swant 6B3說明書(shu)

產(chan) 品名稱：   鈣網膜蛋白小鼠單抗

     英文名稱 ： Mouse anti-calretinin (monoclonal)

貨號 ： 6B3

批號： 010399

外觀： 凍幹粉

      溶解：每管用200 µl雙蒸水

規格：200UL

產品描述

6B3鈣網膜蛋白抗體(ti) 是用重組人calretinin-22k[1]免疫小鼠製備的單克隆抗體(ti) 。calretinin 22k是calretinin基因的另一個(ge) 剪接產(chan) 物，與(yu) calretinin在Arg178之前*相同。融合後，以重組人視網膜蛋白為(wei) 靶點篩選雜交瘤細胞，篩選出克隆6B3。6B3抗體(ti) 識別前4個(ge) EF-手性結構域內(nei) 的一個(ge) 表位，該結構域與(yu) calretinin及calretinin-22k[1]識別位點相同。該蛋白與(yu) 鈣結合蛋白D-28k和鈣調素[2]都屬於(yu) EF-手性家族的鈣結合蛋白。6B3抗體(ti) 與(yu) 人和大鼠組織中的鈣網膜發生特異性反應，與(yu) 鈣結合蛋白D-28k或其他已知的鈣結合蛋白不產(chan) 生交叉反應。此特異性取決(jue) 於(yu) 改抗原在腦組織中的分布位置。

6B3抗體(ti) 也可識別人間皮瘤[3，4]中的鈣網膜蛋白。

抗體特異性及效價：

1、生物素-親(qin) 和素標記免疫組化檢測4%多聚甲醛（或10%福爾馬林緩衝(chong) 液）固定的腦組織冷凍/石蠟切片；

2、免疫酶標記/免疫印跡驗證；

3、免疫組織化學方法對Calretinin敲除小鼠的組織進行鑒定。

反應種屬：

                  WB：小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、斑馬魚、食蟹猴、和雞。

 IHC：人，大鼠，小鼠

 經測試 應用：

 WB，IHC-P/Fc,，ELISA

 WB： 免疫印跡； IHC ：免疫組織化學； ELISA：酶聯免疫。

 稀釋比例：

 免疫組化（IHC-P/Fr）： 1：2'000 - 1：5'000. 4%多聚甲醛/福爾馬林固定組織的冰凍或石蠟切片。

 免疫印跡（WB）： 1：1'000  - 1：2'000。

抗體(ti) 稀釋比例是基於(yu) 生物素標記法的免疫組化及免疫印跡檢測方法，其宜的抗體(ti) 濃度需根據客戶具體(ti) 實驗，經過預實驗摸索確定。

儲存：

解凍後分裝（如每管1ul或5ul等）保存於(yu) - 80°C冰箱。短期保存-20°C。近期頻繁使用保存於(yu)  4°C (增加0.01% 疊氮鈉)。避免反複凍融。建議分裝小份儲(chu) 存。

免疫印跡WB檢測（ 腦組織抽提液）

鈣網膜蛋白6B3抗體(ti) 在腦組織抽提液中的特異表達：(圖 1)

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Calretinin基因敲除小鼠的免疫組織化學染色

鈣網膜蛋白6B3高表達於(yu) 正常小鼠腦組織（圖2a），calretinin基因敲除小鼠腦組織相同區域未見陽性表達（圖2b）。

參考文獻

1. Zimmermann, L. and Schwaller B (2002) Monoclonal antibodies recognizes epitopes of calretinin. Cell Calcium 31: 13-25.
2. Rogers J.H. (1987) Calretinin: a gene for a novel calcium-binding protein expressed principally in neurons. J. Cell Biol. 105:1343-1353.
3. Gotzos V., Vogt P. and M.R. Celio (1995) Calretinin is a selective marker for malignant pleural mesotheliomas of the epithelial type. Pathol. Res. Pract. 192:137-147.
4. Doglioni, C. et al. (1996) Calretinin: a novel immunocytochemical marker for mesothelioma. Am. J. Surg. Pathol. 20:1037-1046.
5. Schiffmann S.N. et al (1999) Impaired motor coordination and Purkinje cell excitability in mice lacking calretinin. PNAS, 96: 5257-5262.