prokazyme dlig120說明書(shu)
€220,00 – €320,00
A thermostable NAD+ dependent double-stranded ligase with broad temperatures range between 5 and 65°C.
| UNIT SIZE AND PRICE |
€ 220,00 – € 320,00
耐高溫NAD +依賴的雙鏈連接酶，溫度範圍在5到65°C之間。
來自海生紅球藻的 連接酶是一種熱穩定的NAD +依賴性雙鏈連接酶，溫度範圍介於(yu) 5至65°C之間。所述enzym 的具有高保真Ë催化結紮並適合於(yu) 各種應用，包括基因合成。
產(chan) 品Dlig120 Rma 連接酶可提供500單位和2000單位，以及10x反應緩衝(chong) 液。
–一周內(nei) 發貨，除了以下所列價(jia) 格外，還要支付其他運輸和手續費。
商品名：Dlig120S | 連接酶500單位| 價(jia) 格：220.00 EUR
商品名：Dlig120L | Ligase 2000單位| 價(jia) 格：320.00 EUR
產(chan) 品描述
介紹：
Rma 連接酶催化雙鏈結構中相鄰3′-羥基和5′-磷酸末端的NAD依賴性連接。與(yu) T4 連接酶相反，Rma 連接酶對平末端DNA的片段沒有可檢測的活性。與(yu) T4 連接酶不同，Rma 連接酶在宜溫度條件下僅(jin) 顯示4 bp和2 bp的共粘性末端的小連接活性。Rma 連接酶對RNA靶沒有活性。從(cong) 帶有質粒的大腸杆菌菌株中分離和純化Rma 連接酶，該質粒帶有克隆的連接酶基因，該基因來自冰島分離的嗜熱細菌Rhodother-mus marinus（1、2）。Rma連接酶在91°C下的半衰期為(wei) 7分鍾（2）。該酶具有廣泛的反應溫度範圍，以活性約為(wei) 55°C。
應用範圍：
Tsc 連接酶是需要高溫，高嚴(yan) 格性的雙鏈連接的理想酶.Tsc 連接酶可用於(yu) ：
儲(chu) 存：
儲(chu) 存和稀釋緩衝(chong) 液：20 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，0.1％Triton X-100（v / v），1 mM二硫蘇糖醇（DTT），50％甘油（v / v），pH 7.6（25℃）。當在–15°C至-25°C下儲(chu) 存時，Rma 連接酶是穩定的。
反應條件：
1 x反應緩衝(chong) 液（已提供10 x）20 mM Tris-HCl，20 mM KCl，10 mM MgCl2、0.1％Nonidet P40（v / v），0.5 mM NAD，1 mM DTT，pH 7 ，5（25°C）。
濃度和單位定義(yi)
濃度10 U /μl。1個(ge) 單位的Rma 連接酶在45°C下在1分鍾內(nei) 催化1μgBstEII消化的λ的cos位點的50％連接。
應用方案：活性測定： 用於(yu) 單位定義(yi) 的酶測定是連接用BstII消化的λ的cos位點。
| 零件 | 體積 | 終濃度 |
| 反應緩衝液（10x） | 2.0微升 | 1個 |
| λ（已消化BstEII） | X微升 | 1微克 |
| Tsc 連接酶 | 稀釋係列 | |
| 加入無菌水 | 高達20,0μl | |
| 總 | 20,0微升 |
在45°C孵育1-15分鍾，在幹冰/乙醇浴中停止反應。在瓊脂糖凝膠上分析之前，在65°C下孵育10分鍾（融解未連接的cos位點）
通過瓊脂糖凝膠電泳和溴化乙錠染色測定結果。
質量控製：
質量控製：
如下所述測定每批Tsc 連接酶的活性和汙染活性。
缺少核酸內(nei) 切酶：
核酸外切酶的缺失：將
越來越多的Tsc 連接酶在50μl含有[3H]標記的的測試緩衝(chong) 液中於(yu) 37°C和64°C孵育4小時。顯示無核酸外切酶活性的酶量> 100U。
缺少Rnases：
根據製造商協議，使用Ambion的RNaseAlertTM Lab Test Kit（目錄號1964）檢測RNase活性。1小時後，在37°C下孵育XU Tsc 連接酶後，未檢測到RNase活性。
參考文獻：
| 單位大小和價格 | 500台– 220歐元，2000台– 320歐元 |
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