nordicmubio 10050100說明書

背景 
在過去十年中，我們(men) 的雙鏈 RNA (dsRNA) 抗體(ti) 已被廣泛用於(yu) 檢測和表征具有 dsRNA 基因組或中間體(ti) 的動植物病毒。此外，抗 dsRNA 抗體(ti) 可用作檢測病原體(ti) 的診斷工具，包括在石蠟包埋的固定組織樣本中進行檢測（Richardson 等，2010）。K1 單克隆抗體(ti) 識別 dsRNA 的親(qin) 和力與(yu) 我們(men) 廣泛使用的 J2 抗體(ti) 相似。可用於(yu) 細胞和組織中dsRNA的組織學和細胞學檢測。事實證明，在 J2 無法提供令人滿意結果的罕見實驗設置中，它作為(wei) J2 的替代品特別有用，可以解決(jue) 交叉反應和/或去除不需要的背景。K1 可用於(yu) 檢測多種病毒的 dsRNA 中間體(ti) ，如肝炎病毒、泰勒氏鼠腦脊髓炎病毒或日本腦炎病毒。它用於(yu) 檢測培養(yang) 細胞和固定石蠟包埋的組織學樣品中的 dsRNA（參見出版物）。如果需要檢測 Poly I:C，我們(men) 會(hui) 高度使用 K1 而不是 J2，因為(wei) K1 對這種合成的聚核糖核苷酸具有更高的親(qin) 和力（參見 Schönborn 等，1991，圖 2）。K1 已成功用於(yu) 免疫熒光顯微鏡、流式細胞術 (FACS) 和免疫捕獲方法（如斑點印跡和 ELISA）。J5 IgG2b 抗體(ti) 識別 dsRNA 的親(qin) 和力和特異性與(yu) 我們(men) 的 J2 抗體(ti) 非常相似（參見 Schonborn 等，1991），但具有不同的同種型——因此可以更靈活地同時檢測 dsRNA 與(yu) 其他標記物，尤其是在免疫熒光顯微鏡下, 並已被用於(yu) 檢測魚病毒傳(chuan) 染性胰腺壞死病毒 (IPNV)（Levican-Asenjo 等人，2019 年）或 Vero 細胞中的 ECMV 的複製中間體(ti) 。J5 抗體(ti) 可以檢測所有測試形式的 dsRNA，包括來自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與(yu) 我們(men) 的其他抗體(ti) 類似，J5 的 dsRNA 結合與(yu) 序列無關(guan) ，隻要 dsRNA 的長度超過 40nt。該抗體(ti) 不與(yu) ssRNA、ss 或 ds 發生反應。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術中成功測試。J5 抗體(ti) 可以檢測所有測試形式的 dsRNA，包括來自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與(yu) 我們(men) 的其他抗體(ti) 類似，J5 的 dsRNA 結合與(yu) 序列無關(guan) ，隻要 dsRNA 的長度超過 40nt。該抗體(ti) 不與(yu) ssRNA、ss 或 ds 發生反應。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術中成功測試。J5 抗體(ti) 可以檢測所有測試形式的 dsRNA，包括來自登革熱病毒、腦心肌炎病毒、痘苗病毒、呼腸孤病毒或黃瓜花葉病毒等病毒的 poly(A):poly(U)、poly(I):poly(C) 和 dsRNA病毒。與(yu) 我們(men) 的其他抗體(ti) 類似，J5 的 dsRNA 結合與(yu) 序列無關(guan) ，隻要 dsRNA 的長度超過 40nt。該抗體(ti) 不與(yu) ssRNA、ss 或 ds 發生反應。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術中成功測試。該抗體(ti) 不與(yu) ssRNA、ss 或 ds 發生反應。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術中成功測試。該抗體(ti) 不與(yu) ssRNA、ss 或 ds 發生反應。J5 已在核酸 ELISA、免疫印跡和免疫熒光顯微術中成功測試。

同義(yi) 詞： Anti-dsRNA mAb 比較集

來源 
雌性 DBA/2 小鼠腹膜內(nei) 注射 50 ug L-dsRNA 和 75 ug 甲基化牛血清白蛋白的混合物，乳化在*弗氏佐劑中。在幾次加強後，脾細胞與(yu) Sp2/0-Agl4 骨髓瘤細胞融合以產(chan) 生雜交瘤克隆。

產(chan) 品 
小鼠單克隆抗體(ti) J2 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大於(yu) 或等於(yu) 40 bp。dsRNA 識別與(yu) 抗原的序列和核苷酸組成無關(guan) 。迄今為(wei) 止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 J2 識別，盡管在某些分析中它對 poly (I).poly(C)比其他dsRNA抗原低約10倍。小鼠單克隆抗體(ti) J5 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大於(yu) 或等於(yu) 40 bp。dsRNA 識別與(yu) 抗原的序列和核苷酸組成無關(guan) 。到目前為(wei) 止，研究了所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A)。poly(U) 已被 J5 識別，盡管在某些分析中它對 poly(I).poly(C) 的親(qin) 和力比對其他 dsRNA 抗原的親(qin) 和力低約 10 倍。mAb K1 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大於(yu) 或等於(yu) 40 bp。dsRNA 識別與(yu) 抗原的序列和核苷酸組成無關(guan) 。迄今為(wei) 止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親(qin) 和力高於(yu) 對其他 dsRNA 抗原的親(qin) 和力，盡管表觀結合常數的差異在不同的實驗條件下可能會(hui) 有所不同。mAb K1 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大於(yu) 或等於(yu) 40 bp。dsRNA 識別與(yu) 抗原的序列和核苷酸組成無關(guan) 。迄今為(wei) 止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親(qin) 和力高於(yu) 對其他 dsRNA 抗原的親(qin) 和力，盡管表觀結合常數的差異在不同的實驗條件下可能會(hui) 有所不同。mAb K1 可識別雙鏈 RNA (dsRNA)，前提是螺旋長度大於(yu) 或等於(yu) 40 bp。dsRNA 識別與(yu) 抗原的序列和核苷酸組成無關(guan) 。迄今為(wei) 止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親(qin) 和力高於(yu) 對其他 dsRNA 抗原的親(qin) 和力，盡管表觀結合常數的差異在不同的實驗條件下可能會(hui) 有所不同。迄今為(wei) 止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親(qin) 和力高於(yu) 對其他 dsRNA 抗原的親(qin) 和力，盡管表觀結合常數的差異在不同的實驗條件下可能會(hui) 有所不同。迄今為(wei) 止研究的所有天然存在的 dsRNA（40-50 種）以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 識別。正如 Schönborn 等人所述。K1 對 poly(I).poly(C) 的親(qin) 和力高於(yu) 對其他 dsRNA 抗原的親(qin) 和力，盡管表觀結合常數的差異在不同的實驗條件下可能會(hui) 有所不同。

配方： 每個(ge) 凍幹樣品都應用 100 µl 無菌蒸餾水複溶。然後將 mAb 置於(yu) PBS 中，不含任何穩定劑或防腐劑，濃度為(wei) 1 mgr/ml。作為(wei) 凍幹程序的結果，重建的抗體(ti) 可能含有少量聚集體(ti) 形式的變性蛋白質，這可能會(hui) 幹擾某些應用，例如免疫組織化學（例如，通過提供高背景）。因此，我們(men) 強烈建議在使用和使用上清液之前對重組的抗體(ti) 進行離心（微量離心）。

純化方法： A蛋白-瓊脂糖親(qin) 和層析。

純度： 凝膠電泳純 IgG 抗體(ti) 。

濃度： 重構後的濃度：通過 A280 nm 測定的 1.00 mg/ml（A280 nm = 1.47 對應於(yu) 1 mg/ml 抗體(ti) ）。

應用 
小鼠單克隆抗體(ti) J2、J5 和 K1 可用於(yu) ELISA、dsRNA 免疫印跡、免疫親(qin) 和層析，在某些係統中還可用於(yu) 免疫組織化學（參見參考資料）。對於(yu) 任何特定應用，每種抗體(ti) 的最佳工作稀釋度應通過滴定確定。請注意，dsRNA 免疫印跡之前的核酸分離必須通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進行，因為(wei) 從(cong) 瓊脂糖凝膠印跡後檢測的靈敏度要低得多。不用於(yu) 臨(lin) 床目的。僅(jin) 供體(ti) 外使用。

儲(chu) 存 
重建後的抗體(ti) 應分裝並儲(chu) 存在 -20 °C 或 -70°C。添加 10 mM 疊氮化納後，未稀釋的抗體(ti) 也可以在 +4 °C 下短時間保存。對於(yu) 長期儲(chu) 存，mAb 應保持冷凍。應避免重複冷凍/解凍循環。

運輸條件： 在環境溫度下運輸。

注意 
本產(chan) 品僅(jin) 供研究和體(ti) 外測試使用，不適用於(yu) 涉及人類或動物的診斷或治療程序。它可能含有危險成分。請參閱安全數據表 (SDS) 了解更多信息和正確處理程序。根據當地法規處理產(chan) 品殘餘(yu) 物。本數據表在合理範圍內(nei) 盡可能準確，但 Exalpha Biologicals 對本信息中的任何不準確或遺漏不承擔任何責任。

參考 
1) F. Weber、V. Wagner、SB Rasmussen、R. Hartmann、SR Paludan。雙鏈 RNA 由正鏈 RNA 病毒和 病毒產(chan) 生，但負鏈 RNA 病毒檢測不到。J Virol (2006), 80(10):5059-64。doi：10.1128/JVI.80.10.5059-5064.2006。2) S. Welsch、S. Miller、I. Romero-Brey、A. Merz、CKE Bleck、P. Walther、SD Fuller、C. Antony、J. Krijnse-Locker、R. Bartenschlager。登革熱病毒複製和組裝位點的組成和三維結構。細胞宿主與(yu) 微生物 (2009) 5(4)；365-375。doi.org/10.1016/j.chom.2009.03.007。3) K. Knoops, M. Bárcena, RW Limpens, AJ Koster, AM Mommaas, EJ Snijder。動脈病毒複製結構的超微結構表征：重塑內(nei) 質網以適應病毒 RNA 合成。J 維羅爾。(2012) 86(5)；2474-2487。doi:10.1128/JVI.06677-11。4) SJ Richardson、A. Willcox、DA Hilton、S. Tauriainen、H. Hyoty、AJ Bone、AK Foulis、NG Morgan。使用針對 dsRNA 的抗血清檢測福爾馬林固定石蠟包埋組織中的病毒感染。J 臨(lin) 床病毒。(2010) 49(3); 180-5。doi：10.1016/j.jcv.2010.07.015。5) K. Karikó、H. Muramatsu、J. Ludwig、D. Weissman，生成最佳 mRNA 治療：HPLC 純化消除免疫激活並改善核苷修飾的蛋白質編碼 mRNA 的翻譯，核酸研究 (2011) 39 (21); e142，https://doi.org/10.1093/nar/gkr695。6) Schönborn, J., Oberstrass, J., Breyel, E., Tittgen, J., Schumacher, J. 和 Lukacs, N. (1991) 雙鏈 RNA 的單克隆抗體(ti) 作為(wei) 粗核酸中 RNA 結構的探針提取物。核酸研究 19, 2993-3000。7) Lukacs, N. (1994) 通過雙鏈 RNA 的單克隆抗體(ti) 檢測植物中的病毒感染和區分共存病毒。J. 維羅爾。方法 47, 255-272。8) Lukacs, N. (1997) 通過結構特異性抗 RNA 抗體(ti) 檢測有義(yi) ：反義(yi) 雙鏈體(ti) 。在：反義(yi) 技術。實用方法，C. Lichtenstein 和 W. Nellen（編輯），第 281-295 頁。IRL 出版社，牛津。9) Levicán-Asenjo J、Soto-Rifo R、Aguayo F、Gaggero A、Leon O。鮭魚細胞 SHK-1 通過巨胞飲作用將傳(chuan) 染性胰腺壞死病毒內(nei) 化。J Fish Dis。2019 年 7 月；42(7)：1035-1046。doi：10.1111/jfd.13009。近期出版物：Tirosh Shapira、I. Abrrey Monreal、Sébastien P Dion、Mason Jager、Antoine Désilets、Andrea D Olmstead、Thierry Vandal、David W Buchholz、Brian Imbiakha、Guang Gao、Aaleigha Chin、William D Rees、Theodore Steiner、伊萬(wan) ·羅伯特·納比、埃裏克·馬爾索、朱莉·薩勒、艾弗裏·奧古斯特、格琳德·範·德·瓦勒、加裏·R·惠特克、皮埃爾-呂克·布德羅、赫克托·C·阿吉拉爾、理查德·勒杜克、弗朗索瓦·讓。一種新型高效 TMPRSS2 樣蛋白酶抑製劑可阻斷 SARS-CoV-2 相關(guan) 變異，並廣泛保護小鼠免受感染和死亡。bioRxiv 2021.05.03.442520；doi：https://doi.org/10.1101/2021.05.03.442520 https://biorxiv.org/cgi/content/short/2021.05.03.442520v1