kerafast EH1025-PM說明書(shu)
Pseudotyped ΔG-luciferase (G*ΔG-luciferase) rVSV
假型ΔG-熒光素酶（G*ΔG-熒光素酶）rVSV
ΔG-熒光素酶是一種複製受限的重組水皰性口炎病毒 (rVSV)，可用於(yu) 生產(chan) 含有來自多種異源病毒（包括需要 BSL-3 或 BSL-4 生物防護的病毒）包膜糖蛋白的假型病毒；然而，由於(yu) rVSV-ΔG 假型的傳(chuan) 染性僅(jin) 限於(yu) 單輪複製，因此可以使用 BSL-2 遏製措施來處理假型。這些特性與(yu) rVSV-ΔG 假型的快速複製動力學一起，已被證明在旨在鑒定多種病毒的細胞受體(ti) 的研究中很有用，並且它們(men) 還提供了一個(ge) 強大的平台來篩選進入抑製劑的文庫並評估隨後的中和抗體(ti) 反應。疫苗接種[1]。
訂購該試劑時，將發送一瓶 VSV-G 假型 ΔG-熒光素酶 (G*ΔG-熒光素酶)，按照 [1] 中所述的程序，可直接使用該酶生成含有您選擇的包膜蛋白的假型。用 G*ΔG-熒光素酶感染細胞會(hui) 在感染後 2-3 小時內(nei) 產(chan) 生可檢測的熒光素酶活性，並在感染後的接下來 4-8 小時內(nei) 迅速增加。對於(yu) 每個(ge) 使用的細胞係，感染性需要針對熒光素酶活性進行標準化。絕對傳(chuan) 染性可以通過間接免疫熒光顯微鏡或流式細胞術使用 VSV 基質 (M) 蛋白、VSV 核衣殼 (N) 蛋白或熒光素酶的抗體(ti) 進行量化。由於(yu) G*ΔG-熒光素酶經曆單輪感染，每個(ge) M、N 或熒光素酶陽性細胞代表一個(ge) 病毒感染單位。
研究員有責任尋求機構生物安全安全委員會(hui) 批準在其實驗室空間內(nei) 使用重組 、轉基因動物或傳(chuan) 染性病原體(ti) ，並在使用這些材料期間保持機構生物安全安全委員會(hui) 的批準。
來自Michael A. Whitt 博士的實驗室。，田納西大學。
| 目錄編號 | 產品 | 尺寸 | 價格 |
|---|---|---|---|
EH1020-PM | 假型ΔG-熒光素酶（G*ΔG-熒光素酶）rVSV | 300uL | 966.00 美元 |
EH1025-PM | 假型 ΔG-熒光素酶 (G*ΔG-熒光素酶) rVSVw/ pCAGGS-G-Kan | 300uL；帶 pCAGGS-G-Kan | 1,073.00 美元 |
| 產品類別： | 病毒 |
| 生物安全等級： | BSL-2 |
| 載體信息： | G*ΔG-熒光素酶使用 [1] 中所述的 VSV 反向遺傳學係統從質粒 pVSV-δG-熒光素酶、pBS-N-ΦT、pBS-P-ΦT、pBS-G-ΦT 和 pBS-L-回收ΦT。恢複後，在用 pCAGGS-G 轉染的 BHK-21 細胞上擴增斑塊分離物（斑塊可以在瞬時表達 VSV-G 的細胞上獲得）。通過感染用 pCAGGS-G 以低複數 (MOI = 0.1) 轉染的 BHK-21 細胞並在 BHK-21 細胞上滴定，產生二級工作原液。 |
| 病毒： | VSV-G 假型 ΔG-熒光素酶 (G*ΔG-熒光素酶) |
| 滴度： | ≥ 6x10e8 IU/mL |
| 血清型： | 印第安納州/聖胡安 |
| 接種條件： | 為了產生具有異源包膜糖蛋白的假型，細胞（BHK-21 或 HEK-293）首先用表達所選糖蛋白的質粒轉染，約 24 小時後用 G*ΔG-熒光素酶以約 3 的複數（MOI）感染到 5. 為了產生 G*ΔG-熒光素酶的工作儲備，已用 pCAGGS-G 轉染的細胞用低多重性 (MOI = 0.1) 的 G*ΔG-熒光素酶感染，並在大約 18-24 小時後收獲培養物上清液。感染。 |
| 貯存： | 儲存在-80℃。不推薦多次冷凍/解凍。 |
| 發貨： | 在幹冰上冷凍 |
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