mypols VolcanoCell 2G RT-PCR 2x預混液
€180,00
該混合物已針對直接電池應用進行了專(zhuan) 門優(you) 化。
跳過耗時且昂貴的RNA純化。VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix使您能夠直接從(cong) 細胞懸液或細胞裂解物中定量和檢測RNA，而無需純化步驟。隻需分離細胞，將細胞懸浮液直接添加到RT-PCR反應混合物中，放入實時儀(yi) 器中，然後開始即可。
可選地，使用裂解緩衝(chong) 液直接在孔或燒瓶中裂解細胞，隻需旋轉並直接將上清液添加到RT-PCR混合物中即可。
裂解物也可以冷凍並儲(chu) 存在-20℃。
跳過逆轉錄步驟。不需要等溫逆轉錄步驟。
Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉錄酶，非常穩定，在95°C下的半衰期> 40分鍾。
當添加實時PCR染料時，Volcano2G 聚合酶也可用於(yu) 實時PCR。Volcano2G具有菲律宾新利网上娱乐 聚合酶樣核酸酶結構域，使其也適用於(yu) 基於(yu) 水解探針的分析。如此處所示，通過使用基於(yu) 探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用總RNA的10倍稀釋係列檢測了NONO mRNA。
對於(yu) 細胞RNA的可靠RT-PCR，樣品製備步驟*。然而，這些步驟費力，費時並且需要額外的消耗品。使用我們(men) 的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液，您可以用快速便捷的“零步長”方案代替費力的RNA製備。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液具有簡化的“零步驟”工作流程，使您可以規避費力的純化和提取步驟，從(cong) 而節省了時間和金錢。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x實現了低至單個(ge) 細胞的檢測靈敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G協議從(cong) 單個(ge) 隆德人中腦（LUHMES）細胞中檢測到GAPDH mRNA。
具有更多示例的出版物可以在“出版物”部分中找到。
該試劑盒包含一種經過工程改造的，極耐熱的逆轉錄酶和組合的聚合酶，包括經過特殊優(you) 化的緩衝(chong) 液係統，該係統僅(jin) 需要少量細胞（100至10.000個(ge) 細胞）。試劑盒中還包含一個(ge) 單獨的50x裂解緩衝(chong) 液。
包含的Volcano2G 聚合酶經過多代定向，人工進化工程化，在95°C下的半衰期> 40分鍾。它可直接從(cong) 細胞懸液或裂解物中進行“零步” RT-PCR，而無需等溫逆轉錄步驟。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x預混液包含所有標準實時循環儀(yi) 儀(yi) 器中成功且可靠的RT-PCR所必需的所有組分，並且與(yu) 常見的RT-PCR檢測方法兼容，例如熒光實時PCR染料或熒光探針。
推薦的擴增子大小應在60-300 bp之間。
請注意，必須使用跨外顯子-外顯子連接的引物，以僅(jin) 將擴增限製在mRNA靶標上。
通過避免昂貴，費時的細胞裂解或RNA純化，VolcanoCell試劑盒是高通量應用，RNAi敲除或基因表達實驗的理想選擇。預備2x混合可確保可重複的RT-PCR結果，顯著減少設置時間並發生錯誤的風險。隻需要添加引物和模板。使用隨附的裂解緩衝(chong) 液可以輕鬆製備細胞裂解液。但是，理想的擴增子大小應在60-300 bp之間！
存儲(chu) ：
該產(chan) 品以涼爽包裝出售。請在抵達時將產(chan) 品存放在-20°C下。通過分裝保存，大程度地減少凍融循環次數。對於(yu) 日常使用，我們(men) 建議將等分試樣保持在4°C下。
RT-PCR活性： 對HEK細胞在1x裂解緩衝(chong) 液中的係列稀釋液進行了成功的RT-PCR性能測試。151 bp片段（HPRT1 mRNA）在實時PCR循環儀(yi) 中擴增，並可視化為(wei) 單個(ge) 擴增產(chan) 物。
聚合酶活性：使用人工模板和引物監控Volcano3G 聚合酶活性並將其調整為(wei) 特定的聚合酶活性。
酶濃度由蛋白質特異性染色確定。請通過info@mypols.de查詢有關(guan) 特定批次濃度的更多信息。
裂解緩衝(chong) 液：將HEK細胞在1x裂解緩衝(chong) 液中進行係列稀釋，測試其成功的RT-PCR性能。151 bp片段（HPRT1 mRNA）在實時PCR循環儀(yi) 中擴增，並可視化為(wei) 單個(ge) 擴增產(chan) 物。
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