TintoFast Adipophilin Antibody Immunohistochemistry on a Frozen Acetone-fixed Squamous Cell Carcinoma Tissue
| 有可能的使用 | 用於莫氏體外診斷 | |||||||||||||||||||||||||||
| 總結與說明 | 脂肪分化相關(guan) 蛋白，也稱為(wei) Perilipin 2 (PLIN2)、ADRP 或 Adipophilin，是一種在人體(ti) 中由 ADFP 基因編碼的蛋白質。親(qin) 脂素與(yu) 小球表麵膜材料有關(guan) 。這種蛋白質是球表麵的主要成分。mRNA水平的增加是脂肪細胞分化的最早跡象之一。Adipophilin 存在於(yu) 多種培養(yang) 的細胞係中，包括成纖維細胞、內(nei) 皮細胞和上皮細胞。然而，在組織中，Adipophilin 的表達僅(jin) 限於(yu) 某些細胞類型，例如泌乳乳腺上皮細胞、腎上腺皮質細胞、男性生殖係統的支持細胞和間質細胞，以及酒精性肝硬化中的脂肪變性或脂肪變性肝細胞。 Adipophilin 抗體(ti) 在各種皮脂腺病變和其他皮膚腫瘤中表達，細胞組織學清晰，可模擬皮脂腺分化。在評估具有透明細胞組織學的皮膚病變時，Adipophilin 在免疫組織化學小組中可能很有價(jia) 值，因為(wei) 它可以識別皮脂腺和黃色瘤病變中的細胞質內(nei) 脂質囊泡。在眼周病變中，當考慮皮脂腺癌時，它有助於(yu) 排除基底細胞癌和鱗狀細胞癌。Adipophilin 表達對於(yu) 包括轉移性腎細胞癌在內(nei) 的鑒別診斷沒有那麽(me) 有用，轉移性腎細胞癌是一種罕見但重要的診斷鑒別方法。觀察親(qin) 脂素反應性模式很重要，因為(wei) 膜泡染色提示細胞內(nei) 脂質，而顆粒細胞質反應性則不然。Adipophilin 抗體(ti) 適用於(yu) 免疫染色，有助於(yu) 鑒定皮脂腺病變中所見的胞漿內(nei) 脂質。在具有挑戰性的病例（例如小眼周活檢標本）中，它特別有助於(yu) 識別低分化皮脂腺癌中的胞漿內(nei) 脂質囊泡。 | |||||||||||||||||||||||||||
| 抗體類型 | 小鼠單克隆 | 克隆 | BSB-91 | |||||||||||||||||||||||||
| 同型 | IgG1 | 反應性 | 石蠟，冷凍 | |||||||||||||||||||||||||
| 本土化 | 細胞質的，膜的 | 控製 | 腎上腺、鱗狀細胞癌、移行細胞癌、皮脂腺腫瘤 | |||||||||||||||||||||||||
| 介紹 | TintoFast Adipophilin 是一種小鼠單克隆抗體，來源於細胞培養上清液，經過濃縮、透析、過濾滅菌並在 pH 7.5 的緩衝液中稀釋，其中含有 BSA 和疊氮化納作為防腐劑。 | |||||||||||||||||||||||||||
| 可用性 |
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莫氏冷凍組織的標本製備
將標本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nei) 。
在 4-5 µm 處切割切片並安裝在帶正電的載玻片上，例如 Bio SB Hydrophilic Plus 載玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 蓋間隙載玻片 (BSB 7006) 的下三分之一處。
在室溫下風幹載玻片 2 分鍾，然後在培養(yang) 箱或幹浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鍾。
在室溫下用丙酮固定 2 分鍾，然後讓載玻片風幹。
莫氏冷凍組織的預處理
將 TintoDetector 培養(yang) 箱預熱至 110 °C。
將 TintoDetector Cap Gap 載玻片 (BSB 7006) 麵對麵放置，然後將它們(men) 插入 TintoDetector 載玻片支架 (BSB 7003)。
將載玻片浸入含 EDTA 的 Immuno Retriever 中，通過毛細作用提取足夠的溶液以覆蓋組織。
在預熱的 TintoDetector 培養(yang) 箱中加熱載玻片 3 分鍾。
將載玻片轉移至室溫並冷卻 1 分鍾。
莫氏 IHC 檢測
HIER 後，將載玻片轉移到 Immuno 清洗機，靜置 1-2 分鍾。
對於(yu) 手動染色，在環境溫度下進行抗體(ti) 孵育。對於(yu) 自動染色方法，請根據儀(yi) 器製造商的說明進行抗體(ti) 孵育。
用 Immuno 洗滌器或去離子水清洗載玻片。
繼續 IHC 檢測協議。用 Immuno 洗滌液在每個(ge) 步驟之間清洗載玻片。
HRP Green 免疫組化方案的縮寫(xie) Mohs PolyDetector Plus DAB HRP Brown
與(yu) 一抗孵育 5 分鍾
用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗
用 M/R 鏈接孵育 4 分鍾
用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗
HRP 標簽 4 分鍾。
用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗
準備
DAB Brown（在 1ml DAB 緩衝(chong) 液中加入 1 滴 DAB Chromogen；充分混合）
或 HRP Green（在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen；充分混合）
用 DAB 或 HRP Green 孵育 1-2 分鍾
用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗
用蘇木精或核固紅複染 30 秒
用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗
使用 AquaMounter 安裝或使用 Fast ChromoProtector 使組織脫水，然後使用 PermaMounter 安裝
| 步 | Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 20 分鍾協議 |
| 希爾 | 3 分鍾。 |
| 一抗 | 5分鍾。 |
| 第一步檢測 | 4分鍾。 |
| 第二步檢測 | 4分鍾。 |
| 底物色原 | 1-2 分鍾。 |
| 複染/蓋玻片 | 變化 |
此協議也可用於(yu) 使用檸檬酸鹽或 EDTA 檢索的 FFPE 組織。
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