biosesb BSB 3666說明書(shu)
TintoFast Cytokeratin 5 & 6 Antibody Immunohistochemistry on a Frozen Acetone-Fixed Melanoma Tissue
有可能的使用 | 用於莫氏體外診斷 | |||||||||||||||||||
總結與說明 | 細胞角蛋白 5 (58 kDa) 是一種高分子量、基本類型的細胞角蛋白,在複層上皮細胞以及移行上皮細胞、複雜上皮細胞、間皮細胞和間皮瘤的基底、中間和表層細胞層中表達。細胞角蛋白 6 (56 kD) 也是一種高分子量、堿性類型的細胞角蛋白,由增殖的鱗狀上皮表達,通常與(yu) 細胞角蛋白 16 配對。 TintoFast 細胞角蛋白 5 和 6 在幾乎 100% 的惡性間皮瘤中呈陽性,在肺腺癌中很少見。TintoFast Cytokeratin 5 和 6 在未分化的大細胞癌和鱗狀細胞癌中呈陽性。不到 10% 的乳腺癌、結腸癌和前列腺癌對該標誌物呈陽性染色。CK 5 和 6 也已成功用作前列腺中的肌上皮細胞標記物來確定惡性腫瘤。 | |||||||||||||||||||
抗體類型 | 小鼠單克隆 | 克隆 | D5/16B4 | |||||||||||||||||
同型 | IgG1 | 反應性 | 石蠟,冷凍 | |||||||||||||||||
本土化 | 細胞質 | 控製 | SCC/密件抄送 | |||||||||||||||||
介紹 | Anti-CK 5 & 6 是一種小鼠單克隆抗體混合物,來源於細胞培養上清液,經過濃縮、透析、過濾滅菌和稀釋在 pH 7.5 的緩衝液中,其中含有 BSA 和疊氮化納作為防腐劑。 | |||||||||||||||||||
可用性 |
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莫氏冷凍組織的標本製備
將標本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nei) 。
在 4-5 µm 處切割切片並安裝在帶正電的載玻片上,例如 Bio SB Hydrophilic Plus 載玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 蓋間隙載玻片 (BSB 7006) 的下三分之一處。
在室溫下風幹載玻片 2 分鍾,然後在培養(yang) 箱或幹浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鍾。
在室溫下用 100% 丙酮或 10% NBF 固定 2 分鍾。如果使用 Bio SB Mohs ImmunoDigestor,使用 10% NBF 10% 會(hui) 產(chan) 生更好的形態。
對於(yu) 固定在丙酮中的載玻片,讓它風幹。對於(yu) NBF 中的幻燈片,用蒸餾水衝(chong) 洗並風幹。
莫氏冷凍組織的預處理
將載玻片轉移到 Immuno Washer、TBST 或 PBST 緩衝(chong) 液中。
使用 Mohs ImmunoDigestor 進行 PIER、蛋白水解消化 1 分鍾。在室溫下。
用 Immuno Washer、TBST 或 PBST 緩衝(chong) 液衝(chong) 洗。
IHC 檢測程序
PIER 後,將載玻片轉移至 Immuno 清洗機,靜置 1-2 分鍾。
對於(yu) 手動染色,在環境溫度下進行抗體(ti) 孵育。對於(yu) 自動染色方法,請根據儀(yi) 器製造商的說明進行抗體(ti) 孵育。
用 Immuno 洗滌器或去離子水清洗載玻片。
繼續 IHC 檢測協議。用 Immuno 洗滌液在每個(ge) 步驟之間清洗載玻片。
縮寫(xie) Mohs PolyDetector DAB HRP Brown of HRP Green 免疫組化方案
用過氧化物酶阻滯劑孵育載玻片 30 秒
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
與(yu) 一抗孵育 4 分鍾
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
用 HRP 標簽孵育 3 分鍾
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
準備
DAB Brown(在 1ml DAB 緩衝(chong) 液中加入 1 滴 DAB Chromogen;充分混合)
或 HRP Green(在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen;充分混合)
用 DAB 或 HRP Green 孵育 2 分鍾
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
用蘇木精或核固紅複染 30 秒
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
使用 AquaMounter 安裝或使用 Fast ChromoProtector 使組織脫水,然後使用 PermaMounter 安裝
步 | Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 協議 |
過氧化物酶阻滯劑 | 30秒 |
一抗 | 4分鍾。 |
第一步檢測(HRP 標簽) | 3 分鍾。 |
底物色原 | 1-2 分鍾。 |
複染/蓋玻片 | 變化 |
此協議也可用於(yu) 使用檸檬酸鹽或 EDTA 檢索的 FFPE 組織。
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