NEW! CHOgro® High Yield Expression System

The most advanced system for transient transfection and protein production in suspension CHO cells

新！CHOgro®高產量表達係統

mirusbio用於懸浮CHO細胞中瞬時轉染和蛋白質生產的先進係統

選擇產(chan) 品：

CHOgro®高產(chan) 量表達係統
（試劑盒包括：CHOgro®表達培養(yang) 基（2 x 1 L），CHOgro®複合物形成溶液（100 ml），L-穀氨酰胺（100 ml），泊洛沙姆188溶液（100 ml），Trans IT- PRO®轉染試劑（1毫升），CHOgro®滴度增強劑（20毫升））CHOgro®轉染和滴度增強試劑盒
（試劑盒包括：反式 IT-PRO®轉染試劑（1ml）中，CHOgro®滴度增強（20毫升））CHOgro®表達培養(yang) 基CHOgro®複合物形成解決(jue) 方案泊洛沙姆188溶液，10％L-穀氨酰胺溶液，200 mM跨 IT-PRO®轉染試劑

選擇尺寸：

先生62701套

選擇的目錄號：MIR 6270

NEW CHOgro®高產(chan) 表達係統對於(yu) 高產(chan) 量的蛋白質生產(chan) 中懸浮的CHO細胞上的和具有成本效益的瞬時轉染係統。我們(men) 的第二代係統具有CHOgro®滴度增強劑，可提供業(ye) 界的快速蛋白質產(chan) 量。

• 高產量 -在7天內達到更高的抗體滴度-比ExpiCHO表達係統更快
• 簡單的工作流程 -當天轉染，增強子添加和溫度變化
• 無憂 -無需商業許可證；無動物源

數字和數據

使用多種抗體(ti) 構建體(ti) 的CHOgro®高產(chan) 量表達係統優(you) 於(yu) ExpiCHO表達係統。 六個(ge) 不同的IgG1抗體(ti) 構建體(ti) ，包括在相同的載體(ti) 骨架合成的5個(ge) 治療相關(guan) 的構建體(ti) 通過使用瞬時轉染產(chan) 生的反式 1試劑對比率（體(ti) 積：IT-PRO®轉染試劑（Mirus公司Bio公司）以1： wt和1 µg質粒每毫升培養(yang) 在CHOgro®表達培養(yang) 基（Mirus Bio）中的FreeStyle™CHO-S細胞（ThermoFisher Scientific）中，細胞密度為(wei) 4 x 10 ⁶細胞/ ml，或Expifectamine CHO轉染試劑盒（ThermoFisher Scientific），在ExpiCHO-S細胞（ThermoFisher Scientific）中每毫升培養(yang) 物每毫升培養(yang) 液的含量為(wei) 3.2：1試劑對（vol：wt）和1 µg質粒表達培養(yang) 基（ThermoFisher Scientific），細胞密度為(wei) 6 x 10 ⁶細胞/毫升 在轉染時，將所有細胞分成125ml的生長燒瓶（25ml /瓶，Thomson Instrument Company）。添加轉染複合物後立即添加CHOgro®滴度增強劑，並將培養(yang) 物在32°C搖動下孵育，直至收獲CHOgro®高產(chan) 量表達係統。ExpiCHO表達係統（ThermoFisher Scientific）遵循大滴度規程：轉染後24小時加入Expifectamine CHO增強劑和飼料（ThermoFisher Scientific），並將培養(yang) 物移至32°C。在第5天，將第二體(ti) 積的ExpiCHO進料（ThermoFisher Scientific）添加到燒瓶中。使用標準夾心人IgG ELISA分析第7天和第14天的上清液。誤差棒代表一式三份技術重複的標準偏差。

在CHOgro®表達培養(yang) 基中生長的FreeStyle™CHO-S和ExpiCHO細胞產(chan) 生相似的滴度。

在CHOgro®表達培養(yang) 基（Mirus Bio）中培養(yang) FreeStyle™CHO-S細胞（ThermoFisher Scientific）或ExpiCHO-S細胞（ThermoFisher Scientific）。兩(liang) 種細胞係中瞬時與(yu) 編碼人IgG1內(nei) 部對照抗體(ti) 的質粒轉染的，貝伐單抗或使用Fc融合構建體(ti) 反式 IT-PRO®轉染試劑（Mirus公司Bio公司）以1：1的試劑對比率（體(ti) 積：在未經處理的6孔板中，每毫升培養(yang) 液含有1 wt g 和1 µg質粒。將所有培養(yang) 物移至32°C，搖動，然後將轉染複合物和CHOgro®Titer Enhancer添加到培養(yang) 物中。使用標準夾心人IgG ELISA分析第14天的上清液。誤差棒代表一式三份技術重複的標準偏差。

CHOgro®滴度增強劑不會(hui) 對轉染後的細胞生長和活力產(chan) 生不利影響。FreeStyle™CHO-S細胞的一式三份培養(yang) 瓶適於(yu) CHOgro®表達培養(yang) 基與(yu) 瞬時轉染跨 IT-PRO®轉染試劑（Mirus公司Bio公司）以1：1的試劑對比率（體(ti) 積：重量）和1μg每毫升培養(yang) 物的質粒為(wei) 4 x 10 ⁶在125毫升Optimum Growth燒瓶（25毫升/瓶，湯姆森儀(yi) 器公司）中的細胞數/毫升。如所示，添加了CHOgro®Titer Enhancer，並且在將轉染複合物添加到培養(yang) 液後立即將所有培養(yang) 液轉移至32°C。轉染後每天使用Guava®easyCyte™5HT流式細胞儀(yi) （EMD Millipore）測量細胞計數（實線）和生存力（碘化丙啶染色，虛線）。

CHOgro®高產(chan) 量表達係統可擴展1000倍。 人IgG1是通過用瞬時轉染產(chan) 生的  反式 1試劑：比IT-PRO®轉染試劑（Mirus公司Bio製）和每毫升培養(yang) 液1微克質粒在1。Freestyle CHO細胞（Thermo Fisher Scientific）以4 x 10 ⁶的密度轉染 在以下體(ti) 積/培養(yang) 容器中的CHOgro®表達培養(yang) 基（Mirus Bio）中的細胞數/ ml：2 ml /非組織培養(yang) 物處理過的6孔培養(yang) 皿，20 ml / 125 ml Thomson燒瓶，500 ml / 1.6 L Thomson燒瓶，2000 ml / 5 L湯姆森燒瓶。將所有培養(yang) 物移至32°C，搖動，然後將轉染複合物和CHOgro®Titer Enhancer添加到培養(yang) 物中。在其餘(yu) 的實驗中，將培養(yang) 物保持在適當的搖動速度下。使用標準夾心人IgG ELISA分析第14天的上清液。誤差棒代表一式三份技術重複的標準偏差。

使用多個(ge) Fc融合構建體(ti) 觀察到效價(jia) 增強。使用兩(liang) 種不同的Fc融合構建體(ti) 瞬時轉染跨每毫升培養(yang) 液：（重量體(ti) 積）和1μg的質粒試劑1到比：以1 IT-PRO®轉染試劑（Mirus公司Bio公司）。將FreeStyle™CHO-S（ThermoFisher Scientific）細胞培養(yang) 在CHOgro®表達培養(yang) 基（Mirus Bio）中，並以4 x 10 ⁶接種在未處理的6孔板中轉染時的細胞數/ ml（2 ml /孔）。如所指示的，添加了CHOgro®滴度增強劑，並且在將轉染複合物添加至培養(yang) 物後立即將培養(yang) 物轉移至32℃。使用標準的夾心人IgG ELISA分析第10天的上清液。誤差棒代表一式三份技術重複的標準偏差。

第三方使用CHOgro®高產(chan) 量表達係統和CHOgro®滴度增強劑實現的更高滴度。Fc融合蛋白通過在完整CHOgro®媒體(ti) CHO-S細胞的瞬時轉染產(chan) 生的使用反式（1:1試劑：比率，體(ti) 積：重量1）IT-PRO®轉染試劑。用於(yu) 轉染的細胞為(wei) 2 x 10 ⁶細胞/ ml（無CHOgro®Titer Enhancer）或4 x 10 ⁶（含CHOgro®Titer Enhancer）。轉染後24小時（無CHOgro®滴度增強劑）或立即（有CHOgro®滴度增強劑）將培養(yang) 物轉移至32°C。產(chan) 量代表轉染後第11天收獲的0.5 L培養(yang) 物中的終親(qin) 和純化蛋白。

反式 IT-PRO®+CHOgro®滴度增強性能優(you) 於(yu) PEImax和線性25kDa的PEI轉染試劑。 的IgG1抗體(ti) 構建體(ti) 通過使用瞬時轉染產(chan) 生的反式 1試劑對比率（體(ti) 積：重量），PEImax（4：1，Polysciences公司），或IT-PRO®轉染試劑（Mirus公司Bio公司）以1在CHOgro®表達培養(yang) 基（Mirus Bio）中以4 x 10 ⁶的細胞密度培養(yang) 的FreeStyle™CHO-S細胞（ThermoFisher Scientific）中每毫升培養(yang) 液中線性25 kDa PEI（6：1，Polysciences）和1 µg質粒細胞/毫升 添加轉染複合物後立即添加滴定增強劑（CHORUS®Titer Enhancer）（Mirus Bio），將培養(yang) 物在32°C振搖下孵育，直至收獲所有試劑。使用標準夾心人IgG ELISA分析第14天的上清液。誤差棒代表一式三份技術重複的標準偏差。

資源資源

技術指標

儲(chu) 存條件：
所有配置：多種儲(chu) 存條件-有關(guan) 具體(ti) 建議，請參見各個(ge) 瓶子。

產(chan) 品保證：
所有配置：如產(chan) 品組件上的標簽所示
 

技術產品文獻

完整協議

CHOgro®高產(chan) 量表達係統完整方案（PDF）

快速參考協議

CHOgro®複合物形成溶液QRP （PDF）
CHOgro®表達培養(yang) 基QRP （PDF）
CHOgro®轉染和滴度增強試劑盒QRP （PDF）

產(chan) 品數據表

L-穀氨酰胺產(chan) 品數據表（PDF）
泊洛沙姆188產(chan) 品數據表（PDF）

安全數據表

CHOgro®表達培養(yang) 基SDS （PDF）
CHOgro®高產(chan) 表達係統SDS （PDF）
CHOgro®轉染和滴度增強套件SDS （PDF）
L-穀氨酰胺的解決(jue) 方案SDS （PDF）
泊洛沙姆188溶液SDS （PDF）
跨 IT-PRO®轉染試劑SDS （PDF）