Formedium植物媒介促進大腸杆菌培養

Formedium在其培養(yang) 基中添加了六種植物培養(yang) 基，用於(yu) 培養(yang) 大腸杆菌。在所有六種植物培養(yang) 基中，對於(yu) 以下LB Miller培養(yang) 基，LB Lennox培養(yang) 基和2YT培養(yang) 基的配方，胰蛋白腖已被大豆蛋白腖替代。胰蛋白腖和酵母提取物作為(wei) 生長和蛋白質表達的一般氮源存在。兩(liang) 者都是氮的*來源，另外酵母提取物提供B型維生素，碳水化合物和生長因子。

在植物培養(yang) 基中，因此避免了用動物來源的成分汙染培養(yang) 基，用大豆蛋白腖代替胰蛋白腖。與(yu) 作為(wei) 牛奶酪蛋白的胰腺消化物的胰蛋白腖相反，其替代大豆蛋白腖通過大豆粉的Papaic水解製備。與(yu) 胰蛋白腖相比，大豆蛋白腖的氮含量（9.5％）略低，其氨基氮含量（3％）相同。這種差異小於(yu) 2％，並且不會(hui) 顯著影響生長和蛋白質表達。

使用胰蛋白腖作為(wei) 氮源和大豆蛋白腖作為(wei) 替代來源的比較研究顯示生長沒有差異。

在液體(ti) 培養(yang) 基中，通過680nm處的光密度測量大腸杆菌的細胞生長，這在LB Miller Broth，LB Lennox Broth和含有胰蛋白腖或大豆蛋白腖的2YT肉湯培養(yang) 基中培養(yang) 的細胞的生長曲線之間未顯示任何顯著差異。
在LB Lennox Agar的菌落形成單位（CFU）的固體(ti) 培養(yang) 基計數中，含有胰蛋白腖或大豆蛋白腖的LB Miller瓊脂和2YT瓊脂彼此沒有顯著差異。

含有大豆蛋白腖和胰蛋白腖的培養(yang) 基之間沒有顯著差異。與(yu) 在液體(ti) 和固體(ti) 培養(yang) 基中使用胰蛋白腖相比，大豆蛋白腖也表現良好。

在所有三種培養(yang) 基LB Miller Vegetal培養(yang) 基，LB Lennox Vegetal培養(yang) 基和包含大豆蛋白腖的2YT植物培養(yang) 基中，不存在動物來源的成分。由於(yu) 沒有動物源組件Formedium證明;

• 在本產品的製造過程中，不使用源自動物或來自動物的原料。
• 生產中使用的材料符合經指令1999/82 / EC修訂的歐洲指令75/318 / EEC。

因此，Formedium Ltd.認為(wei) 該產(chan) 品在牛海綿狀腦病（BSE）或傳(chuan) 染性海綿狀腦病（TSE）方麵沒有任何風險。

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方法：
肉湯培養(yang) ：在LB Lennox，LB Miller和2YT培養(yang) 基中測量細胞生長。
每種培養(yang) 基存在於(yu) 含有胰蛋白腖或大豆蛋白腖的製劑中。

• 將單菌落在5ml所有三種培養基中孵育（3胰蛋白腖對3大豆蛋白腖）O / N在37℃，180rpm。
• 在第1天：100稀釋後，在150ml燒瓶中培養30ml，溫度為37℃，180rpm。通過每小時測量的680nm的光密度測量生長
• 3生物重複
• LB Lennox（g / l）; 大豆蛋白腖10或胰蛋白腖10，酵母提取物5，NaCl 5. 
  LB Miller（g / l）; 大豆蛋白腖10或胰蛋白腖10，酵母提取物5，NaCl 10. 
  2YT; （克/升）; 大豆蛋白腖16或胰蛋白腖16，酵母提取物10，NaCl 5。

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方法：
平板上的瓊脂培養(yang) ：在LB Lennox，LB Miller和2YT瓊脂平板上測量菌落形成單位的數量。
每種培養(yang) 基存在於(yu) 含有胰蛋白腖或大豆蛋白腖的製劑中。

• 將單菌落在5ml所有三種培養基中孵育（3胰蛋白腖對3大豆蛋白腖）O / N在37℃，180rpm。
• 第100天，將100μl10倍稀釋係列（至10-6）塗布在與瓊脂相同的培養基上（例如，Miller肉湯菌落到Miller瓊脂上，Lennox-Soya菌落到Lennox-Soya瓊脂上）。在37°C下孵育O / N.
• 3個生物重複的菌落計數（cfu / ml）
• LB Lennox（g / l）; 大豆蛋白腖10或胰蛋白腖10，酵母提取物5，NaCl 5，瓊脂15. 
  LB Miller（g / l）; 大豆蛋白腖10或胰蛋白腖10，酵母提取物5，NaCl 10，瓊脂
  15。2YT; （克/升）; 大豆蛋白腖16或胰蛋白腖16，酵母提取物10，NaCl 5，瓊脂15。

Formedium VLB-Agar Miller

VLB-Agar Miller VLB瓊脂

將40克粉末介質懸浮在1升蒸餾水中，在室溫下幹燥