E-GL01
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶從(cong) 複雜的碳水化合物和糖蛋白上裂解所有非還原性的末端β-連接的N-乙酰氨基葡萄糖殘基。
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶從(cong) 複雜的碳水化合物和糖蛋白上裂解所有非還原性的末端β-連接的N-乙酰氨基葡萄糖殘基。
GlcNAc在雙天線，三天線和四天線寡糖上的不同鍵的切割速率很大程度上取決(jue) 於(yu) 相鄰殘基的空間位阻。與(yu) β（1-3）-連接的甘露糖相連的β（1-2）GlcNAc殘基以高的速率裂解，而與(yu) β（1-6）-連接的甘露糖相連的β（1-2）GlcNAc殘基在2000年以高的速率裂解。所有三種低聚糖的比率低。β（1-6）GlcNAc殘基（如果存在）以第二高的速率去除，而β（1-4）GlcNAc則以第三高速率去除。在三天線結構上，該殘留物以第二高速率被去除。與(yu) β-連接的甘露糖連接的二等分的β（1-4）GlcNAc嚴(yan) 重阻礙了其他GlcNAc殘基的裂解-裂解需要高濃度的酶和延長的孵育時間。
來源：重組從(cong) 肺炎鏈球菌在大腸杆菌。
EC： 3.2.1.52
替代名稱： β-N-乙酰氨基葡糖苷酶，N-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷N-乙酰氨基葡糖水解酶，氨基葡萄糖苷酶，己糖苷酶
內(nei) 容物：-n-acetylglucosaminidase-kit.jpg)
20 mM Tris-HCl，25 mM NaCl，pH 7.5中的N-乙酰氨基葡萄糖苷酶
5x反應緩衝(chong) 液250 mM磷酸鈉，pH 5.0
比活度： > 80 U / mg
活度： > 50 U / mL
分子量：〜140,000道爾頓
pH範圍： 5-7，宜5.0
建議用法：
1.在試管中加入多達100 µg糖蛋白或1 nmole寡糖。
2.用去離子水將終體(ti) 積調整為(wei) 14 µL。
3.加入4 µL 5x反應緩衝(chong) 液（pH 5.0）。
4.加入2 µL N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。
5.在37°C下孵育3小時。
注意：如果存在平分的GlcNAc或β（1-2）GlcNAc- α（1-6）Man，則將孵育時間延長至18小時。
特異性：切割所有非還原性末端β-連接的N-乙酰氨基葡萄糖。平分GlcNAc會(hui) 使反應變慢。
比活測定：定義(yi) 為(wei) 在37℃，pH 5.0下從(cong) 對硝基苯基-β-DN-乙酰氨基葡萄糖生成1 µmol對硝基苯酚（p NP）所需的酶量。
儲(chu) 存：將酶儲(chu) 存在4℃。
純度：每批N-乙酰氨基葡糖苷酶均按以下方法汙染蛋白酶。將10 µg變性的BSA與(yu) 2 µL酶孵育24小時。經處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。
生產(chan) 宿主菌株已經過廣泛測試，不會(hui) 產(chan) 生任何可檢測的糖苷酶。
穩定性：妥善存放至少12個(ge) 月即可穩定。幾天暴露於(yu) 環境溫度不會(hui) 降低活性。
配套產(chan) 品：
過程控
清洗糖漿-外糖苷酶處理後從(cong) 糖漿混合物中去除酶
標記和釋放聚糖的衍生化
1.弗吉尼亞(ya) 州克拉克，N。Platt和TD Betters。肺炎鏈球菌β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆和表達。具有修飾的糖苷配基特異性的截短酶的產(chan) 生。 生物化學雜誌270：8805-8814（1995）。
2. Dwek，RA，CJ Edge，DJ Harvey，MR Wormald和RB Parekh。糖蛋白相關(guan) 寡糖的分析。Ann Rev Biochem 62： 65-100（1993）。
3.格拉斯哥，LR，JC保爾森和RL希爾。從(cong) 肺炎鏈球菌 的五個(ge) 糖苷酶的係統純化J Biol Chem 252： 8615-8623（1977）。
4. Kobata，A 。內(nei) 切和外切糖苷酶在糖綴合物結構研究中的用途。Anal Biochem 100： 1-14（1979）。
5. Prime，S.，J。Dearnley，AM Venton，RB Parekh和CJ Edge。基於(yu) 外切糖苷和內(nei) 切糖苷酶消化的寡糖測序以及產(chan) 物的液相色譜分析。 Chromatogr A 720： 263-274（1996）。
試劑盒包括酶加反應緩衝(chong) 液。
足以進行多達60個(ge) 反應
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