creativemolecules 002SS說明書

creativemolecules 002SS說明書(shu)

DTSSP-H8/D8

產(chan) 品信息DTSSP-H8/D8二硫代琥珀酰亞(ya) 胺丙酸酯12 x 1 mg DTSSP-H8和DTSSP-D8 NO NO OO SO SO xx xx xx xx xNaO SO3Na 3S x = H-DTSSP-H8 x = D-DTSSP-D8目錄號：編號：002SS分子式：C14H14N2Na2O14S4/C14D8H6N2Na2O14S4分子量：MW 608/616特征：同位素編碼。
水溶性。
化學可裂解。
CID可裂解。
DTSSP-H8/D8是一種水溶性、同雙功能、同位素編碼的可裂解交聯劑二硫代磺基琥珀酰亞(ya) 胺丙酸酯。
試劑的輕(H8)和重(D8)形式的區別在於(yu) 重形式的8個(ge) 氘原子，而不是輕形式的8個(ge) 氫原子，否則在化學上是相同的。同位素編碼能夠在質譜中明確檢測交聯產(chan) 物。DTSSP-H8/D8的反應產(chan) 物將在質譜中表現為(wei) 強度相等的雙峰，對應於(yu) 試劑的輕(H8)和重(D8)形式，以8.05016 Da除以電荷狀態（+ 1為(wei) 8.05，+ 2為(wei) 4.03，+ 3為(wei) 2.68等）。
在pH 7-9緩衝(chong) 液中，N-羥基磺琥珀酰亞(ya) 胺(NHS)酯主要與(yu) 伯氨基(-NH2)反應，形成穩定的酰胺鍵。因此，交聯反應應避免使用含胺的緩衝(chong) 液（Tris、甘氨酸、銨鹽等）。
DTSSP具有水溶性，可在水中製備貯備液。為(wei) 製備50 mM DTSSP-H8/D8儲(chu) 備液，向含有1 mg試劑的預稱重管中加入33 μL水。

 使用以下公式計算肽交聯物的質量：
[M12+H]+
= [M1+H]+
+[M2+H]+
+172.97310
[M1OH + H]+
= [M1+H]+
+191.99149
[M1i + H]+ =[M1 + H]+
+173.98093
[M1NH2 + H]+
= [M1+H]+
+191.00747
其中，M1、M2-遊離肽的質量；M12-肽間交聯的質量；M1OH-死端交聯的質量；M1i-
肽內(nei) 交聯；M1NH2–死端酰胺的質量（如果用銨鹽淬滅反應）。
MS-Bridge（https://prospector.ucsf.edu）橋聯元素組成：C6 H6 O2 S2；–OH的修飾元素組成
末端C6 H8 O3 S2；–NH2末端的修飾元素組成：C6 H9 N1 O2 S2。
FLAG(DYKDDDDK)肽試驗反應的典型MALDI質譜圖見圖1。
試劑的輕(H8)型反應產(chan) 物為(wei) ：1013–無FLAG肽；1187–肽內(nei) 交聯；1205–
死端交聯；2199-肽間交聯。
DTSSP-H8/D8交聯物可被DTT裂解（圖2）（參考文獻1）或CID（圖3）。在這兩(liang) 種情況下，
仍用H4/D4原子同位素標記交聯，並將在光譜中表現為(wei) 等強度峰的雙峰分離
除以電荷狀態4.03 Da。與(yu) CID一樣，裂解可以在CID的兩(liang) 個(ge) C-S鍵中的任何一個(ge) 發生。
交聯劑，導致構成肽間的每個(ge) 單獨肽的兩(liang) 組H4/D4雙鏈被66 Da分開
交聯（圖3）（參考文獻2、3）。