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haemtech HCVWF-0190說明書

 更新時間:2018-11-09 點擊量:1217

haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊(ce) 公司,是一家專(zhuan) 業(ye) 從(cong) 事體(ti) 外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要製造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產(chan) 品係列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑製劑,以及單克隆和多克隆抗體(ti) 的互補係列。還可提供因子缺乏的等離子體(ti) 和定製的血液采集管,用於(yu) 臨(lin) 床研究。提供的服務包括定製蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同製造和合同研究。

 

haemtech HCVWF-0190說明書(shu)

von Willebrand因子(和VIII免費)

血管性血友病因子
多聚體(ti) 結構說明了具有結合因子VIII的1.8MDa von Willebrand因子(vWF)多聚體(ti) 的形成。每個(ge) vWF單體(ti) (Mr = 260,000)在分子的NH2末端附近含有因子VIII結合位點。單體(ti) 通過二硫鍵端對端地連接(NH 2至NH 2和COOH至COOH)以形成大的多聚體(ti) 。成熟的多聚體(ti) 可以每個(ge) 單體(ti) 亞(ya) 基結合一個(ge) 因子VIII分子。

 

 

HCVWF-0190 Human von Willebrand Factor

Size

100 µg

Formulation

25 mM NaCitrate, 100 mM NaCl, 100 mM Glycine, pH 6.8

 

Storage

-80°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

N/A

Shelf Life (properly stored)

12 months

HCVWF-0191 Human von Willebrand Factor - VIII "Free"

Size

100 µg

Formulation

25 mM NaCitrate, 100 mM NaCl, 100 mM Glycine, pH 6.8

 

Storage

-80°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

N/A

Shelf Life (properly stored)

12 months

血管性血友病因子(vWF)是一種多聚體(ti) 血漿糖蛋白,是正常止血血小板栓塞形成所需的(1-8)。成熟的血漿蛋白由明顯相同的亞(ya) 基(Mr = 260,000)組成,它們(men) 通過二硫鍵結合在一起。循環的vWF分子的大小範圍從(cong) 二聚體(ti) (Mr = 520,000)到極大的多聚體(ti) (Mr> 10,000,000)。在正常止血期間,較大的vWF多聚體(ti) 負責通過在血小板內(nei) 糖蛋白IB和內(nei) 皮下的暴露膠原之間形成橋接來促進血小板栓的形成(9-14)。缺乏vWF蛋白或存在導致聚合減少的異常可能導致生物活性喪(sang) 失,這是馮(feng) 維勒布蘭(lan) 德氏病的特征。

除了其在血小板栓塞形成中的作用外,vWF還負責血漿中因子VIII(抗血友病因子)的結合和轉運(15)。似乎後一事件是功能性因子VIII的穩定性和有效遞送的原因。研究表明,因子VIII與(yu) 成熟vWF亞(ya) 基的NH2末端部分結合,每個(ge) vWF單體(ti) 具有一個(ge) 因子VIII分子的化學計量(16,17)。

單鏈vWF單體(ti) 在NH 2 - 末端和COOH - 末端都含有大量半胱氨酸殘基,其參與(yu) 多聚體(ti) 形成。碳水化合物分析表明,近15%的vWF質量是由碳水化合物貢獻的(18)。似乎碳水化合物用於(yu) 保護vWF免於(yu) 蛋白水解,但對於(yu) 功能活性或多聚體(ti) 形成不是必需的。

使用Thorell(19)和Lollar(20)描述的方法的組合,從(cong) 檸檬酸鹽人血漿製備vWF。還可獲得因子VIII“遊離”vWF製劑,其進一步純化以確保去除因子VIII促凝血活性(仍存在抗原)。通過在還原條件下的SDS-PAGE判斷,製劑純度> 95%,並且通過SDS /瓊脂糖凝膠中的電泳測定由大的多聚體(ti) 組成。將蛋白質在0.025M檸檬酸鈉,0.1M甘氨酸,0.1M NaCl,pH6.8中冷凍運輸,在-70℃下儲(chu) 存。

 

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人類血管性血友病因子,每泳道1微克

緩衝(chong)

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),穀氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

本地化/次>

血漿和內(nei) 皮下

行動方式

通過在內(nei) 皮下形成血小板糖蛋白IB和暴露的膠原之間的橋接來促進血小板栓的形成; 也綁定和運輸因子VIII

分子量

260,000到> 10,000,000(1-8)

等電點

5.7-5.9(21)

消光係數

不適用; 通過總蛋白質測定確定濃度。

血漿濃度

10微克/毫升(21)

結構體(ti)

由相同的260,000個(ge) 分子量亞(ya) 基組成的多聚體(ti) 蛋白質

碳水化合物百分比

約15%(18)

 

參考

  • Hoyer,LW,Blood,58,1(1981)。
  • Ruggeri,ZM和Zimmerman,TS,J。Clin。Invest。,65,1318(1980)。
  • Zimmerman,TS,et al。,Proc。國家科。科學院。科學。USA,72,5121(1975)。
  • Hoyer,LW和Shainoff,JR,Blood,55,1056(1980)。
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  • Morton,LF,et al。,Thromb。Res。,32,545(1983)。
  • Tuddenham,EGD,et al。,Br。J. Haematol。,52,259(1982)。
  • Foster,PA,et al。,J.Biol。Chem。,262,8443(1987)。
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  • Federici,AB,et al。,J.Clin。Invest。,74,2049(1984)。
  • Thorell,L。和Blomback,B.,Thromb。Res。,35,431(1984)。
  • Lollar,P.,et al。,J.Biol。Chem。,263,10451(1988)。
  • Furlan,M.,Human Protein Data(A。Haeberli,ed。)©VCH Verlagsges,mbH,Weinheim

出版物

  • Garcia,A.,et al。,Blood。2005年11月15日; 106(10):3410-3414。(纖維蛋白原受體激活)
  • Liu,J.,et al。,Blood。2005年10月15日; 106(8):2750-2756。(VWF誘導的信號傳導)
  • Pergolizzi,R.,Blood。2006年8月1日; 108(3):862-869。(小鼠vWF病)

 

 

 

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