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Cytoskeleton BK163-S說明書

 更新時間:2019-02-18 點擊量:1555

Cytoskeleton,Inc。成立於(yu) 1993年。從(cong) 一開始我們(men) 就不斷擴展我們(men) 的產(chan) 品線。

Cytoskeleton,Inc。很高興(xing) 為(wei) 藥物篩選,信號轉導和細胞骨架研究提供廣泛的試劑盒和產(chan) 品。我們(men) 專(zhuan) 注於(yu) 生產(chan) 純化蛋白質和易於(yu) 使用的試劑盒,以研究生物化學和細胞過程。我們(men) 的試劑盒可用於(yu) 少量樣品,用於(yu) 基礎研究或小屏幕(Biochem Kits™),也可用於(yu) 大屏幕的高通量樣品(CytoDYNAMIX Screens™)。

除了我們(men) 現有的產(chan) 品,我們(men) 還在產(chan) 品線中為(wei) 微管,微管蛋白,運動蛋白,小G蛋白效應物,GAP,GEF和其他幾種蛋白提供藥物篩選服務。

Cytoskeleton BK163-S說明書(shu)

 

Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒(10次檢測)

10種檢測方法(Cat。#BK163-S)

Signal-Seeker™係列產(chan) 品的開發旨在簡化專(zhuan) 家和非專(zhuan) 業(ye) 人士對關(guan) 鍵調節蛋白修飾的分析。全麵的Signal-Seeker™試劑盒提供親(qin) 和珠係統,可從(cong) 任何給定的細胞或組織裂解液中分離和富集修飾的蛋白質。然後使用針對靶蛋白的抗體(ti) 通過標準蛋白質印跡程序分析富集的蛋白質群體(ti) 。

產(chan) 品用途包括

  • 調查瞬態監管機製
  • 測量多種途徑成員蛋白的信號傳導事件 
  • 發現您感興趣的蛋白質的新修改
  • 深入了解監管機製
  • 測量內源性或瞬時表達的蛋白質信號傳導事件

 

套件內(nei) 容

乙酰賴氨酸試劑盒包含以下組分:

裂解和蛋白質定量步驟IP和預清除步驟洗步驟洗脫步驟西部一步

 BlastR™裂解緩衝(chong) 液

 BlastR™稀釋緩衝(chong) 液

 BlastR™過濾器

 蛋白酶抑製劑雞尾酒

 HDAC抑製劑雞尾酒

 Precision Red™蛋白質分析試劑

 乙酰賴氨酸親(qin) 和珠

 IP控製珠

 

 

 

 

 BlastR™洗滌緩衝(chong) 液

 

 

 

 

 

 旋轉列

 珠子洗脫緩衝(chong) 液

 

 

 

 

 化學發光試劑A.

 化學發光試劑B.

 抗乙酰賴氨酸-HRP抗體(ti)

 

 

 

 

示例結果

這些套件有很多應用,這裏我們(men) 描述一個(ge) 有趣的例子:

應用1:調查顯著的乙酰化事件

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒進行免疫沉澱,與(yu) 細胞信號傳(chuan) 導乙酰賴氨酸抗體(ti) 和免疫組化乙酰賴氨酸親(qin) 和珠相比較

圖1.各種乙酰基 - 賴氨酸親(qin) 和試劑用於(yu) 來自Cos-7細胞的IP乙酰化蛋白質,用TSA(1m M)和煙酰胺(1mM)處理(+)或未處理( - )6小時。(1)16.7  AAC04珠漿液(20升克抗體(ti) )。(2)50  AAC04珠漿液(60升克抗體(ti) )。(3)抗乙酰賴氨酸兔單克隆混合物(Cell Signaling,按製造商的說明書(shu) 1:100)。(4)乙酰ImmuneChem賴氨酸親(qin) 和力珠(40 克抗體(ti) )。(5)ImmunChem乙酰賴氨酸珠(80 克抗體(ti) )。(6)正常小鼠IgG對照珠(60 g抗體(ti) )。洗脫富集的乙酰化蛋白質的總曲線,並通過蛋白質印跡用AAC03-HRP抗體(ti) (1:3000)分析。AAC04在富集廣泛的乙酰化蛋白質方麵表現出色,而其他商業(ye) 乙酰賴氨酸富集試劑主要富集豐(feng) 富的乙酰化蛋白質(例如乙酰化微管蛋白和組蛋白)。

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒免疫沉澱靶特異性乙酰化蛋白

圖2A:使用BlastR緩衝(chong) 液分離A431細胞,未處理( - )或用1m M TSA和1mM煙酰胺處理(+)6小時。使用AAC04珠(60m g)進行IP 。通過SDS-PAGE分離總細胞裂解物(輸入)和免疫沉澱的樣品,並通過蛋白質印跡用針對EGFR的抗體(ti) (Millipore,1:1000),Hsp90(Abcam,1:20,000),P53(Sigma,1:2000)進行分析,和RhoDGI(Millipore,1:1000)

使用Signal-Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒從(cong) 肝髒和心髒組織中免疫沉澱乙酰化蛋白

圖2B:用BlastR緩衝(chong) 液獲得小鼠組織提取物(肝髒和心髒)。使用AAC04珠(60,進行IP  g)或mIgG對照珠(#CIG02,60 在組織提取物的1mg的克)。通過SDS-PAGE分離富集的蛋白質,並通過蛋白質印跡用AAC03-HRP(1:3000)分析。