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bellbrooklabs Transcreener cGAMP說明書

 更新時間:2020-12-29 點擊量:1978

bellbrooklabs Transcreener cGAMP說明書(shu)

bellbrooklabs Transcreener® cGAMP cGAS

 

bellbrooklabs利用Transcreener cGAMP cGAS分析法發現cGAS抑製劑

Transcreener cGAMP cGAS分析法直接測量由環狀GMP-AMP合酶(cGAS,C6orf150、2'3'-cGAMP合酶)產(chan) 生的環狀GMP-AMP  (cGAMP)。通過測量cGAMP的產(chan) 量,研究人員可以有效地確定 cGAS酶的活性。該測定法提供了一個(ge) 強大的工具,可以篩選整個(ge) 化合物庫中的cGAS調節劑,以 幫助找到針對cGAS-STING途徑的新療法。

cGAS是STING途徑中的重要信使

真核細胞胞質溶膠中的存在是感染或細胞損傷(shang) 的指示,並且在I型幹擾素(IFN)誘導的驅動下引發強烈的免疫反應。cGAS是細胞質中雙鏈的非常靈敏的傳(chuan) 感器。的結合激活了該酶,從(cong) 而產(chan) 生了*的環狀二核苷酸第二信使cGAMP,它充當STING(幹擾素基因刺激劑)受體(ti) 的激動劑,從(cong) 而導致I型幹擾素應答。

cGAS STING途徑

直接檢測cGAMP以測量cGAS酶活性

Transcreener cGAMP FP分析-了解更多信息
cGAS分析示意圖FP
 
 

Transcreener cGAMP cGAS FP檢測技術手冊(PDF)

 
cGAMP TR-FRET分析-了解更多
cGAS分析示意圖TR-FRET
 
 

應用領域

  • 測量cGAS的酶活性
  • 篩選cGAS抑製劑的複合文庫
  • 量化抑製劑效力
  • 確定抑製劑-cGAS停留時間

特征

  • 直接檢測未標記的cGAMP
  • 易於使用,同質,一步式
  • 初始速度條件下的穩健分析Z'> 0.7
  • 遠紅色熒光讀數大程度地減少了化合物幹擾
  • 一種安全的非放射性方法
  • 可用於FP或TR-FRET讀數

易於使用,混合閱讀,HTS就緒分析

Transcreener cGAS分析法采用易於(yu) HTS使用,混合閱讀的格式。運行您的酶反應,添加 Transcreener試劑,然後閱讀板。該測定與(yu) 96、384和1536孔格式兼容。

在cGAS初始速度下檢測cGAMP

當使用標準曲線將原始數據轉換為(wei) cGAMP時,該測定法顯示線性。cGAS被雙鏈激活,並需要ATP和GTP底物來生產(chan) cGAMP。

全長人cGAS滴定

cGAS酶滴定

線性響應

抑製劑篩選和執行SAR

Transcreener cGAS分析法旨在以高通量格式篩選化合物庫。還可以使用該測定法進行隨訪SAR,從(cong) 而輕鬆確定抑製劑的效價(jia) 。

1600複合先導篩

獲取準確的劑量響應測量

cGAS抑製劑劑量反應曲線

說明了cGAS酶的和底物依賴性

該測定法準確地證明了cGAS酶的特征。在GTP和ATP均存在的情況下,雙鏈激活了產(chan) 生cGAMP的酶。一個(ge) 45個(ge) 堿基對的ISD(幹擾素刺激性)和一個(ge) 60個(ge) 堿基對的HSV(單純皰疹病毒)均可激活該酶。該測定法對cGAMP具有很高的親(qin) 和力,即使存在其他核苷酸也可以檢測。

ds激活cGAS酶

cGAS 滴定

對ATP和GTP的依賴

依賴於ATP和GTP的cGAS酶

出色的信號穩定性

該測定顯示24小時以上的信號穩定性。這樣的印版穩定性對於(yu) 大型的高通量篩選至關(guan) 重要,由於(yu) 大量樣品需要大量時間才能完成。

標準曲線包括ATP,GTP,ds和cGAMP的滴定。在每個(ge) 時間點讀取相同的板。

cGAS分析信號穩定性
 

cGAS分析服務

有興(xing) 趣推進您的程序,但不想內(nei) 部進行分析嗎?我們(men) 的科學家可以提供幫助!BellBrook的科學家將利用其豐(feng) 富的生物化學和酶學專(zhuan) 業(ye) 知識與(yu) 您合作,並加快您的cGAS計劃。

分析開發服務

潛在客戶發現服務包括:

  • 抑製劑篩選–識別或確認靶標的活性。
  • 抑製劑效能分析–靶標和/或相關蛋白的劑量反應。快速IC 50結果。
  • 停留時間測量–使用“跳躍稀釋”酶法測定k off。
  • 作用機理研究–動力學分析定義了抑製方式。

聯係我們以了解更多信息

請填寫(xie) 下麵的表格。我們(men) 將迅速做出響應,以使對話進展順利,並了解我們(men) 如何提供幫助。我們(men) 保持事情分散,保密和專(zhuan) 業(ye) 。

 
 

在主要的多模閱讀器上驗證了遠紅FP和TR-FRET讀數

供應商儀器
bioteklogoTriStar²SLB 942
密特拉拉斯LB 943
 
bioteklogoCytation™5
Cytation™3
Cytation™1
Synergy™H1
Synergy™2 / H4 / 4
Synergy™HTX
Synergy™Neo 2
 
BMGLABTECH徽標POLARstar ®歐米茄
FLUOSTAR ®歐米茄
PHERAstar ® FSX
PHERAstar ®加/ FS
CLARiosestar ® /加
 
MDS AT徽標分析師® GT / HT
雙子座® XPS / EM
的SpectraMax ® M2 / M2e的
的SpectraMax ® M5 /的M5e / FlexStation ® 3
的SpectraMax ®範式
 
珀金埃爾默標誌的EnVision ® /的EnVision ® XCITE
 
tecanLogo無限® M1000 / M1000Pro / Safire2™
無限® M200
無限® F500
無限® F200 /超進化
Spark™10M

包含什麽

 
零件筆記
cGAMP抗體對二核苷酸cGAMP具有特異性的抗體。
示蹤劑當被置換時,取決於測定形式,可以在FP或TR-FRET中讀取熒光的變化。
停止並檢測緩衝區B,10X可以用於終止酶反應以終止終點讀數的緩衝液。
三磷酸腺苷ATP可用於酶反應和標準曲線。
GTPGTP可用於酶反應和標準曲線。
cGAMPcGAMP可用於創建標準曲線。
幹擾素刺激ISD是用於激活cGAS酶的45 bp寡聚體。

您將需要什麽

 
零件筆記
cGAS酶您可以直接通過BellBrook Labs購買活性cGAS酶 。
酶緩衝液我們經常使用含有20mM TRIS(pH 7.5)中,5毫摩爾MgCl酶緩衝液2,0.01%的Brij-35和1%DMSO(測試化合物溶劑)。使用適合您的酶條件的緩衝液
檢測板您可以直接通過BellBrook Labs購買測定板。

 

FP-需要一個(ge) 具有非粘合表麵的全黑色印版。我們(men) 建議康寧384孔板,目錄 #4514。

TR-FRET-需要具有無粘合表麵的全白色板。我們(men) 建議使用康寧384孔板Cat。#4513

 

Transcreener cGAMP cGAS分析試劑盒

*

 
貨號。產品描述價錢
3024-1KTranscreener cGAMP cGAS FP測定法(1,000測定法,384孔)$ 798.00
3024-10KTranscreener cGAMP cGAS FP測定法(10,000測定法,384孔)$ 4,615.00
3024-100KTranscreener cGAMP cGAS FP測定(10 X 10,000測定,384孔)$ 23,075.00
3025-1KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET測定(1,000測定,384孔)$ 875.00
3025-10KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET測定(10,000測定,384孔)$ 4,989.00
3025-100KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET測定(10 X 10,000測定,384孔)$ 24,950.00
 

cGAS酶訂購信息

 

 
貨號。產品描述價錢
2227重組cGAS酶,活性的,人的,全長,10 µg$ 399.00
2228重組cGAS酶,活性的,人的,全長,100 µg$ 1,398.00
 
 

cGAS篩選套件

*當以1.75μg/ mL(30 nM)使用時,包括用於(yu) 各孔的足夠酶

 
貓。沒有。產品描述價錢
3024-1K-B包括Transcreener cGAS FP Assay 1K試劑盒和20 µg人類cGAS酶$ 1,275.00
3024-10K-B包括Transcreener cGAS FP Assay 10K試劑盒和200 µg人類cGAS酶$ 6,670.00
3025-1K-B包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K試劑盒和20 µg人類cGAS酶$ 1,345.00
3025-10K-B包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K試劑盒和200 µg人類cGAS酶$ 6,995.00
 

FP檢測板

 

貨號。產品描述價錢
2233康寧96孔黑色檢測板(#3686),3片裝(200+檢測)$ 40.00
2229康寧384孔黑色檢測板(#4514),3包(1,000多種檢測)$ 45.00
2230康寧384孔黑色檢測板(#4514),30包(10,000+檢測)$ 400.00

 

TR-FRET檢測板


貨號。產品描述價錢
2234康寧96孔白色檢測板(#3642),3包(200多種檢測)$ 40.00
2231康寧384孔白色檢測板(#4513),3包(1,000多種檢測)$ 50.00
2232康寧384孔白色檢測板(#4513),30包(10,000+檢測)$ 450.00