biosestatus DRAQ5說明書(shu)
DRAQ5™
DRAQ5™
適用於(yu) : FM , Flow Cyt , ICC/IF
DRAQ5™ 是一種細胞通透性的遠紅色熒光染料，可與(yu) GFP或FITC等常用標記結合用於(yu) 固定或非固定/活細胞。
與(yu) 任何細胞滲透性插入探針一樣，DRAQ5可能在長期檢測中抑製細胞分裂，並應進行任何效果測試。
DRAQ5染色可用於(yu) 流式細胞術、活細胞成像和細胞分析，該染色劑與(yu) 許多儀(yi) 器平台的標準協議高度兼容。
DRAQ5的化學名稱為(wei) 1，5-雙-4，8-二羥基蒽-9，10-二酮。
DRAQ5染色的優(you) 點包括
-方便易用的水溶液
-快速進入活細胞，提供高水平的核歧視
-無光漂白效應
-可用於(yu) 大多數細胞類型，真核和原核：哺乳動物，細菌，寄生蟲，植物等。
-流式細胞術中常用FITC/GFP+PE組合無需補償(chang)
-無需RNase處理
-結合無熒光增強
-與(yu) 台式流式、激光掃描細胞儀(yi) 、非紫外激光掃描和基於(yu) 燈的共焦顯微鏡光學兼容
光譜特性：
激勵
647nm線宜（Ex大646nm）
488、514、568和633納米線，次優(you)
雙光子激發（1047nm）和激發暗（700-850nm）
排放（取決(jue) 於(yu) 儀(yi) 器）：
-665nm至紅外線大681nm/697nm與(yu) ds插層）
-與(yu) 可見光範圍（如GFP和FITC）的小重疊
-Em.過濾器可包括695L、715LP或780 LP
濃度：5mm
Liquid
Store at +4°C. Do Not Freeze. Store In the Dark.
濃度
應用說明包括推薦的起始稀釋液；宜稀釋液/濃度應由終用戶確定。
阿伯
在分析濃度下使用FM。
流量循環1/1000-1/250。對於(yu) 有核細胞的選通=5μM；對於(yu) 細胞周期分析=20μM
商會(hui) /單項體(ti) 育聯合會(hui) 1/1000。對於(yu) 基於(yu) 細胞的分析、免疫熒光顯微鏡和細胞內(nei) WB=5μM
強烈建議每個(ge) 研究者仔細確定濃度和標記條件，以便在感興(xing) 趣的分析中獲得宜性能。有關(guan) 應用程序的更多具體(ti) 信息，請參閱協議手冊(ce) 部分。
Immunocytochemistry/ Immunofluorescence - DRAQ5™
用層粘連蛋白B1抗體(ti) 核膜標記（ab16048）和α-微管蛋白抗體(ti) （DM1A）負載對照（ab7291）對HeLa細胞進行染色。細胞100%甲醇固定（5min），然後在1%牛血清白蛋白中孵育0.1%PBS吐溫1h，使細胞通透性增強，阻斷非特異性蛋白-蛋白質相互作用。然後在4C下用一級抗體(ti) （ab16048和ab7291）以1μg/ml孵育細胞。二級抗體(ti) 是山羊對兔IgG-H&L的二級抗體(ti) （DyLight®488）、預吸附抗體(ti) （ab96899）（綠色）和山羊對小鼠IgG-H&L的二級抗體(ti) （DyLight®594）、預吸附抗體(ti) （ab96881）（紅色）室溫下1/250稀釋1h。將5μM DRAQ5加入二級抗體(ti) 混合物中以標記細胞核（假紫色）。
Immunocytochemistry/ Immunofluorescence - DRAQ5™ (ab108410)
用β-連環蛋白抗體(ti) （ab16051）和α-微管蛋白抗體(ti) [DM1A]負載對照（ab7291）對HeLa細胞進行染色。細胞經100%甲醇固定（5min），然後在1%BSA和0.1%PBS-Tween中孵育1h，使細胞通透性增強，阻斷非特異性蛋白-蛋白質相互作用。然後用一級抗體(ti) （ab16051和ab7921）以1微克/毫升的濃度在4C下孵育細胞，二級抗體(ti) 為(wei) 山羊對兔IgG-H&L的多克隆二級抗體(ti) （DyLight®488）、預吸附（ab96899）（綠色）和山羊對兔IgG-H&L的多克隆二級抗體(ti) （DyLight®594）、預吸附（ab96899）（紅色）在室溫下稀釋1/250小時。將5μM DRAQ5添加到二級抗體(ti) 混合物中以標記細胞核（假橙色）。
Immunocytochemistry/ Immunofluorescence - DRAQ5™ (ab108410)
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