Fluoro-Gold™是世界上使用廣泛,有效的神經元逆行示蹤劑。氟金,商品名Fluoro-Gold,也稱為(wei) 羥基二苯乙烯am。
我們(men) 的氟金抗體(ti) 是迄今為(wei) 止有效的氟金抗體(ti) 。自從(cong) Fluorochrome在1998年*推出以來,它已取得了*的成就記錄,並已成為(wei) 行業(ye) 標準。
Fluoro-Ruby是一種快速,靈敏,可靠且技術簡單的熒光順行示蹤劑和標記物。氟紅寶石的使用與(yu) 氟金基本相同。Fluoro-Ruby已經使用了很多年,被認為(wei) 是領跑的順行示蹤劑。
DAPI染色的縱截麵的顯微照片,通過小鼠右頸脊髓,顯示了熒光金標記的運動神經元的典型列。該圖發布於(yu) Tosolini AP,Mohan R,Morris R(2013)。靶向小鼠前肢中運動終板區域的全長可增加氟金對相應脊髓運動神經元的吸收。麵前。神經元。4:58、1-10、4
大鼠前肢中強烈的熒光金標記的運動神經元陽性。該圖發表於(yu) Tosolini AP,Mohan R(2012)。供應大鼠前肢的運動神經元柱的空間表征。神經科學200:19-30,22。
成年小鼠腰脊髓的顯微照片,顯示了用DAPI複染色的典型的熒光金標記柱。該圖發表於(yu) Mohan R,Tosolini AP,Morris,R.(2014)。神經科學274:318-330,323
氟金使用指南和協議
主協議
1.背景
熒光金的使用與(yu) 其他熒光示蹤劑基本相同。氟金在注射後的存活時間,濃度範圍,組織治療以及與(yu) 其他組織化學技術的相容性方麵更具靈活性。
2.儲(chu) 存和保質期
幹氟金應保存在4攝氏度的密閉容器中。妥善存放,氟金的保質期應超過一年。溶液中的染料也應保存在4攝氏度的密閉容器中,並應保持穩定至少六個(ge) 月。
3.車用
氟金可以溶於(yu) 蒸餾水或0.9%的鹽水中。氟金在堿性pH下不溶。但是,它也可以用作 0.2M中性磷酸鹽緩衝(chong) 液的懸浮液。
4.染料濃度
氟金已成功使用,濃度範圍為(wei) 1-10%。建議濃度為(wei) 4%。如果在注射部位發生不良壞死,或標記太強烈,請將濃度降低至2%溶液。如果您需要使用更精確的測量值,則Fluoro-Gold的分子量為(wei) 532.6道爾頓。
5.染料管理
6.術後0生存期
已觀察到良好的逆行標記,周期從(cong) 兩(liang) 天到兩(liang) 個(ge) 月不等。生存期通常為(wei) 三到五天。較長的生存期可增強遠端過程的填充,而不會(hui) 使染料從(cong) 細胞中擴散出來。
7.固定
劑幾乎可以使用任何固定劑,也可以不使用固定劑,含有4%甲醛的磷酸鹽中性緩衝(chong) 鹽水經常使用。含有高濃度重金屬(例如,汞)的固定劑會(hui) 猝滅熒光,而高濃度(超過1%)的戊二醛可能會(hui) 增加背景熒光。
8.
含有氟金的組織化學處理組織實際上可以根據任何常見的組織學技術進行處理。其中包括未固定組織的低溫恒溫器切片(10 µm),固定組織的冷凍切片(20 µm)和從(cong) 嵌入塑料(.2-4 µm)或石蠟(3-10 µm)中的組織切下的薄切片。常使用固定組織的冷凍切片。
9.組合方法
在處理的這一點上,可以對切片進行進一步處理,以用於(yu) 第二標記物,例如放射自顯影,HRP組織化學,免疫細胞化學,第二熒光示蹤劑,熒光複染色等。
10.安裝,清理和蓋玻片
部分通常安裝在塗明膠的載玻片上,風幹,浸入二甲苯中,並用非熒光DPX塑料固定介質蓋玻片。切片可能會(hui) 用分級酒精脫水,除非這與(yu) 第二種示蹤劑不兼容。如果將Fluoro-Gold與(yu) 熒光免疫細胞化學結合使用,則將切片風幹並直接用中性緩衝(chong) 甘油(1:2)蓋上蓋子。
11.考試與(yu) 攝影
熒光金可以使用寬帶紫外激發濾光片在熒光顯微鏡下觀察。當用中性pH緩衝(chong) 液處理組織時,發出金色,而當用酸性(例如pH 3.3)pH緩衝(chong) 液處理組織時,發出藍色。它可以用數碼照片或膠片照相(對於(yu) 彩色照片,請使用Ektachrome 200-400 ASA膠片;對於(yu) 黑白照片,請使用相當的速度膠片,例如Tri-X)。根據物鏡的放大倍數和標簽的強度,大多數曝光時間為(wei) 10-60秒。三十(30)秒鍾的暴露約為(wei) 平均水平。可以利用多次曝光來同時可視化熒光金和另一種示蹤劑。從(cong) 而,紫外線將與(yu) 明場照明相結合,以在放射自顯影中同時定位具有HRP或銀顆粒的氟金。類似地,可以組合使用藍光激發以可視化FITC的綠色發射顏色,而可以使用綠色激發光同時觀察碘化丙啶或溴化乙錠(熒光複染)的紅色發射顏色。
$ 300.00
氟金(Fluorogold)是Fluorochrome,LLC的產(chan) 品。自1985年以來,它已由Fluorochrome出售並得到廣泛使用。其他公司正在銷售他們(men) 聲稱與(yu) Fluoro-Gold相同或等同的產(chan) 品。實際上,這些化合物的化學結構似乎不同於(yu) 氟金。化合物的某些物理性質可能會(hui) 非常不同。
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