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nordicmubio FIX＆PERM®細胞固定和通透試劑盒介紹

　更新時間：2021-04-14　點擊量：1502

 

 nordicmubio FIX＆PERM®細胞固定和通透試劑盒
在流式細胞儀中使用抗體對蛋白質生物標誌物進行細胞內染色，為研究和臨床診斷中的細胞表型和功能表征提供了多種新選擇。
實際上，某些細胞類型的明確表型鑒定可能需要同時標記細胞表麵和細胞內標記物。另外，典型膜分子的胞質定位可以證明是可靠的譜係標誌物，例如未分化白血病中的胞質CD3和CD22。
在這種情況下，對於許多其他細胞生物學和功能研究，必須進行細胞內免疫染色。為此，Nordic-MUbio提供了細胞固定和通透試劑盒FIX＆PERM®，與流式細胞術中細胞內細胞染色的其他方法相比，它具有許多優勢。
FIX＆PERM®
  • 溫和固定細胞，保留其流式細胞儀散射特征
  • 允許同時表征細胞內和細胞表麵標記
  • 快速的技術–整個過程可以在不到一小時的時間內完成，可以立即進行分析或存儲24小時
  • 嚴格的質量控製程序–使用定義明確的血液樣本並隨後比較獲得的白細胞群的散射特征來確定每批樣品的質量，從而確保一批又一批的結果一致且可靠
  • 一係列具有優化方案的細胞內抗體，可與FIX＆PERM®一起使用
FIX＆PERM®是使用兩種試劑的簡單程序。試劑A輕輕固定細胞，而試劑B透化細胞。特定的製劑可降低背景並允許同時添加通透性培養基和熒光染料標記的抗體，從而可以對細胞內結構（如細胞質或核酶，癌蛋白，細胞因子，免疫球蛋白等）進行染色。
程序
對於每個要分析的樣品，在5 ml試管中使用50 µl全血，骨髓或單核細胞懸浮液
  • 加入100 µl試劑A（固定介質，室溫下保存和使用）
  • 在室溫下孵育15分鍾
  • 加入5 ml磷酸鹽緩衝鹽水並以300 g離心5分鍾
  • 除去上清液，並向細胞沉澱中加入100 µl試劑B（通透性培養基）和20 µl適當的單克隆抗體偶聯物
  • 低速渦旋1-2秒
  • 在室溫下孵育15分鍾
  • 如上所述，用磷酸鹽緩衝液洗滌細胞
  • 除去上清液並將細胞重懸於鞘液中以便立即分析，或將細胞重懸於0.5 ml 1.0％甲醛中，並在黑暗中於2-8°C儲存
  • 在24小時內分析固定細胞
為與FIX＆PERM®一起使用而優化的產品
大多數可用的單克隆抗體偶聯物均可與FIX一起使用。但是，在某些情況下，可能必須優化固定步驟。
Nordic-MUbio提供了多種針對FIX＆PERM®而優化的小鼠抗人偶聯（PE / FITC）單克隆抗體。
 
 
Antigen Clone Isotype Format Quantity Cat. No.
CD3 UCHT1 IgG1 Purified 0.2 mg GM-4011
      FITC-labeled 100 tests GM-4012
      PE-labeled 100 tests GM-4013
CD22 RFB4 IgG1 Purified 0.2 mg GM-4051
      FITC-labeled 100 tests GM-4052
      PE-labeled 100 tests GM-4053
Lactoferrin 4C5 IgG1 Purified 0.2 mg GM-4111
      PE-labeled 100 tests GM-4113
Myeloperoxidase 8E6 IgG1 Purified 0.2 mg GM-4191
(MPO-C2)     FITC-labeled 100 tests GM-4192
      PE-labeled 100 tests GM-4193
Lysozyme LZ-2 IgG1 Purified 0.2 mg GM-4131
      FITC-labeled 100 tests GM-4132
CD68 Ki-M7 IgG1 FITC-labeled 100 tests GM-4152
IL-1 beta FIB3 IgG1 FITC-labeled 100 tests GM-4162
IFN-gamma GZ4 IgG1 FITC-labeled 100 tests GM-4172
Furthermore, a number of Combi panels are offered for dual immunostaining protocols.
Antigen Clone Isotype Format Quantity Cat. No.
Negative control Vl-AP IgG1 FITC-labeled 50 tests GIC-201
  Vl-AP IgG1 PE-labeled   -
Lysozyme LZ-2 IgG1 FITC-labeled 50 tests GIC-206
Lactoferrin 4C5 IgG1 PE-labeled   -
Myeloperoxidase 8E6 IgG1 FITC-labeled 50 tests GIC-212
Lactoferrin 4C5 IgG1 PE-labeled   -
Myeloperoxidase 8E6 IgG1 FITC-labeled 50 tests GIC-213
CD3 UCHT1 IgG1 PE-labeled   -
Myeloperoxidase 8E6 IgG1 FITC-labeled 50 tests GIC-214
CD22 RFB4 IgG1 PE-labeled