Biolegend公司的試劑主要包括細胞免疫、細胞因子、趨化因子、粘附因子等與(yu) 癌症研究、T調節細胞研究、幹細胞研究、先天免疫研究、細胞周期分析、凋亡研究及特定修飾類抗體(ti) 等領域相關(guan) 的試劑，用於(yu) 流式、ELISA、免疫沉澱、WB、免疫熒光、免疫組化及體(ti) 內(nei) 體(ti) 外功能學試驗。其中，Biolegend公司的流式抗體(ti) 以其具有較寬範圍的熒光選擇及較高的性價(jia) 比，為(wei) 廣大科研工作者所接受！同時，公司配備了一支經驗豐(feng) 富的技術服務隊伍，為(wei) 客戶提供的配色方案及快速的售後處理服務！
biolegend 640952說明書(shu)
APC / Fire™750 Annexin V.
其他名稱 Annexin A5
| 貨號 | 尺寸 | 價錢 | |
|---|---|---|---|
| 640952 | 25次測試 | $ 115 | |
| 640953 | 100次測試 | $ 295 |
描述
膜聯蛋白V（或膜聯蛋白A5）是細胞內(nei) 蛋白質的膜聯蛋白家族的成員，其以鈣依賴性方式結合磷脂酰絲(si) 氨酸（PS）。PS通常僅(jin) 在健康細胞中的質膜細胞內(nei) 小葉上發現，但在早期細胞凋亡期間，膜不對稱性喪(sang) 失並且PS易位至外部小葉。然後熒光染料標記的膜聯蛋白V可用於(yu) 特異性靶向和鑒定凋亡細胞。Annexin V結合緩衝(chong) 液（目錄號422201）推薦用於(yu) 膜聯蛋白V染色。單獨的膜聯蛋白V結合不能區分凋亡細胞和壞死細胞。因此，我們(men) 建議使用我們(men) 的Helix NP™Blue（目錄號425305），Helix NP™Green（目錄號425303）或Helix NP™NIR（目錄號425301）。早期凋亡細胞將排除7-AAD和PI，
人T白血病細胞係Jurkat，用BioLegend的抗人CD95（EOS9.1）mAb（cat.305704）在37℃處理（左）或未處理（右）4小時，然後用膜聯蛋白V-APC染色/ Fire TM 750和Helix NP Green（cat.425303,1.25nM）在37℃下在膜聯蛋白結合緩衝(chong) 液中15分鍾。
產(chan) 品詳情：
反應
所有哺乳動物物種
公式
磷酸鹽緩衝(chong) 溶液，pH 7.2，含有0.09％Sodium azide和0.2％（w / v）BSA（來自美國）。
製備
通過親(qin) 和層析純化抗體(ti) ，並在適宜條件下與(yu) APC / Fire TM 750綴合。該溶液不含未綴合的APC / Fire TM 750和未綴合的抗體(ti) 。
濃度
批次特定（請聯係技術支持以獲得濃度和總μg量，或者如果您有批號，請使用我們(men) 的查找工具。）
存儲(chu) 和處理
抗體(ti) 溶液應在2°C至8°C之間進行稀釋，並避免長時間暴露在光線下。不要凍結。
應用
FC - 質量測試
推薦用法
通過流式細胞術分析的免疫熒光染色對該產(chan) 品的每批產(chan) 品進行質量控製測試。對於(yu) 流式細胞術應用，建議在100μl體(ti) 積的膜聯蛋白V結合緩衝(chong) 液（目錄號422201）中使用該試劑為(wei) 每100,000,000,000個(ge) 細胞5-15μg。建議滴定試劑以獲得每種應用的良性能。
* APC / Fire™750的大激發波長為(wei) 650 nm，大發射波長為(wei) 787 nm。
激發激光
紅色激光（633 nm）
應用筆記
膜聯蛋白V染色
1.用冷BioLegend細胞染色緩衝(chong) 液（目錄號420201）洗滌細胞兩(liang) 次，然後以1×10 6 細胞/ ml 的濃度將細胞重懸於(yu) 膜聯蛋白V結合緩衝(chong) 液（目錄號422201）中。
2.將100μl細胞懸浮液轉移到5ml試管中。
3.加入5μlAPC/ Fire TM 750膜聯蛋白V.
4.加入10μlPI溶液（目錄號421301）或7-AAD（目錄號420403/420404）。
5.輕輕渦旋細胞，在室溫（25°C），黑暗中孵育15分鍾。
6.向每個(ge) 管中加入400μl膜聯蛋白V結合緩衝(chong) 液（目錄號422201）。通過流式細胞術分析。
申請參考
（PubMed鏈接表示BioLegend引文）
生物學領域
細胞凋亡/腫瘤抑製因子/細胞死亡，細胞生物學，神經科學
我可以凍結膜聯蛋白V結合物嗎？
它不應該被凍結，因為(wei) 它會(hui) 導致由於(yu) 二聚化而喪(sang) 失生物活性。
膜聯蛋白V染色期間可以使用RPMI嗎？
遵循產(chan) 品數據表中所述的協議。此外，RPMI 1640具有相對高濃度的磷酸鹽和低鈣離子濃度，這對膜聯蛋白與(yu) 其目標磷脂酰絲(si) 氨酸（PS）的結合產(chan) 生負麵影響。使用膜聯蛋白V測量細胞死亡也可能受到冰上孵育時間，鈣濃度和培養(yang) 基類型的顯著影響。
pH和染色溫度如何影響膜聯蛋白V-磷脂酰絲(si) 氨酸的結合？
膜聯蛋白 - 磷脂酰絲(si) 氨酸結合在pH 5.2以下並且在42℃的溫度下延長孵育時丟(diu) 失。
您的Annexin是如何製作的以及它涵蓋的序列是什麽(me) ？
它在大腸杆菌中製備，覆蓋人aa Met1-Asp320。
Annexin V是否適合與(yu) CytoF®的Maxpar®試劑盒結合使用？
Maxpar®標記試劑盒需要部分還原蛋白質，因此可以通過還原抗體(ti) 鉸鏈區的SH基團引入金屬螯合物。人膜聯蛋白V僅(jin) 含有一個(ge) 半胱氨酸，據報道它是化學惰性的。因此，Maxpar®標簽協議不會(hui) 與(yu) 膜聯蛋白V工作，除非一個(ge) 自由的-SH基團可以引入到膜聯蛋白V.有關(guan) 膜聯蛋白V請谘詢發表論文像這樣的SH-介導的共軛更多信息一個(ge) 。
為(wei) 什麽(me) 我需要使用Annexin V Binding Buffer？
膜聯蛋白V結合需要溶液中存在鈣。因此，我們(men) 提供Annexin V結合緩衝(chong) 液（目錄號422201），它針對膜聯蛋白V染色的良性能進行了優(you) 化。
電話
QQ掃一掃
