cellabs KR2說明書(shu)
CRYPTO/GIARDIA CEL產(chan) 品代碼:KR2
試驗的預期用途和原理
隱孢子蟲/賈第鞭毛蟲細胞IF試驗是一種體(ti) 外直接免疫熒光試驗,用於(yu) 同時檢測糞便和環境樣本中的隱孢子蟲卵囊和賈第鞭蟲囊腫。熒光素標記的小鼠單克隆抗體(ti) 試劑特異性結合樣本中的隱孢子蟲卵囊和/或賈第鞭毛蟲囊腫。生物體(ti) 呈現典型形態的亮綠色熒光。
材料已準備就緒。儲(chu) 存在2-8攝氏度。每個(ge) 套件組件和盒子上都清楚地標明了有效期。一旦打開,到期日期不變。
需要但未提供的材料
具有6-8mm直徑孔的顯微鏡載玻片;用於(yu) 輸送25µL的精密移液管;丙酮用於(yu) 樣品固定;濕室;洗浴;用於(yu) 洗滌步驟的磷酸鹽緩衝(chong) 鹽水(PBS);蓋滑動;無熒光浸漬油;熒光顯微鏡,帶FITC過濾係統(最大激發波長490nm,平均發射波長530nm)和x200-x1000放大倍數。
注意事項
僅(jin) 供體(ti) 外診斷使用。請勿在標簽上顯示的有效期後使用。如果保護性包裝損壞,請聯係當地經銷商並要求更換。不要混合不同套件的成分。Crypto/Giardia Cel試劑已優(you) 化,可與(yu) Cellabs陽性對照載玻片和安裝液一起使用。試驗試劑中所含的埃文斯藍染料可能是致癌物,因此應避免與(yu) 皮膚接觸。處理患者標本和陽性對照玻片時,應將其視為(wei) 具有潛在感染性。從(cong) 水中檢測隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲取決(jue) 於(yu) 從(cong) 大量水(500-1000L)中有效過濾和回收。每次測試運行時必須運行正向控製幻燈片。更多信息,請參閱材料安全數據表(MSDS)。
試樣製備
可以使用新鮮或保存在10%福爾馬林或SAF中的糞便樣本(未測試用其他固定劑處理的樣本)。處理新鮮糞便樣本的程序如下所述。如果糞便樣本未立即處理,可將其儲(chu) 存在2-8℃下
24-48小時。糞便可在處理前使用濃縮試劑盒進行濃縮。它們(men) 也可以用福爾馬林醚濃縮
沉澱法。
準備大約1/10-1/50的糞便稀釋液。用0.1%疊氮化納在PBS中稀釋50µL或5mm直徑的糞便,並*混合至
使用塗抹棒分散樣本,讓大便顆粒沉澱。
幻燈片的準備
1.將20µL糞便或濃縮樣本從(cong) 水中放在顯微鏡載玻片上。
2、讓試樣*風幹。
3、將載玻片在丙酮中固定5分鍾,讓其風幹。
使用說明
1.向固定樣本和ab中添加25µL RR2,覆蓋微孔區域。
2、將載玻片在37℃的潮濕室內(nei) 培養(yang) 30分鍾。不要讓載玻片幹燥,因為(wei) 這可能會(hui) 導致非特異性結合。
3、在PBS浴中輕輕衝(chong) 洗一分鍾。
4、排幹載玻片,用紙巾去除孔周圍多餘(yu) 的水分。
5、在載玻片上滴一滴RMG。將蓋玻片放在液滴頂部,並去除氣泡。
6.使用熒光顯微鏡掃描整個(ge) 樣本,最初放大倍數為(wei) X200,然後放大倍數為(wei) X400和X1000,以進行確認。立即閱讀或在2-8攝氏度的黑暗中儲(chu) 存24小時。
結果和診斷的閱讀和解釋
隱孢子蟲卵囊大小為(wei) 2-6µm,呈圓形或橢圓形,有亮綠色熒光。表麵可見褶皺或縫線。
這種縫合線在環境樣本中不太明顯。賈第蟲囊腫大小為(wei) 8.12µm,呈橢圓形,有亮綠色熒光。如果存在一個(ge) 或多個(ge) 卵囊或囊腫,則該試驗可能被視為(wei) 陽性。如果在同一樣本中同時存在這些生物體(ti) ,則可以通過其大小和形狀的差異來加以區分。這兩(liang) 種生物都是在紅棕色複染物質的背景下觀察到的。
應與(yu) 陽性對照玻片進行比較,以確定生物體(ti) 的外觀。陰性標本應具有含有碎屑的糞便物質跡象,如未消化的食物顆粒、細胞(反染紅棕色),以及可能的其他生物體(ti) ,如細菌和原生動物,並且不應顯示任何具有特征綠色熒光和形態的生物體(ti) 。某些情況下可能會(hui) 出現非特異性熒光
標本,但這可能在形態學上與(yu) 隱孢子蟲卵囊和賈第鞭毛蟲囊腫有所區別。藻類可能存在於(yu)
環境標本和這些熒光紅橙色。
廢物處理
將任何未使用的組件作為(wei) 生物危險廢物處理。如果測試試劑已在水槽中處理,請確保用大量水衝(chong) 洗(因為(wei) 其包含的疊氮化納可能與(yu) 銅/鉛管道係統發生反應)。有關(guan) 更多信息,請參閱
MSDS。
隱/賈第蟲細胞的敏感性、特異性和其他數據
請參閱插入末尾的匯總表。加密/賈第蟲細胞的所有數據都可以在產(chan) 品信息表中獲得。請谘詢當地經銷商或聯係Cellabs。
賠償(chang) 通知
對推薦程序所做的修改或更改可能會(hui) 影響聲明或暗示的權利要求。陽性或陰性結果並不排除其他潛在病原體(ti) 的存在。Cellabs及其代理人和經銷商在這種情況下不承擔損害賠償(chang) 責任。
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