Cytoskeleton，Inc。很高興(xing) 為(wei) 藥物篩選，信號轉導和細胞骨架研究提供廣泛的試劑盒和產(chan) 品。我們(men) 專(zhuan) 注於(yu) 生產(chan) 純化蛋白質和易於(yu) 使用的試劑盒，以研究生物化學和細胞過程。我們(men) 的試劑盒可用於(yu) 少量樣品，用於(yu) 基礎研究或小屏幕（Biochem Kits™），也可用於(yu) 大屏幕的高通量樣品（CytoDYNAMIX Screens™）。
除了我們(men) 現有的產(chan) 品，我們(men) 還在產(chan) 品線中為(wei) 微管，微管蛋白，運動蛋白，小G蛋白效應物，GAP，GEF和其他幾種蛋白提供藥物篩選服務。
Cytoskeleton的Biochem Kits™是用於(yu) 分析細胞骨架生物化學和信號轉導的不同方麵的綜合試劑盒。這些工具包通常構成出版物中圖形的基礎，請查看引文標簽中的示例。該試劑盒附帶了分析所需的所有試劑以及如何使用它們(men) 的詳細說明，因此您可以在準備好試劑盒後立即進行分析！
許多出版物引用了在論文的材料和方法部分中使用Cytoskeleton的試劑盒。通常，引文與(yu) 圖形或圖像形式的特定結果相關(guan) 聯，這有助於(yu) 您，作者，您的發現。這表明套件可在短時間內(nei) 生成出版物質量數據，從(cong) 而有助於(yu) 提高工作效率。肌動蛋白試劑盒的引用示例如下所示。個(ge) 別產(chan) 品頁麵上提供了更多引文。
肌動蛋白結合蛋白旋轉分析Biochem試劑盒：兔骨骼肌肌動蛋白（Cat。＃BK001） |
Takeshita，N.，Ohta，A。和Horiuchi，H。（2005）。CsmA是一種具有肌球蛋白運動樣結構域的V類幾丁質合酶，通過與(yu) 構巢曲黴中肌動蛋白細胞骨架的直接相互作用進行定位。摩爾。生物學。細胞16,1961-1970。 |
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肌動蛋白聚合生物化學試劑盒（熒光形式）：兔骨骼肌肌動蛋白（Cat。＃BK003） |
Takamiya，R.，Takahashi，M.，Park，YS，Tawara，Y.，Fujiwara，N.，Miyamoto，Y.，Gu，J.，Suzuki，K。和Taniguchi，N。（2005）。神經母細胞瘤細胞中突變的Cu，Zn-SOD的過度表達導致細胞骨架改變。上午。J. Physiol。288，C253-259。 |
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Zhai，L.，Zhao，P.，Panebra，A.，Guerrerio，AL和Khurana，S。（2001）。絨毛蛋白的酪氨酸磷酸化調節肌動蛋白細胞骨架的組織。J. Biol。化學。276,36163-36167。 |
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肌動蛋白結合蛋白旋轉分析Biochem試劑盒：人血小板肌動蛋白（Cat。＃BK013） |
Gohla，A.，Birkenfeld，J。和Bokoch，GM（2005）。Chronophin是一種新型HAD型絲(si) 氨酸蛋白磷酸酶，可調節cofilin依賴性肌動蛋白動力學。納特。細胞生物學。7,21-29。 |
Falcon-Perez，JM，Starcevic，M.，Gautam，R。和Dell'Angelica，EC（2002）。BLOC-1，一種新的複合物，含有蒼白素和弱蛋白，參與(yu) 黑素體(ti) 和血小板致密顆粒的生物發生。J. Biol。化學。277,28191-28199。 |
Zhai，L.，Zhao，P.，Panebra，A.，Guerrerio，AL和Khurana，S。（2001）。絨毛蛋白的酪氨酸磷酸化調節肌動蛋白細胞骨架的組織。J. Biol。化學。276,36163-36167。 |
Leung，CL，Sun，D.，Zheng，M.，Knowles，DR and Liem，RK（1999）。微管肌動蛋白交聯因子（MACF）：dystonin和肌營養(yang) 不良蛋白的雜合體(ti) ，可與(yu) 肌動蛋白和微管細胞骨架相互作用。J. Cell Biol。147,1275-1286。 |
G-Actin / F-actin體(ti) 內(nei) 檢測Biochem試劑盒（目錄號BK037） |
Rapier等，2010。癌細胞Int。10,24 |
Rapier等。（2010年）。細胞外基質微觀形成驅動結腸癌細胞中細胞運動性和Rho A活性的關(guan) 鍵變化。癌細胞10,24。 |
Meeks，MK，Ripley，ML，Jin，Z。和Rembold，CM（2005）。熱休克蛋白20介導的力抑製毛喉素放鬆豬頸動脈。上午。J. Physiol。288，C633-639。 |
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Tang，DD和Gunst，SJ（2004）。小GTP酶Cdc42在平滑肌的收縮刺激期間調節肌動蛋白聚合和張力發展。J. Biol。化學。279,51722-51728。 |
Searles CD，Ide L，Davis ME，Cai H，Weber M（2004）。肌動蛋白細胞骨架組織和細胞生長過程中內(nei) 皮細胞一氧化氮合酶的轉錄後調節。Circulation Research 95,488-495。 |
Tu，Y.，Wu，S.，Shi，X.，Chen，K。和Wu，C。（2003）。Migfilin和Mig-2將細絲(si) 蛋白和肌動蛋白細胞骨架的細胞粘連與(yu) 細胞形狀調節功能聯係起來。細胞113,37-47。 |
問題1：哪種試劑盒是檢測肌動蛋白結合蛋白的*選擇？
答案1： Cytoskeleton有兩(liang) 個(ge) 肌動蛋白結合蛋白旋轉分析試劑盒，是識別和表征肌動蛋白結合蛋白的理想選擇。一個(ge) 試劑盒使用肌肉肌動蛋白（Cat。＃BK001），另一個(ge) 試劑盒使用非肌肉肌動蛋白（Cat。＃BK013）。兩(liang) 種測定均利用共沉澱來鑒定蛋白質是否與(yu) 單體(ti) 或絲(si) 狀肌動蛋白結合以及蛋白質是否具有F-肌動蛋白切斷或成束特性。為(wei) 了檢查與(yu) 肌動蛋白單體(ti) 結合的化合物或蛋白質，含有鏈黴抗生物素蛋白包被的孔的96孔板可以與(yu) 生物素化肌動蛋白複合（Cat。＃AB07）產(chan) 生肌動蛋白單體(ti) 捕獲蛋白。然後可以將化合物，蛋白質或提取物與(yu) 捕獲蛋白一起溫育，並且可以通過HRP檢測係統使用針對目標化合物或蛋白質的抗體(ti) （或標記可以與(yu) 測試蛋白綴合）來顯現結合。請記住，緩衝(chong) 液組成也很重要，因為(wei) 它需要低鹽（約50 mM）並含有CaCl 2（或其他二價(jia) 陽離子）和ATP以維持肌動蛋白單體(ti) 的穩定性。有關(guan) 兼容緩衝(chong) 液的示例，請參閱我們(men) 的一般肌動蛋白緩衝(chong) 液配方（Cat。＃BSA01-001）。或者，可以用GST標記感興(xing) 趣的蛋白質（避免還原劑）並與(yu) 板綴合，然後與(yu) 生物素化的肌動蛋白一起溫育，並用HRP綴合的鏈黴抗生物素蛋白顯現。
問題2：當我對感興(xing) 趣的肌動蛋白沒有可用的芘結合物（例如心髒，平滑肌或細胞質肌動蛋白）時，如何用芘測定法測量肌動蛋白聚合？
答案2： 為(wei) 了檢查未標記肌動蛋白的聚合，請點擊此處查看使用過量未標記肌動蛋白（心肌，平滑肌或細胞質）加10％芘標記肌肉肌動蛋白的聚合方案。芘肌肉肌動蛋白不會(hui) 以該測定中使用的濃度自身聚合，因此反應依賴於(yu) 未標記的非肌肉肌動蛋白形成F-肌動蛋白。以這種方式，芘標記的肌肉肌動蛋白被吸收並聚合以充當用於(yu) 聚合未標記的肌動蛋白的報道分子，其以更高的濃度存在。
問題3：如何從(cong) 細胞或組織提取物中測量G-和F-肌動蛋白？
答案3： 確定細胞或組織樣本中遊離球狀肌動蛋白（G-肌動蛋白）含量與(yu) 絲(si) 狀肌動蛋白（F-肌動蛋白）含量的可重複和準確的方法是使用F-肌動蛋白和G-肌動蛋白部分的Western印跡定量。 。一般方法是使F-肌動蛋白穩定緩衝(chong) 液中的細胞或組織均質化，然後高速離心以將F-肌動蛋白與(yu) G-肌動蛋白池分離。然後通過SDS-PAGE分離級分，並通過Western印跡定量肌動蛋白。終結果給出了準確的方法來確定摻入細胞骨架的F-肌動蛋白與(yu) 細胞質中發現的G-肌動蛋白的比例。細胞骨架提供了一種簡單易用的選擇，可用G-肌動蛋白/ F-肌動蛋白體(ti) 內(nei) 檢測試劑盒（Cat。＃BK037）定量G-和F-肌動蛋白。該試劑盒提供了在不同處理條件下定量細胞或組織樣品中單體(ti) 和聚合肌動蛋白水平的所有必需試劑。將樣品離心，然後將沉澱（F-肌動蛋白）和上清液（G-肌動蛋白）溶解於(yu) SDS上樣緩衝(chong) 液中並通過Western印跡處理。
購
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30-100 assays (Cat. # BK037)
窗體(ti) 底端
產(chan) 品用途包括
引言
確定細胞群中絲(si) 狀肌動蛋白（F-肌動蛋白）含量與(yu) 遊離球狀肌動蛋白（G-肌動蛋白）含量的可重複和準確的方法是使用F-actin和G-actin細胞的Western印跡定量分數（1-4）。一般方法是使F-肌動蛋白穩定緩衝(chong) 液中的細胞均質化，然後離心以將F-肌動蛋白與(yu) G-肌動蛋白池分離。然後通過SDS-PAGE分離級分，並通過Western印跡定量肌動蛋白。終結果給出了準確的方法來確定摻入細胞骨架的F-肌動蛋白與(yu) 細胞質中發現的G-肌動蛋白的比例。該試劑盒包含進行該試驗所需的所有試劑。
試劑盒內(nei) 容
該試劑盒包含足夠的材料，可根據分析設置進行30-100次分析，並包含陽性和陰性對照試劑。包括以下組件：
需要的設備
實施例結果
使用G-肌動蛋白/ F-肌動蛋白體(ti) 內(nei) 測定試劑盒，在用肌動蛋白聚合藥物jasplakinolide處理的Swiss 3T3細胞中研究了G-肌動蛋白和F-肌動蛋白量的變化。在未經處理的瑞士3T3細胞中，80％的肌動蛋白是可溶性G-肌動蛋白，並且在上清液部分中發現，20％的肌動蛋白是絲(si) 狀F-肌動蛋白並且在沉澱部分中發現。在用jasplakinolide處理的Swiss 3T3細胞中，80％的肌動蛋白重組成F-肌動蛋白並且在沉澱部分中發現（圖1）。
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| 圖1.用jasplakinolide處理後瑞士3T3細胞中肌動蛋白的重組。瑞士3T3細胞用jasplakinolide（Jaspl）處理或不處理（Untr），並使用BK037測定G-肌動蛋白（G）和F-肌動蛋白（F）含量。用jasplakinolide治療導致F-肌動蛋白的有效積累。 |
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問題1：在哪個(ge) 步驟可以停止檢測？
答案1： 直到在37℃下旋轉100,000xg 1小時後才能停止測定。在高速離心後，可將上清液（G-肌動蛋白）與(yu) SDS上樣緩衝(chong) 液混合並冷凍備用。應使用解聚劑和水重懸沉澱（F-肌動蛋白），然後與(yu) SDS上樣緩衝(chong) 液混合並冷凍備用。在冷凍時，F-肌動蛋白解聚，因此在冷凍樣品之前必須將F-肌動蛋白與(yu) G-肌動蛋白分離以分離樣品以準確測量F-肌動蛋白和G-肌動蛋白比率。
問題2：這種檢測有多敏感？
答案2： 該檢測方法可以檢測到G-肌動蛋白與(yu) F-肌動蛋白比例的15％變化。每個(ge) 條件應一式兩(liang) 份進行並重複幾次，因為(wei) 實驗之間的測定再現性可以變化10-20％。
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參考
貨號 | 品名 | 規格 | 品牌 |
BK165-S | Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton |
BK165 | Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton |
BK163-S | Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton |
BK163 | Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton |
BK160-S | Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton |
BK160 | Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton |
BK162-S | Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton |
BK162 | Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton |
BK161-S | Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit | (10 assay) | cytoskeleton |
BK161 | Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit | (30 assay) | cytoskeleton |
AAC04-Beads | Acetyl-Lysine Affinity Beads | ea | cytoskeleton |
APY03-Beads | Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads | ea | cytoskeleton |
ASM11-Beads | SUMOylation 1 Affinity Beads | ea | cytoskeleton |
ASM24-Beads | SUMOylation 2/3 Affinity Beads | ea | cytoskeleton |
UBA01-Beads | Ubiquitination Affinity Beads | ea | cytoskeleton |
CIG02-Beads | Acetyl-Lysine Control Beads | ea | cytoskeleton |
CIG03-Beads | SUMO1 IP Control Beads | ea | cytoskeleton |
CIG01-Beads | IgG Control Beads | ea | cytoskeleton |
CUB02-Beads | Ubiquitination Control Beads | ea | cytoskeleton |
BLR01 | BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit | ea | cytoskeleton |
BLR02 | BlastR™ Rapid Filtration Kit | ea | cytoskeleton |
AAC02 | Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (7B1) | ea | cytoskeleton |
AAC03 | Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1) | ea | cytoskeleton |
AAC03-HRP | Acetyl Lysine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1) | ea | cytoskeleton |
AAC01 | Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (3C6.08.20) | ea | cytoskeleton |
APY03 | Phosphotyrosine Antibody Mouse Monoclonal (27B10) | ea | cytoskeleton |
APY03-HRP | Phosphotyrosine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (27B10) | ea | cytoskeleton |
ASM01 | SUMO1 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 5D8B16) | ea | cytoskeleton |
ASM24 | SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 11G2) | ea | cytoskeleton |
ASM23 | SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3) | ea | cytoskeleton |
ASM23-HRP | SUMO-2/3-HRP Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3) | ea | cytoskeleton |
AUB01 | Ubiquitin Antibody Mouse Monoclonal | ea | cytoskeleton |
AUB01-HRP | Ubiquitin-HRP Antibody Mouse Monoclonal | ea | cytoskeleton |
PHDG1 | Acti-stain 488 phalloidin | ea | cytoskeleton |
PHDH1 | Acti-stain 555 phalloidin | ea | cytoskeleton |
PHDN1 | Acti-stain 670 phalloidin | ea | cytoskeleton |
BK001 | Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin | ea | cytoskeleton |
BK003 | Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin | ea | cytoskeleton |
AKL95 | Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton |
AD99 | Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle | ea | cytoskeleton |
AS99 | Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle | ea | cytoskeleton |
AKL99 | Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton |
AKF99 | Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton |
AP05 | Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton |
APHR | Actin protein (rhodamine): human platelet | ea | cytoskeleton |
AR05 | Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton |
AT01 | Alpha-actinin protein: rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton |
RP01P | Arp2/3 protein complex: porcine brain | ea | cytoskeleton |
CS-TFC01 | Cardiac Thin Filament Complex (CTFC) | ea | cytoskeleton |
CF01 | Cofilin 1 protein: human recombinant | ea | cytoskeleton |
HPG6 | Gelsolin protein: Homo sapiens recombinant | ea | cytoskeleton |
MH01 | Heavy meromyosin protein | ea | cytoskeleton |
CS-MH03 | Heavy Meromyosin Protein (HMM Fragment) | ea | cytoskeleton |
CS-MYS03 | Myosin - cardiac S1 fragment | ea | cytoskeleton |
CS-MYS04 | Myosin - skeletal muscle S1 fragment | ea | cytoskeleton |
CS-MYS05 | Myosin - smooth muscle S1 fragment | ea | cytoskeleton |
MY02 | Myosin II protein: rabbit skeletal muscle | ea | cytoskeleton |
MY03 | Myosin protein: bovine cardiac muscle | ea | cytoskeleton |
PR02 | Profilin 1 protein: Untagged, human recombinant | ea | cytoskeleton |
PHDR1 | Rhodamine Phalloidin | ea | cytoskeleton |
CY-SC001 | SiR-Actin Kit | ea | cytoskeleton |
CY-SC013 | SiR700-Actin Kit | ea | cytoskeleton |
VCG03 | WASP protein VCA domain: GST tagged: human | ea | cytoskeleton |
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1：強大的進口輻射能力，血清、抗體(ti) 、耗材、大部分限製進口品等。
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6：我們(men) 還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權代理。
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