上海起發FRT-PGK-gb2-neo-FRT-loxP說明書

genebridges中國代理商--上海起發FRT-PGK-gb2-neo-FRT-loxP說明書(shu)

gene bridges A004

FRT-PGK-gb2-neo-FRT-loxP

Pro- and eukaryotic neomycin selection cassette flanked by FRT-sites and one additional downstream loxP site

原核和真核新黴素選擇盒兩(liang) 側(ce) 有frt位點和一個(ge) 額外的下遊loxp位點。

• ID: A004

描述

設計PGK-gb2-neo-FRT-loxP模板以分別在原核和真核細胞中選擇卡那黴素/新黴素。

它結合了用於(yu) 在大腸杆菌中表達卡那黴素抗性的原核啟動子（gb2）和用於(yu) 在哺乳動物細胞中表達新黴素抗性的真核啟動子（PGK）。原核啟動子gb2是Em7啟動子的略微修飾形式; 它比通常使用的Tn5啟動子介導更高的轉錄效率。小鼠磷酸葡萄糖激酶基因（PGK）的啟動子用作真核啟動子。合成的多腺苷酸化信號終止卡那黴素/新黴素表達。盒子側(ce) 翼為(wei) FRT位點，以便隨後通過Flp重組酶切除。另外的單個(ge) loxP位點位於(yu) 盒的3'末端。*不是我和Xho我的位點位於(yu) 盒子側(ce) 麵，便於(yu) 克隆限製性位點。使用提供的PCR模板，可以容易地產(chan) 生側(ce) 翼為(wei) 任何其他限製性位點的PGK-gb2-neo-FRT-loxP盒，以將盒克隆到所選擇的載體(ti) 中。可以通過在PCR引物中添加相應的序列來引入限製性位點。該模板可以容易地用於(yu) 產(chan) 生由Red / ET重組介導的靶向構建體(ti) 。

PGK-gb2-neo-FRT-loxP模板不是線性的，而是基於(yu) 質粒的（大小為(wei) 3,485bp）。由於(yu) 其R6K起源，質粒不能在大多數大腸杆菌菌株中複製。因此PCR產(chan) 物可以直接用於(yu) 下遊應用而無需任何進一步純化。使用每個(ge) 反應1μl作為(wei) 模板，可以進行至少20次PCR反應。

內容

• FRT-PGK-gb2-neo-FRT-loxP：PCR模板（50 ng/μl，20μl）

• 手冊(ce)

序列

FRT-PGK-GB2-NEO-FRT-的loxP

FRT  啟動子  neo ^R   loxP  終止子
 

AATTAACCCTCACTAAAGGGCGGCCGC GAAGTTCCTATTCTCTAGAAAGTATAGG AACTTC ATTCTACCGGGTAGGGGAGGCGCTTTTCCCAAGGCAGTCTGGAGCATGC GCTTTAGCAGCCCCGCTGGGCACTTGGCGCTACACAAGTGGCCTCTGGCCTCGCA CACATTCCACATCCACCGGTAGGCGCCAACCGGCTCCGTTCTTTGGTGGCCCCTT CGCGCCACCTTCCACTCCTCCCCTAGTCAGGAAGTTCCCCCCCGCCCCGCAGCTC GCGTCGTGCAGGACGTGACAAATGGAAGTAGCACGTCTCACTAGTCTCGTGCAGA TGGACAGCACCGCTGAGCAATGGAAGCGGGTAGGCCTTTGGGGCAGCGGCCAATA GCAGCTTTGCTCCTTCGCTTTCTGGGCTCAGAGGCTGGGAAGGGGTGGGTCCGGG GGCGGGCTCAGGGGCGGGCTCAGGGGCGGGGCGGGCGCCCGAAGGTCCTCCGGAG GCCCGGCATTCTGCACGCTTCAAAAGCGCACGTCTGCCGCGCTGTTCTCCTCTTC CTCATCTCCGGGCCTTTCGACCTGCAGCAGCACGTGTTGACAATTAATCATCGGC ATAGTATATCGGCATAGTATAATACGACAAGGTGAGGAACTAAACCATGGGATCG GCCATTGAACAAGATGGATTGCACGCAGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGC TATTCGGCTATGACTGGGCACAACAGACGATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTT CCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGGTTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGT GCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGCAGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGG GCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGACGTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCT GCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGGATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCC GAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGCAATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGG CTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCG GATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGGATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTC GCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCTCAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATC TCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGCTTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCG CTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCCGGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGAC ATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGCTGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACC GCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCCGCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTA TCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGAGCGGGACTCTGGGGTTCGAATAAAGACCGA CCAAGCGACGTCTGAGAGCTCCCTGGCGAATTCGGTACCAATAAAAGAGCTTTAT TTTCATGATCTGTGTGTTGGTTTTTTTTTTGGGGGGGG GAAGTTCCTATTCTCTAG AAAGTATAGGAACTTC AAGCTT ATAACTTCGTATAGCATACATTATACGAAGTTA TCTCGAGCCCTATAGTGAGTCGTATTA