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jembio末端脫氧核苷酸轉移酶 (TdT說明書)

 更新時間:2022-05-19 點擊量:1156




jembio末端脫氧核苷酸轉移酶 (TdT說明書(shu) )                jembio末端脫氧核苷酸轉移酶 (TdT) 是一種不依賴模板的聚合酶,它催化將脫氧核糖核苷酸單磷酸從(cong) 三磷酸鹽添加到 的 3' 羥基末端。 描述:• 優(you) 選的底物是:單鏈、帶有3'-羥基末端的雙鏈和寡脫氧核苷酸引物(1)。• 用於(yu) 用核糖核苷酸對 3'-末端進行特異性標記 (2)。• 用[a-32P] 3'-脫氧核苷(3) 標記 片段的3'-末端。• 將脫氧核糖核苷酸的均聚物尾部添加到載體(ti) 或 c (4,5)。單位定義(yi) :一個(ge) 單位定義(yi) 為(wei) 在 37°C 下 1 小時內(nei) 將 1 nmol dAMP 從(cong) dATP 轉移到寡脫氧核糖核苷酸引發劑 p(dA)50 的 3'-OH 末端所需的酶量。 儲(chu) 存條件:儲(chu) 存於(yu) -20°C。 儲(chu) 存緩衝(chong) 液:100 mM Tris-HCl(22°C 時 pH 7.2)、1 mM 二硫蘇糖醇和 50% (v/v) 甘油。 檢測條件:40 mM 二甲胂酸鉀 (pH 7.2)、8 mM MgCl2、8.3 mM 磷酸鉀、0.33 mM ZnSO4、10 mg/ml 牛血清白蛋白、0.01 mM 寡脫氧核苷酸 p(dA)50 和 1 mM [a-³²P]dATP在 37oC 下 1 小時內(nei) ,反應體(ti) 積為(wei) 60 µl。 質量控製:所有製劑都經過核酸內(nei) 切酶、核酸外切酶和非特異性 RNase 以及單鏈和雙鏈 DNase 活性測試。