BioThema*專(zhuan) 注於(yu) 螢火蟲熒光素酶反應的分析應用，無論是檢測細胞，測量酶活性還是其他東(dong) 西。在該反應中，用ATP（三磷酸腺苷）活化熒光素，然後氧化成氧化熒光素和CO 2。氧化熒光素以激發態形成，並在進入其基態時發光。通常在所謂的發光計中測量光。

ATP + 熒光素+ O 2 -熒光素酶 - > AMP +焦磷酸+氧化熒光素+ CO 2 +光

在ATP的測定中，光發射可以基本上恒定或快速衰減。因此，基於(yu) 螢火蟲熒光素酶反應，存在穩定的光和閃光型ATP試劑。在熒光素酶水平低的情況下，每分鍾消耗的ATP比例可以忽略不計，然後光可以幾乎恒定但也很低。在高水平的熒光素酶下，ATP被消耗是不可避免的，導致光迅速減少，但初峰值光很高。實際上，峰高和衰減率都與(yu) 熒光素酶活性成比例。BioThema開發了三種ATP試劑

BioThema 266-112說明書(shu)

Microbial ATP Kit HS微生物ATP試劑盒HS

用於測定哺乳動物細胞中細菌細胞中的細胞內ATP

該試劑盒的靈敏度可以在各種情況下測定低ATP水平：
1。液體(ti) 的細菌控製（如飲用水，工藝用水，飲料和啤酒）
2。藥品和化妝品
3.細胞與(yu) 表麵的粘附
4.質量保證洗衣
5.細菌生長。
6.對細菌的抗生素作用

SKU：266-112

應用

該試劑盒用於(yu) 測定微生物細胞中的細胞內(nei) ATP（三磷酸腺苷）。大多數類型的體(ti) 細胞，例如血細胞用中性洗滌劑裂解。樣品中釋放的ATP和其他形式的細胞外ATP被酶促降解。如果目的是確定細菌和體(ti) 細胞中的細胞內(nei) ATP，我們(men) 建議不含裂解劑的266-111細胞內(nei) ATP試劑盒。所有活細胞都含有ATP，它在不同細胞過程之間起著能量貨幣的作用。當細胞死於(yu) 自然原因時，ATP通常會(hui) 降解。在所有類型的細胞中，小心地將ATP的細胞內(nei) 濃度調節至相似水平。因此，ATP是細胞內(nei) 總體(ti) 積的良好估計。大多數細菌細胞含有大約。2×10 -18每個(ge) 細胞的摩爾ATP，而大多數真核細胞由於(yu) 其較大的尺寸，含有10-15摩爾ATP或更多。ATP生物質試劑盒HS，細胞內(nei) ATP試劑盒HS和微生物ATP試劑盒HS含有具有高熒光素酶活性的ATP試劑HS（高靈敏度）。ATP試劑HS中的熒光素酶活性實際上非常高，如果在重構過程中受到汙染，它將每38分鍾將ATP背景降低一個(ge) 數量級。混合樣品和ATP試劑HS後，光強度衰減約。每分鍾6％。這足夠慢以允許手動混合，並且可以使用沒有試劑分配器的管發光計。試劑的檢出限為(wei) 10×10 -18使用靈敏的光度計測量ATP。這相當於(yu) 5個(ge) 細菌細胞。我們(men) 必須在這裏區分細菌細胞和CFU，因為(wei) 一個(ge) CFU可能由幾個(ge) 細胞組成。如果檢測限不充分，可以通過微濾濃縮樣品，這一過程也可以去除細胞外ATP（請聯係BioThema獲取更多信息）。

儀器

可以使用任何管發光計。應該注意的是，管發光計比微孔板發光計靈敏度大約一個(ge) 數量級。如果使用微孔板發光計，它應該至少有兩(liang) 個(ge) 分配器，並且應該能夠混合微孔板（參見測定程序）。

分析程序

詳細描述的程序可在“使用說明”中找到，該說明書(shu) 隨每個(ge) 套件一起提供。

產品特性

該試劑盒包含用於(yu) 150-375測定的試劑（每個(ge) 小瓶ATP試劑HS足以在管發光計中進行25次測定，在微孔板發光計中進行62.5次測定）。

檢測限：

使用靈敏的發光計，試劑的檢出限為(wei) 10×10 -18 mol ATP。

參考

1 Lundin，A。（2000）在生物量，酶和代謝物的ATP相關(guan) 測定中使用螢火蟲熒光素酶。方法Enzymol。305,346-370。
2 Lundin，A。（1999）ATP檢測生物汙染。在“30th R3-Nordic Contamination Control Symposium”（Eds.G.Wirtanen，S.Salo and A. Mikkola），VTT，Espoo，Finland，pp.337-352。

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