Control Liposomes （PBS）控製脂質體(ti)

紅色代表截留的熒光（高濃度）。

脂質體(ti) 膜磷脂雙分子層組成的同心圓，

也包含熒光，但濃度較低（綠色）

參考：Van Rooijen, N. & Van Nieuwmegen, R. 1978. Fluorochrome

多層脂質體(ti) 的染色：染色技術. 53; 307-310

Clodronate Liposomes體內巨噬細胞清除試劑

名稱：Clodronate Liposomes 

中文名：體(ti) 內(nei) 巨噬細胞清除

產(chan) 品性狀：懸濁液 使用前請先搖一下

產(chan) 品性質：

1ml脂質體(ti) 體(ti) 懸液中所含的氯磷酸大約為(wei) 5mg。所用的磷酸鹽緩衝(chong) 液為(wei) 10 mM Na₂HPO₄，10 mM NaH₂PO₄，140 mM NaCl。

脂質體(ti) 體(ti) 內(nei) 注射：

隔日尾靜脈注射200μl clodronate liposome，根據實驗要求製定注射日程。通過免疫組化或流式檢測巨噬細胞去除效率。

尾靜脈注射方法：

（1）將小鼠放在倒扣的飯盒內(nei) ，從(cong) 孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈，2條動脈分別在尾部的背側(ce) 麵和腹側(ce) 麵，3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩(liang) 側(ce) 的靜脈；

（2）將紗布浸泡於(yu) 約70度的溫水中，拿出後包裹尾巴，以達到使尾部血管擴張及軟化表皮角質的目的；

（3）行尾部靜脈注射時，以左手拇指和食指前後摁住鼠尾，留出約2cm一段，使皮膚緊張，靜脈更為(wei) 充盈，右手持1ml針頭注射器，使針頭與(yu) 靜脈平行(小於(yu) 30°角)，從(cong) 尾巴的下1/4處進針，開始注入藥物時應緩慢，仔細觀察，如果無阻力，無白色皮丘出現，說明已刺入血管，可正式注入藥物。

（4）有的實驗需連日反複尾靜脈注射給藥，注射部位應盡可能從(cong) 尾端開始，按次序向尾根部移動，更換血管位置注射給藥。拔出針頭後，用棉球按住注射部位輕壓1-2min，止血。

FAQ:

Q:收到Clodronate liposomes後該如何操作？

A:收到氯磷酸脂質體(ti) 後，如果不能馬上使用，需要放置在4℃冰箱。禁止凍存！使用時作為(wei) 原液使用，不能進行稀釋。脂質體(ti) 很容易發生沉澱，建議使用之前輕輕混勻，另外4℃的氯磷酸脂質體(ti) 不能馬上使用，需要恢複到室溫才能進行注射。

Q: Clodronate liposomes能否用於(yu) 體(ti) 外巨噬細胞清除？

A:產(chan) 品可以用於(yu) 體(ti) 外巨噬細胞的清除，但是這種方法比較適合體(ti) 內(nei) 實驗。主要是由於(yu) 在體(ti) 外培養(yang) 過程中，從(cong) 死亡細胞釋放的氯磷酸或者是從(cong) 脂質體(ti) 中“滲漏"出來氯磷酸，會(hui) 一直存在於(yu) 培養(yang) 基中，但是在體(ti) 內(nei) ，氯磷酸的半衰期很短，很快就會(hui) 被腎髒清除。雖然遊離的氯磷酸不會(hui) 進入細胞也不會(hui) 進入脂質體(ti) ，但是一旦他們(men) 在培養(yang) 基中積累就會(hui) 慢慢地進入細胞中。

Q:在靜脈注射Clodronate liposomes後動物很快就死亡了，是什麽(me) 原因？

A:一方麵有可能是動物注射了不均一的脂質體(ti) 懸液。建議在使用之前輕輕搖晃混勻。脂質體(ti) 在體(ti) 外一段時間後會(hui) 發生沉降。如果在很長一段時間內(nei) 需要一次注射多隻動物，那麽(me) 脂質體(ti) 便會(hui) 在注射器中發生沉澱，形成不均一懸液，這樣一來，*隻注射的計量與(yu) zui後一隻注射的計量就會(hui) 發生明顯的變化。另外一方麵有可能是脂質體(ti) 剛從(cong) 冰箱取出後，沒有恢複到室溫。

Q:動物在注射Clodronate liposomes後幾天就死亡了？

A：這個(ge) 可能是受到細菌的汙染，體(ti) 內(nei) 清除巨噬細胞後會(hui) 增加例如病毒粒子，細菌或者酵母感染的幾率。

Q:靜脈注射Clodronate liposomes後大鼠脾髒/肝髒中的ED1+細胞並沒有*消失？

A：大鼠中成熟的巨噬細胞呈現ED1和ED2雙陽性，但是有一些沒有吞噬功能的或者吞噬作用小的前體(ti) 細胞也是ED1+，但是呈現ED2-。因此，所有ED2+的細胞都可以被*清除，但是ED1+的細胞卻隻能被部分清除，清除的比率取決(jue) 於(yu) 前體(ti) /成熟巨噬細胞的比例。

Q: Clodronate liposomes沒有達到期望的效果？

A：氯磷酸脂質體(ti) 都是大批量的生產(chan) ，每批次都會(hui) 對氯磷酸的濃度以及一些可能的汙染物進行檢測，確保無誤後才會(hui) 銷售給客戶。另外，脂質體(ti) 容易收到溫度的影響。正確的運輸和儲(chu) 存方式是4~8℃，懸液既不能被凍存，也不能被加熱超過30℃。自收到貨物起，需要在3個(ge) 月內(nei) 使用完，不然有可能會(hui) 影響使用的效果。

Q:在靜脈注射時，能不能增加注射的體(ti) 積？

A：靜脈注射時需要依據動物的體(ti) 重，不能超過0.1ml/10mg，但是進行腹腔注射可以適當的增加注射的體(ti) 積。皮下注射需要根據注射位點的容量進行決(jue) 定。

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