使用FAM FLICA Caspase-1檢測試劑盒檢測caspase-1活性。該體(ti) 外測定采用熒光抑製劑探針FAM-WEHD-FMK標記活細胞中的活性caspase-1酶。使用熒光顯微鏡，熒光板讀數器或流式細胞儀(yi) 分析樣品。

 分類：細胞凋亡，Caspase-1，胱天蛋白酶，FLICA®

胱天蛋白酶在細胞凋亡和炎症中起重要作用。研究人員使用ICT的FLICA檢測試劑盒，以通過胱天蛋白酶在培養(yang) 的細胞和組織中定量凋亡的方法。FAM FLICA Caspase-1探針使研究人員能夠評估caspase-1的激活。

FLICA試劑FAM-WEHD-FMK進入每個(ge) 細胞，並與(yu) 激活的caspase-1不可逆地結合。由於(yu) FAM-WEHD-FMK FLICA試劑與(yu) 活性酶共價(jia) 偶聯，因此保留在細胞內(nei) ，而任何未結合的FAM-WEHD-FMK FLICA試劑則擴散出細胞並被衝(chong) 洗掉。剩餘(yu) 的綠色熒光信號是添加試劑時細胞中存在的活性caspase-1酶活性的直接量度。包含結合的FLICA的細胞可以通過熒光酶標儀(yi) ，熒光顯微鏡或流式細胞儀(yi) 進行分析。可以立即讀取用FLICA試劑標記的細胞，或使用試劑盒中包含的固定劑保存16小時。未固定的樣品也可以分別用碘化丙錠或Hoechst 33342進行分析，以檢測壞死或核形態的變化。

1.準備樣品和對照
2.用diH 2 0稀釋10X細胞凋亡洗滌緩衝(chong) 液1:10。3 
.用50μLDMSO稀釋FLICA 。
4.加入200μLPBS稀釋FLICA 1：5。
5.以1:30的比例將稀釋的FLICA加到每個(ge) 樣品中（例如，將10μL加到290μL培養(yang) 的細胞中）。
6.孵育大約1小時。
7.取出培養(yang) 基並洗滌細胞3次：添加1X細胞凋亡洗滌緩衝(chong) 液並旋轉細胞。
8.如果需要，用其他汙漬標記，例如Hoechst，碘化丙啶，7-AAD或抗體(ti) 。
9.如果需要，固定單元格。
10.用熒光顯微鏡，熒光板讀數器或流式細胞儀(yi) 進行分析。FAM-FLICA在492 nm處激發，並在520 nm處發射。

如果使用貼壁細胞，請參閱手冊(ce) 以了解其他方案。

ICT的FAM-FLICA Caspase-1（WEHD）試劑盒（＃9162）用於(yu) 檢測THP-1單核細胞的凋亡。用FAM-WEHD-FMK標記細胞，先用陰性對照（DMSO）或LPS（1 µg / mL，3小時）處理，再用尼古丁（20 µM，30分鍾）處理，以誘導細胞凋亡。處理後，將細胞洗滌並重懸於(yu) PBS + 0.5％BSA中。然後將細胞用Hoechst 33342染色，固定並使用配備了EGFP（Ex 470/30，Em 530/50）和DAPI（Ex 375/28，Em 460/50）LED的Logos iRiS數字細胞成像係統進行觀察以20倍的尺寸過濾立方體(ti) 。與(yu) DMSO模擬處理的細胞（下部的圖像）相比，在LPS +尼日利亞(ya) 黴素處理的細胞（上部的圖像）中觀察到綠色FAM-FLICA染色水平升高（最左側(ce) 的圖像）。還顯示了Hoechst 33342染色（中間圖像）以及EGFP和DAPI通道的覆蓋圖（最右邊的圖像）。

 •試劑名稱：FAM-WEHD-FMK 
•目標：Caspase-1 
•激發/發射：492 nm / 520 nm 
•分析方法：流式細胞儀(yi) ，熒光顯微鏡，熒光板讀數器
•樣品類型：細胞培養(yang)
•儲(chu) 存：2 -8°C 
•運送：過夜（國內(nei) ）運送，國際優(you) 先運送

試劑盒9161：25個(ge) 測試
•FLICA Caspase-1試劑（FAM-WEHD-FMK），1小瓶，＃6708 
•10X細胞凋亡洗滌緩衝(chong) 液，15 mL，＃635 
•固定劑，6 mL，＃636 
•碘化丙錠，1 mL， ＃638 
•Hoechst 33342，1 mL，＃639 
•試劑盒手冊(ce)

試劑盒9162：100個(ge) 測試
•FLICA Caspase-1試劑（FAM-WEHD-FMK），4個(ge) 樣品瓶，＃6708 
•10X細胞凋亡洗滌緩衝(chong) 液，60 mL，＃634 
•固定劑，6 mL，＃636 
•碘化丙錠，1 mL， ＃638 
•Hoechst 33342，1 mL，＃639 
•試劑盒手冊(ce)