Mohs IHC 程序

莫氏冷凍組織的標本製備

1. 將標本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nei) 。

2. 在 4-5 µm 處切割切片並安裝在帶正電的載玻片上，例如 Bio SB Hydrophilic Plus Slides (BSB 7028) 或 TintoDetector Cap Gap Plus (BSB 7006)。

3. 在室溫下風幹載玻片 2 分鍾，然後在培養(yang) 箱或幹浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鍾。

4. 在 100% 丙酮中固定並風幹或在室溫下用 10% NBF 固定 2 分鍾，然後用蒸餾水衝(chong) 洗並風幹。

5. 冷凍組織預處理取決(jue) 於(yu) 感興(xing) 趣的目標。請參閱產(chan) 品說明書(shu) 中的一抗以確定適當的預處理方案。

莫氏冷凍組織的組織預處理程序

1. 
   

1. 使用 Bio SB Immuno Retriever with Citrate (BSB 0020-BSB 0023)、Immuno Retriever with EDTA (BSB 0030-BSB 0033) 或 Mohs ImmunoDigestor (BSB 0324-0326) 對組織進行表位修複。建議用戶選擇使用 110°C 壓力鍋 (BSB TintoRetriever Pressure Cooker) 的 5 分鍾熱誘導表位修複 (HIER) 方法，或 1 分鍾蛋白水解誘導表位修複 (PIER) 方法（用於(yu) 細胞角蛋白使用 10% NBF 固定組織）。10% NBF 固定組織的形態學較好，尤其是在使用蛋白水解誘導表位修複方法時，然而，在 100% 丙酮固定組織上可能更容易檢測到抗原。

2. 可以使用三種 HIER 方法中的任何一種：

一個(ge) 。TintoRetriever 壓力鍋或同等產(chan) 品

將組織/載玻片放入裝有含有檸檬酸鹽或 EDTA 或 TintoDeparaffinator 檸檬酸鹽或 EDTA 的 Immuno Retriever 的染色盤或 coplin 罐中，然後放在高壓鍋的三腳架上。在壓力鍋中加入 1-2 英寸的蒸餾水，然後將熱量調高（110-121°C）。孵育 15 分鍾。釋放蒸汽，打開並立即將載玻片轉移至室溫。

灣。TintoRetriever PT 模塊或水浴法

在 95°-99°C 下將組織/載玻片放入預熱的染色皿或裝有 Immuno Retriever with Citrate or EDTA 或 TintoDeparaffinator Citrate or EDTA 的染色皿中。孵育 30-60 分鍾。立即打開並將載玻片轉移至室溫。

C。傳(chuan) 統蒸鍋法

將組織/載玻片放入預熱的染色盤或裝有檸檬酸鹽或 EDTA 或 Tintodeparaffinator 檸檬酸鹽或 EDTA 的 Immuno Retriever 的染色皿或 coplin 罐中，蓋上蓋子並蒸 30-60 分鍾。熱處理後，將載玻片轉移到含有檸檬酸鹽或 EDTA 或 Tintodeparaffinator Citrate 或 EDTA 的 Immuno Retriever 中至室溫並靜置 15-20 分鍾。

3. 對於(yu) PIER，在室溫下使用 Mohs ImmunoDigestor (BSB 0324-0326) 1 分鍾，然後清洗。

IHC 檢測程序

1. 在 HIER 或 PIER 之後，將載玻片轉移到 Immuno 清洗機並靜置 1-2 分鍾。

2. 對於(yu) 手動染色，在環境溫度下進行抗體(ti) 孵育。對於(yu) 自動染色方法，請根據儀(yi) 器製造商的說明進行抗體(ti) 孵育。

3. 用 Immuno 洗滌器或去離子水清洗載玻片。

4. 繼續 Mohs IHC 檢測方案。用 Immuno 洗滌液在每個(ge) 步驟之間清洗載玻片。

縮寫(xie) Mohs 免疫組化方案