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haemtech HCAPC-0080說明書

 更新時間:2018-11-09 點擊量:1272

Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊(ce) 公司,是一家專(zhuan) 業(ye) 從(cong) 事體(ti) 外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要製造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產(chan) 品係列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑製劑,以及單克隆和多克隆抗體(ti) 的互補係列。還可提供因子缺乏的等離子體(ti) 和定製的血液采集管,用於(yu) 臨(lin) 床研究。提供的服務包括定製蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同製造和合同研究。

 

haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊(ce) 公司,是一家專(zhuan) 業(ye) 從(cong) 事體(ti) 外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要製造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產(chan) 品係列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑製劑,以及單克隆和多克隆抗體(ti) 的互補係列。還可提供因子缺乏的等離子體(ti) 和定製的血液采集管,用於(yu) 臨(lin) 床研究。提供的服務包括定製蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同製造和合同研究。

 

haemtech HCAPC-0080說明書(shu)

Activated Protein C

活化蛋白C.

 

活化蛋白C(APC)對因子Va的失活
表示APC對因子Va的蛋白水解失活,其中:PS =蛋白質S,PCPS =磷脂囊泡(或細胞表麵)和Ca ++ =鈣離子。因子Va對形成因子Vai的失活是由APC(實心箭頭)在三個(ge) 特定位點處的因子Va重鏈(94K)的蛋白水解產(chan) 生的(1,2)。因子Va重鏈中這些切割位點的位置如下:(人:R306,R506和R679)和(牛:R306,R505和R662)。輔因子分子的*失活需要在精氨酸-306位置切割。通過活化蛋白C在精氨酸-306處的切割僅(jin) 在膜的存在下發生,並且需要在精氨酸-505處預先切割重鏈。APC對因子Va輕鏈的蛋白水解僅(jin) 發生在牛分子中,並且不需要滅活(虛線箭頭)。

活化蛋白C(APC)是一種抗凝血絲(si) 氨酸蛋白酶,來自兩(liang) 條鏈,維生素K依賴性酶原,蛋白C(3-7)。α-凝血酶和血栓調節蛋白之間的複合物在蛋白C的重鏈中催化Arg-12(牛中的Arg-14)的單一切割,以產(chan) 生活化的蛋白C.幾種非生理學相關(guan) 的蛋白酶,例如RVV-X活化劑,胰蛋白酶和PROTAC也能夠激活蛋白C.

APC起到抗凝血劑的作用,其催化輔因子Va和VIIIa的蛋白水解失活,導致凝血酶原酶和因子Xase複合物的抑製。因子Va和VIIIa的失活是Ca 2+和磷脂依賴性的。維生素K依賴性輔因子蛋白S通過與(yu) APC形成1:1複合物(Kd = 6×10-9M)適度地增加該失活速率(8)。

有幾個(ge) 因素會(hui) 削弱APC的抗凝血活性。因子Xa通過競爭(zheng) 因子Va上的類似結合位點來保護因子Va免受APC的蛋白水解。凝血酶也被提議作為(wei) APC的調節劑通過蛋白質S的蛋白水解失活。此外,APC受循環肝素依賴性蛋白質的調節。 C抑製劑(PAI-3),循環肝素非依賴性蛋白C抑製劑,血小板衍生蛋白C抑製劑和PAI-1。據報道,在APC和兩(liang) 種類型的PAI之間形成的複合物是在輸注APC或體(ti) 內(nei) 產(chan) 生APC時觀察到的纖維蛋白溶解增加的原因。

除了我們(men) 的標準APC製劑,還可以獲得含有丹磺酰-EGEG-氯代甲基酮的活性位點封閉形式。

 

 

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HCAPC-0080 人類活性蛋白C

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尺寸

50微克

公式

50%(體(ti) 積/體(ti) 積)甘油/ H 2 O.

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存儲(chu)

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決(jue) 定

顯色分析

保質期(妥善保存)

12個(ge) 月

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 HCAPC-DEGR 人類活化蛋白C - DEGR(活性位點受阻)

尺寸

50微克

公式

20mM Tris,150mM NaCl,pH 7.4

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存儲(chu)

-80℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決(jue) 定

顯色分析

保質期(妥善保存)

12個(ge) 月

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 BCAPC-1080 牛活性蛋白C

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尺寸

50微克

公式

50%(體(ti) 積/體(ti) 積)甘油/ H 2 O.

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存儲(chu)

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決(jue) 定

顯色分析

保質期(妥善保存)

12個(ge) 月

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 BCAPC-DEGR 牛活性蛋白C - DEGR(活性位點受阻)

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尺寸

50微克

公式

20mM Hepes,150mM NaCl,pH 7.4

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存儲(chu)

-80℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

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活動決(jue) 定

顯色分析

保質期(妥善保存)

12個(ge) 月

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通過用凝血酶活化然後通過離子交換層析(4)從(cong) 純化的蛋白C製備活化的蛋白C. APC以50%(vol / vol)甘油/ H2O供應,應儲(chu) 存在-20oC。通過SDS-PAGE分析確定純度,並使用顯色底物測定法測量活性。根據APC耐藥性測定的要求,還測試了所有生產(chan) 批次的APC延長正常人血漿aPTT的能力(10,11)。每批次提供該測試的結果,作為(wei) aPTT(+/- APC)比率(10nM APC)。

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人aPC,每泳道1μg

緩衝(chong)

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),穀氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等離子體(ti)

行動方式

抗凝血劑,使因子Va和VIIIa失活

分子量

56,200(人類)(5)
52,650(牛)(5)

消光係數

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 14.5(人類)(9)

 

 

= 13.7(牛)(9)

 

等電點

4.4-4.8(人類)(9)
4.2-4.5(牛)(9)

結構體(ti)

兩(liang) 條鏈,Mr = 35,000和21,000,二硫鍵連接,NH2-末端gla結構域兩(liang) 個(ge) EGF結構域

碳水化合物百分比

23%(人類)(5)
14%(牛)(5)

翻譯後修改

十一個(ge) gla殘留物(牛),九個(ge) gla殘基(人),一個(ge) β-羥基天冬氨酸

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