microgembio核酸提取試劑盒

RNA GEM是一種完整的核酸提取試劑盒，提供了一種非常簡單的方法來從(cong) 單個(ge) 細胞提取100,000個(ge) 細胞的RNA 。該套件包含無RNase的酶，緩衝(chong) 液和DNase I，非常適合處理：

• 哺乳動物細胞培養
• 激光捕獲顯微切割（LCM）

• 熒光激活細胞分選（FACS）準備的細胞群

核糖核酸

從(cong) 哺乳動物細胞培養(yang) ，激光捕獲顯微切割和FACS準備的細胞群體(ti) （例如巨噬細胞）中提取RNA

適用於(yu) RT-PCR和RT-qPCR

每個(ge) 試劑盒均包含RNAGEM，DNase I，BLUE緩衝(chong) 液，10x DNase緩衝(chong) 液和10x TE

該圖顯示了100、500和1,000個(ge) 反應試劑

RNA GEM是一種完整的核酸提取試劑盒，提供了一種非常簡單的方法來從(cong) 單個(ge) 細胞提取100,000個(ge) 細胞的RNA。該試劑盒包含無RNase的酶，緩衝(chong) 液和DNaseI。它能夠從(cong) 哺乳動物細胞培養(yang) 物，激光捕獲顯微切割和FACS製備的細胞群（例如巨噬細胞）中進行溫度控製的快速製備RNA。

• 簡化的手動工作流程可在5分鍾內提供RT-PCR和RT-qPCR就緒的RNA
• 在廣泛的細胞數量內以優異的線性釋放RNA和
• 無需進一步純化RNA即可進行準確的RT-PCR和RT-qPCR分析
• 不含抑製劑意味著無需進行苛刻的化學清洗或多個步驟
• 減少的處理可保護樣品的完整性

RNA提取工作流程

*，由於(yu) RNA分子的低穩定性和大量的RNase，RNA的提取是一個(ge) 困難的過程。MicroGEM的RNAGEM通過極快的溫度控製的RNA提取解決(jue) 了這一問題，該提取可同時裂解細胞並消除RNase。RNAGEM試劑盒高度適應各種提取體(ti) 積，並可以根據細胞數量進行縮放。提取後，包括可選的DNase處理以富集RNA。RNA立即可用於(yu) 下遊應用，例如RT-PCR和RT-qPCR。可以將這些試劑直接添加到RNA樣品中，以進行簡單的流線型96孔板操作。

RNAGEM經過優(you) 化，可與(yu) 多種不同的培養(yang) 類型一起使用，包括懸浮細胞，貼壁細胞，RNAlater™中存儲(chu) 的細胞，細胞沉澱以及FACS和LCM。

提取工作流程

所述RNA GEM試劑盒允許總核酸提取或根據需要的RNA的提取隻是。共純化RNA和的方案非常快捷，隻需5分鍾即可從(cong) 樣品變為(wei) 核酸。單獨的RNA可以通過添加DNase（試劑盒提供）進行純化，這又會(hui) 增加10分鍾的操作時間。該圖總結了共純化和RNA提取工作流程。

RNA GEM與(yu) 聚合酶和逆轉錄酶兼容，提取物無需純化即可用於(yu) PCR，RT-PCR，qPCR和RT-qPCR。這導致在廣泛的細胞數目範圍內(nei) 更高的靈敏度和線性度。

將HeLa細胞中的5 µl RNA GEM提取物直接添加到RT-qPCR中後，獲得此處的圖  。RNA GEM提取的細胞數量為(wei) 10 – 50,000，  並從(cong) 高豐(feng) 度mRNA（ACTB;ß-actin）和低豐(feng) 度mRNA（BRCA1;乳腺癌早期發作）生成圖。梯度類似於(yu) 標準品的幹淨痕跡表明沒有抑製作用，從(cong) 少至10個(ge) 細胞中獲得的圖表明了該方法的靈敏度。

從(cong) 一係列10-50,000個(ge) 細胞的HeLa細胞稀釋液中提取的RNA的RT-qPCR圖。A：高拷貝數mRNA（ACTB）B：低拷貝數mRNA（BRCA1）。紅色=標準；藍色=重複的mRNA曲線。

使用推薦的方法，RNA GEM提取的效率在  1到大約100,000個(ge) 細胞的範圍內(nei) 是恒定的，並具有出色的產(chan) 量（請參閱下文）。相反，TRIzol®提取會(hui) 損失低豐(feng) 度細胞的mRNA。這意味著可以通過簡單的非DNase處理的提取物中g的qPCR獲得樣品歸一化。