immuquest IQ580說明書

橋粒芯蛋白2抗體[7H9]

使用橋粒芯蛋白2抗體[7H9]在A431細胞裂解物上進行Western印跡

目錄號：IQ580

£226.00

目標抗原

Desmoglein 2

主要說明

小鼠抗橋粒芯糖蛋白2 [7H9]

目錄編號

IQ580

數量

0.1毫升

濃度

1mg / ml的

克隆

7H9

主辦

老鼠

同型

的IgG1

免疫原

人橋粒芯糖蛋白-2的氨基酸37-164與(yu) GST融合

骨髓瘤/融合伴侶(lv)

NS1骨髓瘤

物種反應性

人的

純化

蛋白A親(qin) 和色譜

格式

純化的抗體(ti) 含有PBS + 0.1％疊氮化NA

應用

WB，ICC / IF

稀釋液

宜抗體(ti) 稀釋應通過滴定確定，但作為(wei) 指導起點

WB 1：100 160 kDa波段（特別識別橋粒芯糖蛋白-2的前體(ti) 區域）

參考

Keim，S。等。人。針對人橋粒芯糖蛋白-2前體(ti) 的單克隆抗體(ti) 的產(chan) 生和表征。雜交瘤卷 27號：249-258（2008）PUBMED

數據庫鏈接

Entrez基因：1829  人類

Entrez Gene：13511  鼠標

Omim：125671  人類

SwissProt：Q14126  人類

SwissProt：O55111  鼠標

Unigene：412597  人類

Unigene：345891  鼠標

也稱為(wei)

ARVC 10抗體(ti) ; ARVC10抗體(ti) ; ARVD 10抗體(ti) ; ARVD10抗體(ti) ; Cadherin家族成員5抗體(ti) ; CDHF 5抗體(ti) ; CDHF5抗體(ti) ; CMD1BB抗體(ti) ; Desmoglein 2抗體(ti)

本產(chan) 品僅(jin) 供研究使用。不用於(yu) 治療或診斷用途。

細胞間橋粒連接的組成部分。參與(yu) 斑塊蛋白和介導細胞 - 細胞粘附的中間絲(si) 的相互作用

免疫熒光方案 - 甲醛固定

   1.從(cong) Tcunit收集細胞，並用吸力從(cong) 培養(yang) 皿中取出培養(yang) 基。
   2.用1x PBS洗滌並取出。
   3.在室溫下在軌道振蕩器上將細胞在預熱（37℃）對甲醛中孵育12分鍾。
   4.去除PFA並在室溫下在1x PBS中的0.5％Triton X-100中孵育5分鍾。
   5.準備封閉試劑，這也是抗體(ti) 稀釋劑。
   6.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次，在軌道振蕩器上洗滌4分鍾/洗滌。
   7.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鍾。
   8.準備一抗（50μl/蓋玻片）和濕潤染色室。
   9.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次並短暫風幹。
  10.在室溫下在黑暗的染色室中與(yu) 一抗孵育1小時。在此期間準備二抗。
  11.用1x PBS洗滌細胞5次（每個(ge) 燒杯更換5個(ge) 燒杯/ 5個(ge) 計數）
  12。在室溫下在黑暗的染色室中與(yu) 第二抗體(ti) 孵育1小時。
  13.用1x PBS洗滌細胞5次。
  14.登上達皮。

溶液（染色當天新鮮製備）。

    * 1x磷酸鹽緩衝(chong) 鹽水。
    *封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
    *固定液：3.5％對甲醛。

1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl並檢查pH指示條。PH值應為(wei) 7.4。完成體(ti) 積，d.H20至25ml，加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。


免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定

   1.從(cong) TCunit收集細胞，並用吸力從(cong) 培養(yang) 皿中取出培養(yang) 基。
   2.用1x PBS洗滌並取出。
   3.用冷甲醇：丙酮1：1在冰上固定細胞10分鍾。
   4.製備阻斷試劑，這也是抗體(ti) 的稀釋劑。
   5.取出固定劑並在室溫下用1x PBS洗滌細胞3次，在軌道振蕩器上洗滌4分鍾。
   6.在室溫下用1％NCS和1x PBS封閉30分鍾。
   7.準備一抗（50？l /蓋玻片）和濕染色室。
   8.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次並風幹約7分鍾。
   9.在室溫下在室溫下與(yu) 一抗孵育1小時，在染色室中避光。在此期間準備二抗。
  10.用1x PBS洗滌細胞5次（每個(ge) 燒杯更換5次燒杯/ 5次計數）
  11。在室溫下，在染色室的黑暗中與(yu) 第二抗體(ti) 孵育1小時。
  12.用1x PBS洗滌細胞5次。
  13.登上達皮。

溶液（染色當天新鮮製備）

    * 1x磷酸鹽緩衝(chong) 鹽水。
    *封閉試劑：1x PBS中1％NCS（使用新鮮的10x PBS）。
    *固定液：甲醇：丙酮1：1冰冷。



Western Blotting Protocol

   1.將凝膠轉移到PDVF或硝酸纖維素膜上
   2.將膜置於(yu) 封閉緩衝(chong) 液中的塑料托盤中攪拌1小時
   3.在洗滌緩衝(chong) 液中衝(chong) 洗
   4.在洗滌緩衝(chong) 液和一抗中孵育1小時
   5.洗滌6次X用洗滌緩衝(chong) 液洗滌5分鍾
   6.在洗滌緩衝(chong) 液和二抗中孵育1小時
   7.用洗滌緩衝(chong) 液洗滌6X 5分鍾
   8.檢測（例如ECL，Amersham根據製造商的說明）

洗滌緩衝(chong) 液
PBS + 0.1％Tween 20 

阻斷緩衝(chong) 液
洗滌緩衝(chong) 液+ 5％奶粉

所用抗體(ti) 的濃度取決(jue) 於(yu) 每種抗體(ti) ，抗原的量和所用的檢測方法。通常，稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的範圍內(nei) ，但通常必須憑經驗確定。