intronbio 25021說明書

intronbio 25021說明書(shu)

i-菲律宾新利网上娱乐™ Polymerase

i-菲律宾新利网上娱乐™聚合酶

產(chan) 品信息

描述

高純度i-菲律宾新利网上娱乐™PCR核心試劑盒，無論模板類型和反應條件如何，均可顯示穩定，的擴增

• •94 KDa熱穩定聚合酶
• •高純度菲律宾新利网上娱乐 聚合酶
     - 去除大腸杆菌衍生的蛋白質和，可作為PCR來源
• •適用於從克隆到人類基因組的
• •緩衝液優化，以顯示良聚合酶活性，無論模板類型或反應條件如何

i-菲律宾新利网上娱乐™聚合酶是一種94kDa的熱穩定聚合酶，通過克隆Thermus aquaticus（菌株YT1）的聚合酶基因在大腸杆菌中表達。它去除了大腸杆菌來源的蛋白質和，它可以作為(wei) PCR中的汙染物，是穩定有效的擴增產(chan) 物。基因組，c等可以擴增至5Kb。PCR（聚合酶鏈反應）是通過特異性重複特定位點的合成來擴增試管中所需分子的方法。結果，可以使用非常少量的合成大量的。當然，它廣泛用於(yu) 基礎生物學，醫學和生物學領域。我們(men) 現在正在簡單快捷地擴大其在法醫，食品，環境衛生和動植物檢驗領域的使用範圍。⁵⁸體(ti) 外-10 倍。擴增的可用於(yu) 如下的各種實驗。根據實驗結果，可以應用各種醫學研究。在開發該方法的早期，使用大腸杆菌聚合物進行PCR，因此必須在每次變性時補充變性大腸杆菌的聚合酶。然而，通過在PCR中使用從(cong) Thermus aquaticus分離的熱穩定聚合酶，我們(men) 不必每一步都做補充酶的麻煩任務。結果，PCR成為(wei) 分子生物學*的方法。PCR具有一係列三個(ge) 步驟並重複30至40次。

PCR的步是的變性，通過加熱分離兩(liang) 條鏈。每個(ge) 分離的用作模板，變性溫度取決(jue) 於(yu) 中G + C的量和長度。PCR的第二步是退火。在此階段，引物與(yu) 模板結合，退火溫度是決(jue) 定反應準確性的重要因素。如果溫度太高，引物將與(yu) 模板結合得太弱。如果溫度太低，可以擴增不需要的，因為(wei) 引物非特異性結合。PCR的第三步是延伸步驟。在這個(ge) 階段，耐熱聚合酶將從(cong) 模板產(chan) 生新的。i-菲律宾新利网上娱乐™聚合酶除高純度酶外，通過優(you) 化緩衝(chong) 液組合物以顯示良聚合酶活性，無論模板類型或模板的一半，都可以獲得高度可重複的結果。由於(yu) 用該酶擴增的大多數產(chan) 物在3端具有堿基A，因此可以將PCR產(chan) 物原樣克隆到T載體(ti) 中。它也可以通過用聚合酶如Klenow 聚合酶或T4 聚合酶填充它而將其磷酸化成平末端而克隆到平端載體(ti) 中。

應用

• 01基因組，c擴增至5kb
• 02T / A克隆或平端克隆

套件內(nei) 容

技術數據

靈敏度比較數據（與(yu) 其他公司比較）

i-菲律宾新利网上娱乐 TM 聚合酶與(yu) 公司A，B相同功能的聚合酶的靈敏度比較。在該實驗中，通過濃縮稀釋牛g並用CSF引物擴增。

泳道M，100bp 標記; 泳道1,1ng g; 泳道2,100pg g; 泳道3,10pg g; 泳道4,1 gg g; 泳道5,100fg g; 泳道N，陰性對照

批次穩定性數據

確認了每批i-菲律宾新利网上娱乐 TM 聚合酶的靈敏度活性。從(cong) 連續稀釋的SNU-1 c和λ中擴增GAPDH（575bp）和1Kb片段以確認靈敏度。使用1單位的i-菲律宾新利网上娱乐 TM 聚合酶擴增總共20ml反應混合物，並通過瓊脂糖凝膠電泳分析5ml。

泳道M，100bp 標記; 1 Kb 標記; 泳道N，陰性對照