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invivogen Zeocin說明書

 更新時間:2021-08-19 點擊量:2265


invivogen Zeocin說明書(shu)

Zeocin

Zeocin™ (solution)Unit sizeCat. code
Selective antibiotic for the Sh ble gene
500 mg (5 x 1ml)
1g (10 x 1 ml)
5g (50 x 1 ml)
5 g (50 ml bottle)
ant-zn-05
Zeocin™ (powder)Unit sizeCat. code
Selective antibiotic for the Sh ble gene
1 g (powder)
5 g (powder)
ant-zn-1p


Zeocin™ | 選擇抗生素:內毒素檢測,無菌試劑

InvivoGen 是全球的 Zeocin™ 生產(chan) 商。

Zeocin™ 是腐草黴素D1的製劑,一種由Streptomyces CL990生產(chan) 的銅螯合糖肽抗生素 。 Zeocin™ 通過嵌入 並切割 來導致細胞死亡。
Zeocin™ 的作用對大多數 需氧細胞有效因此,Zeocin™ 是一種流行且有效的抗生素,用於(yu)  在各種細胞類型(細菌、真核微生物、植物和動物細胞)中選擇帶有Sh ble基因的載體(ti)  

Zeocin™ 抗性是由來自印度鏈球菌Sh ble基因產(chan) 物賦予的,它在與(yu) 抗生素結合後使 Zeocin™ 失活 [1-3]。Sh ble是一個(ge) 370bp 大小的小基因,在許多 InvivoGen 的載體(ti) 中都攜帶。 

通常,哺乳動物細胞對 50-400 µg/ml 的 Zeocin™ 濃度敏感,而細菌對 25 µg/ml 的濃度敏感。

僅(jin) 供研究使用

參考:

1. Drocourt D. 等,1990。用於(yu) 將低等和高等真核生物轉化為(wei) 腐草黴素抗性的 Streptoalloteichus hindustanus ble 基因盒。核。酸。水庫 18: 4009。2 
. Gatignol A. 等人,1988 年。FEBS快報。230:171-5。
3. Dumas P. 等,1994. Embo J. 242 (5) 595-601。

InvivoGen 的 Zeocin™InvivoGen 的 Zeocin™
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規格

產(chan) 品濃度:  100 mg/ml 溶液

CAS號: 11006-33-0

質量控製:每個(ge) 批次都經過*測試,以確保沒有批次間的差異。

內(nei) 毒素水平: < 1 EU/mg

理化表征: HPLC、pH、外觀

細胞培養(yang) 測試:在 Zeocin™ 敏感和 Zeocin™ 抗性哺乳動物細胞係中驗證效力

微量汙染物的非細胞毒性:在 Zeocin™ 抗性細胞中證實沒有長期影響

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內容

Zeocin™ 以無菌過濾藍色溶液的形式提供,濃度為(wei) 100 mg/ml,在 HEPES 緩衝(chong) 液中。

本產(chan) 品提供三種包裝尺寸:

  • ant-zn-1: 10 x 1 毫升(1 克)

  • ant-zn-5: 50 x 1 毫升(5 克)

  • ant-zn-5b: 1 x 50 毫升(5 克)

Zeocin™ 也以藍色粉末形式提供:

  • ant-zn-1p: 1 x 1 克

  • ant-zn-5p: 1 x 5 克

Zeocin™ 在室溫下運輸。

收到後應在 4°C 或 -20°C 下儲(chu) 存。

Zeocin™ 是一種有害化合物。有關(guan) 操作說明,請參閱安全數據表。

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細節

工作濃度

Zeocin™ 通常以 100 μg/ml 的濃度使用,是原液的 1000 倍稀釋液。但是,需要為(wei) 您的細胞確定最佳濃度。
下麵列出了在某些哺乳動物細胞示例中選擇的 Zeocin™ 的建議濃度:

細胞係

中等的

Zeocin™ 濃

參考

B16(小鼠黑色素細胞)

RPMI

20-250 微克/毫升

1-3

CHO(中國倉(cang) 鼠卵巢細胞)

DMEM

100-500 微克/毫升

1、4、5

COS(猴腎細胞)

DMEM

100-400 微克/毫升

6、7

HEK293(人胚胎腎細胞)DMEM100-400 微克/毫升8、9
HeLa(人類子宮細胞)DMEM50-100 微克/毫升10、11
J558L(小鼠黑色素細胞)RPMI400 微克/毫升12
MCF-7(人乳腺腺癌細胞)DMEM100-400 微克/毫升13、14
MEF(小鼠胚胎成纖維細胞)DMEM200-400 微克/毫升15、16
THP-1(人類單核細胞)RPMI200 微克/毫升17

參考:

1. Bouayadi K. 等,1997。 聚合酶 beta 的過度表達使哺乳動物細胞對 2',3' 脫氧胞苷和 3'-疊氮基-3'-脫氧胸苷敏感。癌症研究。57:110-116。
2 Hirose Y. 等人,2012 年。抑製 Stabilin-2 可提高循環透明質酸水平並防止腫瘤轉移。PNAS, 109: 4263 - 4268. 
3. Fan H. et al., 2012. 使用碳納米管的腦內(nei) CpG 免疫療法消除了小鼠皮下黑色素瘤的生長。臨(lin) 床癌症研究 18(20):5628-38。
4. Li F. 等人,1996 年。重組 P 選擇糖蛋白配體(ti) 1 的翻譯後修飾,這是與(yu) P 和 E 選擇結合所需的。J.生物。化學 271:3255-3264。
5. Ogura T. 等人,2004 年。B16 黑色素瘤細胞對 CD47 誘導的運動負調節的抗性,這是由於(yu) SHPS-1 的異常 N-糖基化所致。J 生物化學。279(14):13711-20。
6. Saxena A. 等,2002。H2,人類去唾液酸糖蛋白受體(ti) 的次要亞(ya) 基,在細胞內(nei) 運輸並形成同源寡聚體(ti) ,但不結合去唾液酸-口粘蛋白。J 生物化學。277(38):35297-304。
7. Kanamori A. 等人,2002. 使用支持所有三種選擇素在剪切流下介導的滾動的細胞公開了選擇素的不同硫酸化要求。L-選擇素更喜歡碳水化合物 6-硫酸化酪氨酸硫酸化,而 p-選擇素則不然。J 生物化學。277(36):32578-86。
8. Ahmed 等人,2013 年。TRIF 介導的 TLR3 和 TLR4 信號傳(chuan) 導受到 ADAM15 的負調控。J免疫學。190(5):2217-28。
9. Büllesbach EE。& Schwabe C.,2006。鬆弛素樣因子 (RLF) 與(yu) 富含亮氨酸重複 G 蛋白激活受體(ti) 的相互作用模式 8。J Biol Chem。281(36):26136-43。
10. Mesnil M. et al., 1996. 單純皰疹病毒胸苷激酶基因對癌細胞的旁觀者殺傷(shang) 是由連接蛋白介導的。PNAS 93(5):1831-5。
11. Maszczak-Seneczko D. 等人,2013 年。UDP-N-乙酰氨基葡萄糖轉運蛋白 (SLC35A3) 調節高度支化 N-聚糖和硫酸角質素的生物合成。J 生物化學。288(30):21850-60。
12. Cedeno-Laurent F. 等人,2010 年。開發用於(yu) 研究白細胞 galectin-1 配體(ti) 和免疫疾病調節作用的新生 galectin-1 嵌合分子。J免疫學。185(8):4659-72。
13. 金 HS。等人,2004 年。胰島素樣生長因子結合蛋白 3 通過 MCF-7 人乳腺癌細胞中的死亡受體(ti) 介導途徑誘導半胱天冬酶依賴性細胞凋亡。癌症研究。64(6):2229-37。
14. 列出 HJ。等人,2001 年。核酶靶向表明核受體(ti) 輔激活因子 AIB1 是人類 MCF-7 乳腺癌細胞雌激素依賴性生長的限速因子。J 生物化學。276(26):23763-8。
15. Waak J. 等,2009。介導蛋白質穩定性和 DJ-1 與(yu) 細胞凋亡信號調節激酶 1 的細胞保護相互作用的可氧化殘基。J Biol Chem。284(21):14245-57。
16. Maue A. 等人,2013 年。空腸彎曲杆菌的多糖膠囊調節宿主免疫反應。感染免疫。81(3):665-72

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常見問題

你們(men) 提供的 Zeocin™ 是鹽酸還是硫酸鹽?

我們(men) 提供鹽酸 Zeocin™。


Zeocin™ 是光敏的嗎?
不,Zeocin™ 不具有光敏性。


Zeocin™ pH 值敏感嗎?
Zeocin™ 在低和高 pH 值(<6 和 >8)或弱氧化劑存在下會(hui) 發生不可逆的變性。


什麽(me) 緩衝(chong) 液可用於(yu) 稀釋 Zeocin™ 以製備中間工作溶液?
應在無菌水中進一步稀釋,以創建中間工作溶液。


用於(yu) 重構 Zeocin™ 的 HEPES 緩衝(chong) 液的濃度是多少?
用於(yu) 重構 Zeocin™ 的 HEPES 緩衝(chong) 液濃度為(wei) 5 g/L。


Zeocin™ 的儲(chu) 存方法是什麽(me) ?
Zeocin™ 在室溫下運輸。收到後,應在 4°C 下短期儲(chu) 存或在 -20°C 下長期儲(chu) 存。
避免重複的凍融循環。
有效期在產(chan) 品標簽上注明。
對於(yu) Zeocin™ 粉末,一旦以 100 mg/ml 重懸,它可以在 4°C 下儲(chu) 存 12 個(ge) 月或在 -20°C 下儲(chu) 存 18 個(ge) 月。
對於(yu) Zeocin™ 溶液,一旦打開,它可以在 -20°C 下保持穩定 1 年,避免重複凍融循環,如果保持在無菌條件下,它可以在 4°C 下保存 3 個(ge) 月。


Zeocin™ 在哺乳動物細胞中的選擇濃度是多少?
Zeocin™ 在哺乳動物細胞係中的工作濃度在 50 - 400 μg/ml 之間變化,有少數報道使用較低(即 20 μg/ml)和較高(即 1000 μg/ml)濃度的案例。在初始實驗中,我們(men) 建議確定殺死宿主細胞係所需的最佳 Zeocin™ 濃度。有關(guan) 更多詳細信息,請參閱該產(chan) 品的技術數據表。


Zeocin™ 在大腸杆菌中的選擇濃度是多少?
在補充有 25 μg/ml Zeocin™ 的低鹽 LB 瓊脂中選擇 Zeocin 抗性轉化體(ti) 。
重要提示:不要使用含有 Tn5 轉座因子(即 MC1066)的大腸杆菌受體(ti) 菌株。Tn5 編碼一種博萊黴素抗性基因,可賦予 Zeocin™ 抗性。