產(chan) 品 |
CRM197-1,純化蛋白質,1毫克 |
CRM197-10,純化蛋白質,10毫克 |
CRM197-20,純化蛋白質,20毫克 |
交叉反應材料197(CRM197)是一種基因無毒形式的白喉毒素(DT)。CRM197中的單堿基變化(位置52處的穀氨酸至甘氨酸)使A鏈的ADP-核糖基化活性失效,減弱毒性1,2。盡管CRM197是無毒的,但它在免疫學上與(yu) 白喉毒素無法區分。CRM197作為(wei) 多糖和半抗原的載體(ti) 起作用,使其在許多結合疫苗中具有免疫原性。
聖甲蟲基因組學CRM197是重組形式的清潔基因表達® 大腸杆菌,我們(men) 的專(zhuan) 有平台。
SOURCE
清潔基因組® 大腸杆菌中表達的重組CRM197
產(chan) 品分子量: 58.4 kDa
圖1:Scarab Genomics的CRM197非常純淨,並且在批次之間保持一致。每批Scarab的CRM197的五個(ge) 重複在Bis-Tris 4-12%梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上運行並用GelCode TM Blue染色,然後通過凝膠掃描評估純度。計算每批的平均純度並如下分配:圖A純度98.3%,圖B純度95.5%。
圖2:Scarab Genomics的CRM197純度高於(yu) 其他商業(ye) 來源。將來自每種來源的2微克CRM197在Bis-Tris 4-12%梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上電泳並用GelCode TM Blue染色。Scarab產(chan) 品中幾乎不存在分解產(chan) 物(表示為(wei) A和B帶)。一些泳道中的被塗汙的背景是由於(yu) 蛋白質降解和宿主蛋白質的,兩(liang) 者在Scarab產(chan) 品中都是小的。泳道1大小標記,泳道2空泳道3 Scarab Genomics CRM197,SG1泳道4 Scarab Genomics CRM197,SG2,Lane 5供應商F,泳道6供應商M和泳道7供應商L.
圖3:Scarab CRM197的LC MS肽圖譜證實它與(yu) 原生CRM197具有生物學相似性。在Scarab的高純度CRM197上進行氨基酸測序和質譜(MS)。MS材料的廣泛生物信息學分析顯示沒有翻譯後修飾。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化後接著納米液相色譜-MS / MS鑒定出非常高的蛋白質覆蓋率(~97-98%)。Scarab CRM197上的電噴霧電離質譜(ESI-MS)證實了預期的肽序列。沒有觀察到與(yu) 報道的氨基酸組成和側(ce) 鏈修飾的差異。
圖4:聖甲蟲的CRM197結合有效。並非CRM197中的所有賴氨酸都暴露在蛋白質表麵上以進行潛在的綴合。采用Solulink的ChromaLink™生物素結合測定(San Diego,CA),利用NHS酯反應方案將生物素與(yu) 伯胺結合,我們(men) 證實Scarab的CRM197上至少有10個(ge) 位點可用於(yu) 結合。這種光學定量(在354nm處的吸光度)功能測試證實,Scarab的CRM197上的賴氨酸可與(yu) 半抗原結合,如天然CRM197。
質量控製
純度: | 通過SDS-PAGE檢測≥95%CRM197 |
A鏈和B鏈含量≤總CRM197的5% | |
濃度: | 在150mM NaCl,25mM HEPES,pH7.4中4mg / mL,通過280nm處的吸光度,使用E0.1%= 1.07對1mg / mL溶液 |
內(nei) 毒素: | 通過動態濁度LAL法≤25EU/ mg蛋白質(大靈敏度= 0.01 EU / mL) |
二聚體(ti) : | ≤5% |
等級: CRM197僅(jin) 供研究使用,不適用於(yu) 人類或診斷代理。
儲(chu) 藏條件:
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