€805.00
酶免疫測定法測定大腸杆菌 BL21（DE3）細胞係中的HCP 。
起動裝置為(wei) 客戶提供了所有必要的組件，可以快速，輕鬆地為(wei) 特定過程選擇合適的套件類型（A或D）。
入門套件包括四個(ge) 完整的即用型套件：
1x A型，1x D型
每種套件類型包含：
1預期用途
提供的Ecoli 360 HCP酶聯免疫吸附測定試劑盒是一種夾心酶聯免疫吸附測定法，將以微測試板形式進行。
本試驗用於(yu) 大腸杆菌宿主Ecoli-HCP的體(ti) 外定量測定。
細胞蛋白）重組生產(chan) 過程中的相關(guan) 樣品
各自的Ecoli細胞係。
該試劑盒包含執行HCP酶聯免疫吸附試驗所需的所有試劑。
測定範圍包括2 ng/ml到100 ng/ml的Ecoli HCP的初步工作範圍。
2.試劑盒中提供的試劑和材料
3.所需但不隨套件提供的材料和設備
•超純水（至少雙蒸餾質量），用於(yu) 稀釋洗滌緩衝(chong) 液（10x）
•吸水紙巾，用於(yu) 去除微試板清洗後的殘留液體(ti) 。
•用於(yu) 製備標準、控製和樣品的合適反應管
•適合洗滌緩衝(chong) 液的容器
•適用於(yu) 有效多通道移液的試劑庫
•培養(yang) 過程中覆蓋微型測試板的蓋子
•軌道微測試板振動篩（約500轉/分）和渦流混合器
•微型測試板清洗機（也可以手動清洗）
•精密移液管（體(ti) 積可調，從(cong) 10微升到5000微升），帶有合適的
•多通道移液管（100μl），帶有合適的
•用於(yu) 在450 nm（參考波長620）下測量光密度的微型板閱讀器-
690牛米）
4試劑的儲(chu) 存
所有提供的試劑（1到8）應在2-10°C下冷藏，並在使用前使用。
到期日期。
5試驗原理
Ecoli 360 HCP酶聯免疫吸附試驗是基於(yu) 96孔微試板的夾心酶免疫分析。
（1X8F條格式）。可能含有Ecoli-HCP雜質的樣品在微型測試板中培養(yang) 。
預先塗有多克隆山羊Ecoli-HCP特異性捕獲抗體(ti) 和不同Ecoli-HCP標準濃度孵育後校準曲線及平板
去除未結合成分的洗滌步驟，一種特定的生物素結合Ecoli-HCP特異性加入檢測抗體(ti) ，進一步洗滌後，結合檢測抗體(ti) 依次與(yu) 酶結合物（鏈黴親(qin) 和素結合過氧化物酶）作為(wei) 示蹤劑反應。
洗滌步驟，以四甲基聯苯胺（TMB）為(wei) 酶底物進行顯色反應。產(chan) 生藍色。在底物培養(yang) 時間結束時，反應被加入硫酸，將藍色變為(wei) 黃色，測量光密度。
在450 nm（參考波長620-690 nm）波長下進行光度測量。
井內(nei) 密度與(yu) 井內(nei) Ecoli-HCP濃度成正比。
根據相應的Ecoli-HCP計算未知樣品的濃度。
校準曲線。
警告和注意事項
-本試劑盒僅(jin) 用於(yu) 體(ti) 外研究，隻能由合格人員使用。
-開始分析前，仔細閱讀說明書(shu) 。
-注意批號和有效期。不要混合不同批次的試劑。不要使用過期的。
試劑。
-遵循良好的實驗室實踐和安全指南。穿著實驗室外套、一次性手套和
必要時戴防護眼鏡。
-試劑盒中的某些試劑含有Proclin®300作為(wei) 防腐劑。這些試劑可能會(hui) 腐蝕眼睛。
以及皮膚刺激，應小心處理。如果接觸到眼睛或皮膚，
立即用水衝(chong) 洗。
-儲(chu) 存避光底物溶液。
-停止溶液由0.5摩爾硫酸組成。該試劑具有腐蝕性，可能導致
眼睛和皮膚有刺激性。應小心處理。如果接觸到眼睛或皮膚，
立即用水衝(chong) 洗。
-剩餘(yu) 的試劑盒試劑和準備好的溶液必須被視為(wei) 潛在危險。
根據國家的安全指南和法規進行廢物處理。
7樣品處理和儲(chu) 存
工藝衍生樣品中HCP的穩定性尚未得到研究，因此，樣品
應冷藏（2°-10°C）或冷凍（等於(yu) 或低於(yu) -20°C），具體(ti) 取決(jue) 於(yu)
樣品中重組產(chan) 物的溫度要求。一般來說，反複凍結/
應避免樣品解凍。
8試劑製備
8.1清洗緩衝(chong) 液的製備（1X）
使用前用超純水（例如100 ml 10x）稀釋洗滌緩衝(chong) 液10x（2）1:10
用900毫升超純水濃縮，洗滌液（1X）在室內(nei) 穩定。
溫度，可在準備日後使用兩(liang) 周。
8.2編製Ecoli HCP標準
本試劑盒中提供的HCP標準是由Ecoli菌株製備的主標準。
BL21或W3110細胞溶解物，調節主標準的蛋白質濃度。
基於(yu) Bradford蛋白質法。
Ecoli 360 HCP酶聯免疫吸附測定的標準濃度應根據
在進行分析之前，試劑盒中相應的Ecoli HCP標準（4）。
Ecoli 360 HCP Elisa試劑盒說明書(shu) Biogenes GmbH版本2018年1月
- 4—
8在包含分析工作的分析緩衝(chong) 液（3）中製備了ELISA標準品（S1至S8）。
根據以下稀釋方案，範圍（約2 ng/ml至100 ng/ml Ecoli HCP）。
標準應僅(jin) 在編製之日使用。
8.3檢測器抗體(ti) 工作液（1X）的製備
用分析緩衝(chong) 液（3）稀釋檢測器抗體(ti) 100x溶液（5）1:100，進行一次微試驗。
將120μl的100x濃縮液與(yu) 12 ml分析緩衝(chong) 液混合。此項工作
溶液隻能在配製當天使用。
8.4酶結合工作液（1X）的製備
用分析緩衝(chong) 液（3）稀釋酶偶聯物100x溶液（6）1:100，進行一次微試驗。
將120μl的100x濃縮液與(yu) 12 ml分析緩衝(chong) 液混合。此項工作
溶液隻能在配製當天使用。
9樣品製備
如果存在集料，應通過離心去除集料，以確保適當
分析性能。一般來說，所有樣品工作稀釋液隻能在
準備工作。
在分析之前，應使用分析緩衝(chong) 液（3）稀釋樣品。小樣品稀釋度
應為(wei) 1:2。每種樣品類型的宜樣品稀釋度必須由用戶確定，
根據HCP含量，考慮分析工作範圍。
10化驗程序
所有酶聯免疫吸附測定步驟均在室溫（18-26°C）下進行。
使用前，讓試劑盒的所有材料和試劑達到室溫。
在達到室溫之前，不要打開預塗微型測試板（1）的箔袋。
未用於(yu) 分析的剩餘(yu) 板條應重新包裝到袋中
幹燥劑。把袋子封緊，以便冷藏。
在所有孵育步驟中，培養(yang) 皿應蓋上蓋子（不隨試劑盒一起提供），以便
防止溶液蒸發和汙染。
1。用標準品和樣品培養(yang) ：
用100μl/孔的Ecoli HCP標準品和分析對照品以及稀釋液填充平板。
樣品和連續搖動培養(yang) 2小時。標準，分析控製和
應至少對樣品進行重複分析。建議使用三種方法。
2。清洗：
去除洗井內(nei) 容物，用250微升/洗井衝(chong) 洗板4x。
緩衝(chong) 器（1X）。洗完後，將板倒置，用強力攻絲(si) 將殘液丟(diu) 棄。
吸水紙上的盤子。
三。與(yu) 檢測抗體(ti) 孵育：
用100μl/孔的檢測抗體(ti) 工作液（1X）填充平板並孵化。
連續搖動1.5小時。
4。清洗：
去除洗井內(nei) 容物，用250微升/洗井衝(chong) 洗板4x。
緩衝(chong) 器（1X）。洗完後，將板倒置，用強力攻絲(si) 將殘液丟(diu) 棄。
吸水紙上的盤子。
5。與(yu) 酶結合物孵育：
用100μl/孔的酶結合工作液（1X）填充培養(yang) 板並孵化。
持續搖晃20分鍾。
6。清洗：
去除洗井內(nei) 容物，用250微升/洗井衝(chong) 洗板4x。
緩衝(chong) 器（1X）。洗完後，將板倒置，用強力攻絲(si) 將殘液丟(diu) 棄。
吸水紙上的盤子。
7。用底物溶液培養(yang) 並停止：
加入100μl/孔的底物溶液（7），用
連續搖晃。如果15分鍾後顏色發展太低，則基板
潛伏期可延長至30分鍾。
直接向板中加入100μl/孔的停止液（8），停止顏色反應。
產(chan) 生黃色產(chan) 品。
8。測量：
用多通道顯微板閱讀器測量450 nm（OD450）處的光密度，並
給出分析的原始數據。620 nm到690 nm之間的參考波長為(wei)
推薦。
Ecoli 360 HCP Elisa試劑盒說明書(shu) Biogenes GmbH版本2018年1月
- 6—
11計算
為(wei) 了生成標準曲線和分析控製和樣品的計算，平均
對應複製每個(ge) 標準的OD450值。
借助適當的軟件生成標準曲線，宜使用非線性曲線
四參數或五參數方程的回歸模式。
根據校準曲線計算的未知樣品濃度必須乘以
樣品的稀釋係數。
電話
QQ掃一掃
