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PolyPlus FectoPRO產品

　更新時間：2019-10-11　點擊量：4261

 

PolyPlus-transfection（PT）是一家位於(yu) 法國的生物技術公司，目前已經通過了ISO9001:2000質量體(ti) 係認證。該公司擁有十幾年的的轉染試劑研發經驗，已經開發了一係列的轉染試劑，如：基因的體(ti) 內(nei) 和體(ti) 外轉染試劑、寡核苷酸轉染試劑和siRNA轉染試劑等，可以根據不同的需要獲得穩定或瞬時的轉染效果

PolyPlus FectoPRO產品

High yields in suspension CHO & HEK-293

  • 驚人的蛋白質和抗體產量
  • 使用較少的質粒量進行具有成本效益的瞬時基因表達
  • 與多種哺乳動物表達培養基和細胞係統兼容
  • 符合生物製造準則
  • 適用於高密度電池係統

技術指標

試劑

FectoPRO ®

分子交付

脫氧核糖核酸

應用領域

生物生產(chan)

細胞類型

懸浮液CHO，HEK-293及其衍生物

轉染數

1毫升FectoPRO的®足以轉染800毫升到1升以上的細胞培養(yang) 的

存儲

5°C±3°C，適當存放可穩定1-2年

提供

FectoPRO ®助推器

摘要

使用瞬時轉染和基因表達獲得的蛋白質產(chan) 量。

FectoPRO®轉染試劑盒專(zhuan) 門設計用於(yu) 使用低量（<1 µg / ml細胞培養(yang) 物）在各種無血清培養(yang) 基中的CHO和HEK-293懸浮細胞中增強瞬時基因表達（TGE）。

FectoPRO®介導的轉染過程可輕鬆擴展至幾毫升到幾升的細胞培養(yang) ，確保強大的可重複生產(chan) 蛋白質。更高的生產(chan) 率和對的低要求使FectoPRO®成為(wei) 生物生產(chan) 過程中具有成本效益的解決(jue) 方案。

訂購信息：

 

ProductReference NumberTransfection ReagentExpression BoosterExpression Medium
FectoPRO® Reagent116-0011 ml1 ml-
FectoPRO® Reagent116-01010 ml10 ml-
FectoPRO® Reagent116-0404 x 10 ml4 x 10 ml-
FectoCHO® CD Medium716-01L--1 L
FectoCHO® CD Medium716-06L--6 x 1 L
FectoCHO® Expression System716-01LKIT1 ml1 ml1 L
FectoCHO® Expression System716-06LKIT5 x 1 mL5 x 1 mL6 x 1 L

 

驚人的蛋白質產量

FectoPRO ®使驚人的高蛋白質和抗體(ti) 的產(chan) 率在兩(liang) 個(ge) CHO和HEK-293細胞在無血清培養(yang) 基中懸浮培養(yang) 的（圖1）。

FectoPRO-抗體(ti) 產(chan) 生CHO細胞圖1 FectoPRO ®給出了在懸浮的CHO細胞驚人抗體(ti) 生產(chan) 產(chan) 量。將細胞以1×106細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表達培養(yang) 基中接種，並用FectoPRO染®（0.8微克 / ml）或的FreeStyle™MAX試劑（1.25微克 / ml）的下列推薦的方案針對各個(ge) 試劑。重組小鼠IgG產(chan) 率，使用蛋白G的生物傳(chuan) 感器（福特生物轉染後1〜6天測定®八位字節RED96係統）。FreeStyle™是Life Technologies™Corporation的商標。數據由ProteoGenix SAS（法國）友善提供。

了解我們(men) 的套件致力於(yu) CHO細胞：FECTOCHO ®表達係統

FectoPRO ®很大程度上優(you) 於(yu) 其它轉染試劑如線性PEI在生物生產(chan) 過程中常用的轉染效率（圖2）而言，導致優(you) 異的蛋白質生產(chan) 產(chan) 率（圖3）。

FectoPRO-Microscopie圖2 FectoPRO ®給出了在懸浮的CHO細胞轉染效率高。的FreeStyle™CHO-S細胞以1×10接種6個(ge) 細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表達培養(yang) 基中，並用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®使用0.4微克/毫升和1.25微克/毫升的助推器或的FreeStyle™MAX試劑表達GFP的質粒。轉染24小時後，使用熒光顯微術測定GFP表達。

FectoPRO-CHO細胞

FectoPRO-HEK-293F細胞圖3 FectoPRO ®給出在懸浮液中的CHO和HEK-293細胞優(you) 於(yu) 蛋白質生產(chan) 的產(chan) 率。的FreeStyle™CHO-S和HEK-293F細胞以1×10接種6個(ge) 細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO或293表達培養(yang) 基並用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®助推器（0.4微克 /毫升），自由式™ MAX試劑（1.25微克 / ml）或PEIpro ®（1個(ge) 微克 /毫升）以下推薦的協議用於(yu) 相應的試劑。在轉染後72小時（CHO細胞）和120小時（HEK-293細胞），通過蛋白G親(qin) 和定量（HPLC）和Western Blot測定IgG3-Fc（34kDa）的產(chan) 生。標準對應於(yu) 純化的IgG3-Fc（34 kDa）。

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經濟：使用少量質粒

高質量質粒的製備可能非常昂貴，尤其是在大量大量生產(chan) 大量蛋白質需要大量質粒的情況下。FectoPRO ®節省40〜60％的成本通過使用0.4至0.6微克 / 10 6個(ge) 細胞/ ml的細胞培養(yang) 物; 因此，使該套件成為(wei) 生物生產(chan) 過程中可承受且經濟的解決(jue) 方案。

FectoPRO-表比較競爭(zheng) 對手表1 的量和試劑（FectoPRO的體(ti) 積®和競爭(zheng) 對手）根據生產(chan) 商的建議轉染。

持續的蛋白質生產

蛋白質生產(chan) 過程的持續時間在過去幾年中有所增加，現在大多數蛋白質生產(chan) 過程會(hui) 持續1-2周，以獲得宜量的蛋白質生產(chan) 。FectoPRO ®已經發展到保證持續生產(chan) 蛋白質在幾天內(nei) ，同時保持較高的細胞活力，可以長期保存蛋白生產(chan) （圖4）。

FectoPRO-HEK-293中的生產(chan) +可行性圖4 FectoPRO ®給出了在懸浮細胞持續蛋白質生產(chan) 。的FreeStyle™HEK-293F細胞以1×10 6個(ge) 細胞/ ml的30毫升的FreeStyle™293表達培養(yang) 基的接種，並用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®按照標準方案助推器（0.5微克 /毫升）中。在不同的時間點後，通過蛋白G親(qin) 和定量（HPLC）測定IgG3-Fc的產(chan) 生。FreeStyle™CHO-S可獲得類似的結果（數據未顯示）。

輕鬆擴展

強大的協議可輕鬆適應各種培養(yang) 皿，從(cong) 而簡化您的生物生產(chan) 過程。FectoPRO ®介導的轉染，可以線性地從(cong) 30毫升放大到升細胞培養(yang) 物的無協議適配（圖5）。

FectoPRO-CHO的可行性 FectoPRO-CHO蛋白生產(chan)

FectoPRO-可擴展性圖5 FectoPRO ®是在CHO細胞中易於(yu) 擴展和重現的。的FreeStyle™CHO-S細胞以1×10接種6個(ge) 細胞/ ml在30毫升100毫升300毫升或1升的FreeStyle™CHO表達培養(yang) 基中，並用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®助推器（0.5微克 / ml）的。在第1至6天，使用台盼藍排除法（A）測定細胞活力，並通過蛋白G親(qin) 和定量（HPLC）（B）和Western Blot（C）測定IgG3-Fc的產(chan) 生。標準品（C）對應於(yu) 純化的IgG3-Fc（34 kDa）。

可重複生產的產量

FectoPRO ®製造和使用配製高度控製生產(chan) 過程。這樣可確保實驗之間的結果均具有高度可重複性。此外，為(wei) 了滿足當前的管理指南，FectoPRO ®使用釋放先進的質量控製包括用於(yu) 蛋白質生產(chan) 率的規範，保證優(you) 良批與(yu) 批之間的一致性（圖6）。

FectoPRO-批次間的可複製性圖6. FectoPRO ®提供優(you) 異的批與(yu) 批的重現。懸浮CHO細胞以1×10接種6個(ge) 細胞/ ml在30ml CHO培養(yang) 基中，並使用3個(ge) 不同批次FectoPRO的轉染®（CCIII 078，CCIII 104或CCIII 106）按照標準方案。轉染72小時後，通過蛋白G親(qin) 和力定量測定IgG3-Fc的產(chan) 生。在懸浮的HEK-293細胞上獲得了相似的結果（數據未顯示）。

與哺乳動物表達係統兼容

不像其它可商購的試劑，FectoPRO ®轉染試劑盒是適合於(yu) CHO和HEK-293細胞（圖2和3）。該試劑與(yu) 各種培養(yang) 基配方兼容; 因此，實驗室的實施非常簡單明了（圖7，表2）。

FectoPRO-蛋白質生產(chan) 圖7 FectoPRO ®給出了在不同培養(yang) 基中生長的懸浮的CHO細胞優(you) 於(yu) 蛋白質生產(chan) 的產(chan) 率。CHO細胞以1×10接種6個(ge) 細胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表達培養(yang) 基中，CD CHO培養(yang) 基或Pro-CHO™4培養(yang) 基並用FectoPRO轉染® + FectoPRO ®助推器或的FreeStyle™MAX試劑以下對推薦的方案各自的試劑。轉染72小時後，通過蛋白G親(qin) 和定量（HPLC）測定IgG3-Fc的產(chan) 生。

FectoPRO-台式媒體(ti) CHO使用FectoPRO表2蛋白質產(chan) 量®在不同培養(yang) 基中的CHO細胞。

FectoPRO-台式媒體(ti) HEK使用FectoPRO表3.蛋白質產(chan) 量®在不同培養(yang) 基中於(yu) HEK-293細胞。

發現我們(men) 的套件致力於(yu) CHO細胞：FECTOCHO ®表達係統

自由式TM，CD FortiCHO TM，CD的OptiCHO TM，Expi293 TM，ExpiCHO TM和CD293是Gibco公司的商標®。
Pro-CHO TM，PowerCHO TM和Pro293 TM是Lonza TM Group的商標。
HyClone TM，HyCell TM和TransFx TM是GE Healthcare TM的商標。
BalanCD ®和Transfectory TM是Irvine Scientific公司的商標TM。

FectoPRO ®也非常適合病毒生產(chan) 。