swant 7697說明書(shu)
產(chan) 品名稱: 鈣網膜蛋白兔多抗 CR 7697
英文名稱 : Rabbit anti-calretinin
貨號 : 7697
批號: 1893-0114
外觀: 凍幹粉
溶解:每管用200 µl雙蒸水溶解
規格:200UL
兔抗calretinin抗血清是用N末端含有6-his標記的重組人calretinin蛋白免疫家兔製備的。
該抗體(ti) 為(wei) 兔抗calretinin多克隆抗體(ti) [1],與(yu) 鈣結合蛋白D-28k和鈣調素[2]都屬於(yu) EF-手性家族的鈣結合蛋白。7697鈣網膜蛋白特異表達於(yu) 包括人、猴子、大鼠、小鼠、豚鼠,雞和魚的組織中(圖1)與(yu) 鈣結合蛋白D-28k或其他已知的鈣結合蛋白不產(chan) 生交叉反應,此特異性取決(jue) 於(yu) 改抗原在腦組織中的分布位置。
1、生物素-親(qin) 和素標記免疫組化檢測4%多聚甲醛(或10%福爾馬林緩衝(chong) 液)固定的腦組織冷凍/石蠟切片;
2、免疫酶標記/免疫印跡驗證;
WB: 免疫印跡; IHC :免疫組織化學; ELISA:酶聯免疫。
免疫組化(IHC): 1:2'000 - 1:5'000,4%多聚甲醛/福爾馬林固定組織的冰凍或石蠟切片。
免疫印跡(WB): 1:1'000 - 1:2'000
本說明書(shu) IHC及WB采用的是生物素標記法,建議根據實驗方法及內(nei) 容選擇合適的抗體(ti) 稀釋比例。
解凍後分裝(如每管1ul或5ul等)保存於(yu) - 80°C冰箱。短期保存-20°C。近期頻繁使用保存於(yu) 4°C(增加
0.01% 疊氮鈉)。 避免反複凍融。建議分裝小份儲(chu) 存。
Calretinin可能屬於(yu) “觸發”鈣結合蛋白的一類。它主要出現在神經細胞亞(ya) 群中,是間皮瘤的良好標誌物[3,4]。
圖1:不同種屬全腦組織蛋白抽提液用於(yu) SDS-PAGE Western blot檢測,結果表明所有種屬均可特異性檢測到分子量為(wei) 29-30k Da的條帶。
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圖. 1 7697鈣網膜蛋白對不同種屬腦組織勻漿液的WB檢測結果。上樣順序依次為(wei) :1 小鼠;2 大鼠;3 豚鼠;4 兔子;5 食蟹猴;6 斑馬魚;7雞,8重組calretinin蛋白。WB結果表明,在所有物種中都能檢測到29kDa的條帶。
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Calretinin高表達於(yu) 正常小鼠腦組織神經元(圖2a),calretinin基因敲除小鼠腦組織區域未見陽性表達(圖2b)
圖 2a:正常小鼠腦組織7697鈣網膜蛋白免疫組化結果:陽性染色分散於(yu) 大腦皮層神經元細胞。100 X鏡下 | 圖2b: calretini基因敲除小鼠大腦7697鈣網膜免疫組化染色結果:未見大腦皮層神經元陽性染色。100 X鏡下 |
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