AAC01識別0.005 ng化學乙酰化BSA,其靈敏度與(yu) 其他市售抗體(ti) 相當。與(yu) 其他抗乙炔賴氨酸抗體(ti) 不同,該抗體(ti) 與(yu) 非乙酰化BSA不顯示交叉反應性。

 

使用乙酰賴氨酸抗體(ti) 進行免疫沉澱

將AAC01對IP組蛋白的能力與(yu) 其他市售抗體(ti) 進行比較。Cytoskeleton的抗乙酰賴氨酸抗體(ti) 為(wei) IP應用提供了明顯的優(you) 勢。每個(ge) 管足以進行大約20次IP測定。

 

 

 使用乙酰賴氨酸抗體(ti) 進行免疫熒光檢測

 

用TSA(5mM,12小時)未處理(頂部)或處理(底部)的人表皮樣癌A431細胞如方法中所述進行染色。乙酰化的細胞質和核蛋白以綠色熒光顯現。注意,與(yu) 未處理的對照相比,乙酰化的微管網絡在TSA處理的樣品中清晰可見。熒光核強度表明細胞核中乙酰化蛋白的豐(feng) 度很高。

 

 

ChIP使用乙酰賴氨酸抗體(ti)

從(cong) A431細胞製備染色質,未處理或TSA處理(5mM,4小時)。簡言之,將細胞用1%甲醛固定10分鍾,並通過使用抗乙酰基抗體(ti) (1:100稀釋)免疫沉澱酶促染色的染色質。通過引物對擴增管家基因GAPDH的啟動子區域,並通過2%瓊脂糖凝膠電泳分析PCR產(chan) 物。要查看推薦的ChIP協議,

 

 

 

 

蛋白質乙酰化背景

蛋白質的乙酰化可以作為(wei) 共翻譯或翻譯後修飾(PTM)發生(1)。共翻譯乙酰化發生在大約85%的哺乳動物蛋白的N-末端,它是不可逆的並且被認為(wei) 在蛋白質穩定性,定位和合成中是重要的(1)。翻譯後乙酰化發生在賴氨酸殘基的ε氨基上,作為(wei) 可逆和高度動態的PTM,已知是多種細胞事件中的關(guan) 鍵調節因子,包括染色質結構,轉錄,代謝,信號轉導和細胞骨架調節(2-3) )。迄今為(wei) 止,已經鑒定了超過4,000種蛋白質作為(wei) PTM乙酰化的靶標,其與(yu) 細胞預處理中的磷酸化相當(3)。抗體(ti) AAC01檢測乙酰賴氨酸PTM。 

 

參考

1 Bogdan P.和Sherman F. 2002.乙酰化蛋白質的多樣性。Genome Biol。3(5):評論0006。

2 Lundby A.等。對大鼠組織中賴氨酸乙酰化位點的蛋白質組學分析揭示了器官特異性和細胞模式。Cell Reports 2:419-431。

3 Sadoul K.等。2010.細胞質中蛋白質賴氨酸乙酰化的故事。J. Biomed。生物技術。2011:1-15。

4 Golemis EA et。Al,Protein-Protein Interactions,CSHLP,2005,p67

 

窗體(ti) 底端

 

LaBarge等。2015年。代謝適應耐力運動訓練不需要p300。FASEB期刊文章doi:10.1096 / fj.15-281741。 
本文使用抗乙酰賴氨酸探測轉基因小鼠肌肉組織的提取物,尋找被敲除的HDAC基因的作用。 

 

抗體

Cytoskeleton Inc致力於(yu) 為(wei) 肌動蛋白和肌動蛋白結合蛋白提供高質量的抗體(ti) 。我們(men) 在該係列產(chan) 品中的所有抗體(ti) 均經過QC Max™測試。已經測試QC Max TM抗體(ti) 用於(yu) 蛋白質印跡,原位和免疫沉澱。這樣,您就可以準確了解每種抗體(ti) 的用途,並確保購買(mai) 適合您的抗體(ti) 。如果您對我們(men) 的QC Max™抗體(ti) 有關(guan) 的詳細信息,請谘詢我們(men)

問題1:在細胞和組織中染色F-肌動蛋白的*方法是什麽(me) ?

答案2:   細胞骨架提供我們(men) 的Acti染色係列熒光標記的鬼筆環肽,可在固定細胞和組織樣本中特異性染色F-肌動蛋白。Acti染色熒光鬼筆環肽探針非常明亮和穩定,為(wei) 標記F-肌動蛋白提供了一種非常簡單和經濟的方法。鬼筆環肽用不同的綠色和紅色熒光團(Cat。#PHDG1PHDR1PHDH1PHDN1標記。也可以使用肌動蛋白抗體(ti) ,但通常那些也染色G-肌動蛋白,這產(chan) 生高背景。

 

問題2:您對多克隆抗肌動蛋白抗體(ti) 有何推薦稀釋度?

答案2:   抗體(ti) 的稀釋度取決(jue) 於(yu) 所使用的細胞/組織類型和實驗形式。對於(yu) 蛋白質印跡,我們(men) 已經測試並推薦使用濃度為(wei) 500ng / ml(1:1000稀釋)的抗體(ti) 。在該稀釋度下,我們(men) 在非洲爪蟾 A6細胞,小鼠Swiss 3T3細胞,大鼠NRK細胞,人HeLa細胞和血小板細胞的細胞提取物中檢測到肌動蛋白。對於(yu) 免疫熒光,我們(men) 使用抗肌動蛋白抗體(ti) 檢測小鼠Swiss 3T3細胞中的肌動蛋白。抗體(ti) 以2μg/ ml(1:500稀釋)的濃度使用,然後與(yu) 1:500稀釋的抗兔羅丹明綴合的第二抗體(ti) 一起溫育。這些信息通常在圖例中或我們(men) 的抗體(ti) 數據表的“產(chan) 品用途”部分中找到。

 

 

貨號

品名

規格

品牌

BK165-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK165

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK163-S

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK163

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK160-S

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK160

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK162-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK162

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK161-S

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK161

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

AAC04-Beads

Acetyl-Lysine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

APY03-Beads

Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM11-Beads

SUMOylation 1 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM24-Beads

SUMOylation 2/3 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

UBA01-Beads

Ubiquitination Affinity Beads

ea

cytoskeleton

CIG02-Beads

Acetyl-Lysine Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG03-Beads

SUMO1 IP Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG01-Beads

IgG Control Beads

ea

cytoskeleton

CUB02-Beads

Ubiquitination Control Beads

ea

cytoskeleton

BLR01

BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit

ea

cytoskeleton

BLR02

BlastR™ Rapid Filtration Kit

ea

cytoskeleton

AAC02

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (7B1)

ea

cytoskeleton

AAC03

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC03-HRP

Acetyl Lysine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC01

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (3C6.08.20)

ea

cytoskeleton

APY03

Phosphotyrosine Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

APY03-HRP

Phosphotyrosine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

ASM01

SUMO1 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 5D8B16)

ea

cytoskeleton

ASM24

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 11G2)

ea

cytoskeleton

ASM23

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

ASM23-HRP

SUMO-2/3-HRP Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

AUB01

Ubiquitin Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

AUB01-HRP

Ubiquitin-HRP Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

PHDG1

Acti-stain 488 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDH1

Acti-stain 555 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDN1

Acti-stain 670 phalloidin

ea

cytoskeleton

BK001

Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

BK003

Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

AKL95

Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AD99

Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

AS99

Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle

ea

cytoskeleton

AKL99

Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AKF99

Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AP05

Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

APHR

Actin protein (rhodamine): human platelet

ea

cytoskeleton

AR05

Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AT01

Alpha-actinin protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

RP01P

Arp2/3 protein complex: porcine brain

ea

cytoskeleton

CS-TFC01

Cardiac Thin Filament Complex (CTFC)

ea

cytoskeleton

CF01

Cofilin 1 protein: human recombinant

ea

cytoskeleton

HPG6

Gelsolin protein: Homo sapiens recombinant

ea

cytoskeleton

MH01

Heavy meromyosin protein

ea

cytoskeleton

CS-MH03

Heavy Meromyosin Protein (HMM Fragment)

ea

cytoskeleton

CS-MYS03

Myosin - cardiac S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS04

Myosin - skeletal muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS05

Myosin - smooth muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

MY02

Myosin II protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

MY03

Myosin protein: bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

PR02

Profilin 1 protein: Untagged, human recombinant

ea

cytoskeleton

PHDR1

Rhodamine Phalloidin

ea

cytoskeleton

CY-SC001

SiR-Actin Kit

ea

cytoskeleton

CY-SC013

SiR700-Actin Kit

ea

cytoskeleton

VCG03

WASP protein VCA domain: GST tagged: human

ea

cytoskeleton

 

 

 

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