Kerafast EC1001說明書

Kerafast是一家總部位於(yu) 波士頓的試劑公司，其主要任務是使科學界可以輕鬆訪問*的實驗室製造的研究工具。我們(men) 的產(chan) 品組合包括細胞係，抗體(ti) ，小分子，染料等，其中許多是其他地方所沒有的。自2011年成立以來，來自190多個(ge) 機構的研究人員已通過我們(men) 的在線平台提供了創新試劑，該平台可快速訪問材料，而無需經過傳(chuan) 統的“材料轉讓協議”流程。

我們(men) 為(wei) 提供實驗室處理所有的銷售和運輸物流，並從(cong) 每次銷售中返還豐(feng) 厚的特許權使用費。因此，我們(men) 有助於(yu) 為(wei) 實驗室節省時間和資源，同時為(wei) 進一步的研究產(chan) 生額外的資金。采購科學家可以更輕鬆地發現和獲取通常在其他地方無法獲得的*試劑，同時還可以資助其他研究人員的工作。這創建了一個(ge) 由科學家組成的社區，這些科學家為(wei) 更大的利益貢獻和獲取試劑，以促進他們(men) 自己的研究以及整體(ti) 科學進步。

2018年，Kerafast與(yu) 英國公司Absolute Antibody合並，其願景是向所有研究人員提供重組抗體(ti) 技術。合並使兩(liang) 家公司共同致力於(yu) 改善科學界可用的研究工具的選擇。

Kerafast EC1001說明書(shu)

LOBSTR E. coli Expression Strain

LOBSTR大腸杆菌表達菌株

LOBSTR（低背景菌株）是一種用於(yu) 表達重組多組氨酸標簽蛋白的大腸杆菌菌株。該菌株已針對一步下遊多組氨酸標簽親(qin) 和純化進行了優(you) 化，是表達能力差的蛋白質的理想選擇。

強調：

• 通過減少大腸杆菌 ArnA和SlyD 的汙染，獲得更高純度的重組多組氨酸標簽蛋白
• 一步純化即可消除主要的大腸杆菌汙染物
• 基於BL21（DE3）-與其他市售感受態細胞相同
• 純化具有挑戰性的低表達蛋白靶標的理想選擇
• 也可用：BL21（DE3）-RIL版本-包含argU，ileY和leuW tRNA基因的額外副本，以及氯黴素標記

大腸杆菌中表達的蛋白質的多組氨酸標簽親(qin) 和純化的主要缺點是天然富含組氨酸的蛋白質的存在，導致這些汙染物的共純化。在LOBSTR，ArnA和SlyD中，兩(liang) 種常見的大腸杆菌汙染物已根據表麵工程進行了修改。LOBSTR維持正常的細胞生長，但顯著降低了ArnA和SlyD的多組氨酸標簽結合親(qin) 和力。與(yu) 其他表達菌株相比，LOBSTR可產(chan) 生更高純度的重組蛋白，可一步純化低表達的重組蛋白。

來自麻省理工學院Thomas U. Schwartz博士的實驗室。

產(chan) 品規格

數據

LOBSTR和親(qin) 本BL21（DE3）菌株顯示可比的增長

從(cong) 0小時的初始同步直到終收獲，測量了LOBSTR和親(qin) 本BL21（DE3）菌株的生長（OD600）。兩(liang) 種菌株均攜帶相同的表達質粒，並在37°C下生長直至OD600〜0.7，此時在18、25和37C下誘導蛋白質表達（黑色箭頭）。LOBSTR和BL21（DE3）的生長曲線分別以紅色和黑色顯示。兩(liang) 種菌株在對數期和終細胞密度期間的細胞生長相似。取決(jue) 於(yu) 表達質粒，觀察到不同的生長行為(wei) ，但通常在LOBSTR和BL21（DE3）之間未觀察到生長差異。

從(cong) LOBSTR的His-tag純化中去除了ArnA和SlyD

顯示了使用普通金屬親(qin) 和力樹脂從(cong) BL21（DE3）和LOBSTR純化得到的測試樣品。（A）使用Ni Sepharose 6FF樹脂（GE Healthcare）從(cong) 親(qin) 本BL21（DE3）菌株和LOBSTR中純化出七個(ge) 蛋白質構建體(ti) 。該構建體(ti) 編號為(wei) 1-7，並含有6×His標簽（1和4）或10×His標簽（2、3、5→7）。洗脫樣品在SDS-PAGE凝膠上電泳，並用考馬斯藍R250染色。ArnA和SlyD用箭頭表示，靶蛋白用黑圈（△）表示。雙星號（**）表示Hsp15，這是另一種蛋白質，在LOBSTR中顯示出降低的Ni結合親(qin) 和力。（B）還在兩(liang) 種另外的常用樹脂Ni-NTA（Qiagen）和Talon（Clontech）上從(cong) BL21（DE3）和LOBSTR純化構建體(ti) 1和5。在每種情況下，

改編自： Andersen KR等。蛋白質。2013年11月; 81（11）：1857-61。