eaglebio KTR-757說明書(shu)

MMAE ADC ELISA Kit

 貨號：KTR-757

 MMAE抗體(ti) 藥物偶聯物（ADC）ELISA分析試劑盒（酶聯免疫分析試劑盒）旨在用於(yu) 定量測定測試樣品中抗體(ti) -MMAE-偶聯物的水平。對於(yu) MMAE抗體(ti) 藥物偶聯物（ADC）的臨(lin) 床前和臨(lin) 床藥理學研究非常有用。該試劑盒可直接使用來自組織/細胞培養(yang) 物的樣品以及來自人，大鼠，小鼠，靈長類動物等的血清樣品。基於(yu) 該試劑盒的基於(yu) 人源化單克隆抗體(ti) 的MMAE-ADC和基於(yu) 小鼠單克隆抗體(ti) 的MMAE-ADC均可進行測量。

MMAE ADC ELISA試劑盒

在美國開發和生產(chan) 的MMAE ADC ELISA試劑盒

尺寸：1×96個(ge) 孔的
靈敏度：0.0435μg/ mL的
動態範圍：0.032 - 4.0微克/毫升
孵育時間：2.5小時
樣品類型：血清，細胞培養(yang) ，組織
樣本大小：100μL
備用名稱：單甲基auristatin E，MMAE抗體(ti) 藥物共軛ELISA試劑盒
僅(jin) 供研究使用

包含的控件

測定原理

MMAE ADC ELISA試劑盒的設計，開發和生產(chan) ，用於(yu) 定量測量血清中的單甲基澳瑞他汀E（MMAE）共軛物。該測定法利用競爭(zheng) 性免疫測定技術和僅(jin) 與(yu) 單甲基澳瑞他汀E結合的抗體(ti) 結合使用。

將測定校準物（抗體(ti) MMAE共軛物）和測試血清樣品直接添加到微滴定板的孔中，該板已塗有特異性抗MMAE抗體(ti) 。隨後，將辣根過氧化物酶（HRP）共軛的MMAE添加到每個(ge) 孔中。在溫育期間，抗體(ti) MMAE綴合物與(yu) HRP綴合的MMAE競爭(zheng) 抗MMAE抗體(ti) 的有限結合位點。形成了包被良好的“抗MMAE抗體(ti) -HRP綴合的MMAE”的免疫複合物。未結合的抗體(ti) 和緩衝(chong) 液基質在隨後的洗滌步驟中被去除。為(wei) 了檢測該免疫複合物，將孔與(yu) 底物溶液在定時反應中孵育，然後將其與(yu) 酸性試劑（即ELISA終止溶液）終止反應。然後在分光光度計酶標儀(yi) 中測量吸光度。結合到每個(ge) 微量滴定孔壁上的免疫複合物的酶促活性與(yu) 測試樣品中抗體(ti) -MMAE偶聯物的量成反比。通過在4參數或log-logit曲線擬合上繪製每個(ge) 校準器的吸光度與(yu) 各自的抗體(ti) -MMAE綴合物濃度的關(guan) 係來生成校準曲線。直接從(cong) 該校準曲線確定測試樣品中抗體(ti) -MMAE綴合物的濃度。

檢驗程序

1. 將足夠數量的Anti-MMAE抗體包被的微孔板/孔放在支架中，以一式兩份運行人類Anti-MMAE標準品，對照和未知樣品。
2. 將100 µL校準物和測試樣品添加到微孔中。
3. 牢固密封板孔，蓋上箔紙或其他材料以防光照，然後在ELISA板振動器（小軌道半徑）上以400至450 rpm的轉速旋轉30分鍾。
4. 立即向每個孔中加入25 µL HRP共軛MMAE（目錄號30719）。（注意：添加HRP共軛MMAE之前無洗滌步驟）
5. 牢固密封板孔，蓋上箔紙或其他材料以避光，然後在ELISA板振蕩器（小軌道半徑）上旋轉2小時。在400至450 rpm下±10分鍾。
6. 通過將350 µL工作洗滌溶液分配到每個孔中，然後將所有內容物*吸出，將每個孔洗滌5次。
7. 或者，可以使用自動微孔板清洗機。
8. 在每個孔中加入100 µL ELISA HRP底物。
9. 用鋁箔或其他材料覆蓋板，以避免暴露在光線下。在室溫下靜置板靜置20分鍾。
10. 立即將100 µL ELISA終止溶液添加到每個孔中。輕輕混合。
11. 讀取450 nm處的吸光度。

典型標準曲線

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