adarbiotech環氧活化珠說明書

成立於(yu) 2006年3月的Adar Biotech是下一代醫療技術的開發商。該公司開發了用於(yu) 增強藥物輸送的微型醫療設備，並開發了另一種具有國土安全/生物應用的醫療設備。該公司還向研究團體(ti) 提供產(chan) 品和服務。Adar Biotech生產(chan) 功能性樹脂和重組蛋白，並為(wei) 客戶提供免疫學和細胞培養(yang) 服務。

adarbiotech環氧活化珠說明書(shu)

環氧活化珠

Epoxy-Activated Beads

Adar的環氧活化微珠是一種通用產(chan) 品，可將胺和含羥基的配體(ti) 與(yu) 微珠上存在的遊離環氧基結合。就配體(ti) 結合而言，所得的連接既穩定又起作用。

Epoxy-Activated Beads Cat. 1004-5/10/25

多用途激活支持版本。1.2 2007年3月

介紹

環氧活化珠是一種含有高密度環氧基的預活化載體(ti) ，用於(yu) 固定各種配體(ti) 。通過與(yu) 氨基、硫醇和羥基的穩定連接，該載體(ti) 可用於(yu) 固定蛋白質、碳水化合物和各種配體(ti) 。當ph值為(wei) 11-13時，與(yu) 羥基的偶聯反應為(wei) 有利，而含巰基的配體(ti) 在ph值為(wei) 7.5-9.0時，偶聯反應為(wei) 有利。

環氧樹脂活化珠特性

基質：sepharose cl-4b

活性組：Oxiran。

活性組密度：10–25μmole/ml

珠徑：45-165微米

珠狀結構：高度交聯的球形瓊脂糖，6%

大背壓：0.3Mpa，3bar

大流速：4ml/min/cm~2

建議流速：1-2ml/min/cm~2

基質穩定性：ph 2-11。

方案：將配體(ti) 固定在環氧樹脂活化的珠上

A.所需緩衝(chong) 器

通常在碳酸鹽、硼酸鹽或磷酸鹽緩衝(chong) 液中進行耦合。鈉

氫氧化物可用於(yu) 提高緩衝(chong) 劑。避免使用含有三胺或遊離胺的緩衝(chong) 劑。

結合過程中的緩衝(chong) 液和其他親(qin) 核試劑，因為(wei) 這些基團可能與(yu)

環氧基。如果需要有機溶劑溶解配體(ti) ，

二甲基甲酰胺和二氧六環的用量可達終體(ti) 積的50%。這個(ge)

相同濃度的有機溶劑應包含在

以避免配體(ti) 在偶聯過程中沉澱。

配體(ti) 與(yu) 10毫升環氧活化珠結合所需的緩衝(chong) 液。

一。雙蒸餾水（100毫升）。

2.耦合緩衝(chong) 液（50ml）：碳酸氫鈉或碳酸鹽緩衝(chong) 液ph-8-10。也可使用中性共軛緩衝(chong) 液，但宜使用堿性偶聯緩衝(chong) 液：使用DDH2O或磷酸鹽緩衝(chong) 液，如PBS。

三。封閉液（100毫升）：1米乙醇胺，pH值8.0。

四。洗滌緩衝(chong) 液（200毫升）：PBS pH 7.4。

B.協議

一。輕輕混合珠子，形成均勻的混合物，並用吸管移走所需數量的珠子。用雙蒸餾水清洗珠子3次。洗滌可以使用合適的濾漏鬥或通過每分鍾1分鍾的離心循環進行，在大約600～1000 xg下進行。不要超過1000xg，因為(wei) 珠子可能會(hui) 變形。

2.在耦合緩衝(chong) 液中溶解配體(ti) 。可使用有機溶劑。對於(yu) 大配體(ti) （即分子量大於(yu) 10000的蛋白質），製備2-10 mg/ml的溶液；對於(yu) 小配體(ti) ，例如小肽，製備每ml耦合緩衝(chong) 液中至少200μmoles配體(ti) 的溶液。

三。將兩(liang) 體(ti) 積的配體(ti) 溶液加入到一體(ti) 積的洗滌環氧樹脂中

在聚丙烯管和輕輕混合珠。樣品100ul上清液

（不含珠子）在時間零點作為(wei) 參考樣品並保存在冰箱中。

四。在4oC至45℃之間緩慢混合（配體(ti) 的穩定性限製頂線溫度），優(you) 選使用搖臂。不要用磁力攪拌器攪拌

5。樣品100ul上清液（不含珠子）的接合效率

利用耦合緩衝(chong) 液去除未結合的生物分子，測定並清洗多餘(yu) 的配體(ti) 。

6.加入大約兩(liang) 個(ge) 凝膠體(ti) 積的封閉溶液。放置至少4小時或在4℃下過夜。

7號。在室溫下用20體(ti) 積的清洗緩衝(chong) 液清洗凝膠三次，以去除未粘合的乙醇胺。

C.儲(chu) 存

將凝膠冷藏在磷酸鹽緩衝(chong) 鹽（PBS）或添加0.1%疊氮化物（W/V）作為(wei) 防腐劑的其他配體(ti) 兼容緩衝(chong) 液中，直至使用。