Elastase - Manual

曆史

Eijkman被認為(wei) 是第一個(ge) 研究彈性蛋白酶作為(wei) 細菌產(chan) 物的人（Eijkman 1904）。然而，直到1949年Baló和Banga發表，它才被證明與(yu) 胰腺的其他蛋白水解成分（如胰蛋白酶和糜蛋白酶）不同。

1968年，肖頓和哈特利是第一個(ge) 獲得結晶豬彈性蛋白酶的人。在1960年代末和1970年代初，研究了彈性蛋白酶在肺氣腫，動脈粥樣硬化和急性出血性胰腺炎中的參與(yu) （Janoff和Sherer 1968，Janoff和Basch 1971，Talamo等人1971，Kaplan等人1973年和Bieth等人1974）。1974年，Ardelt發現了第二種彈性分解蛋白酶，將其命名為(wei) 胰腺“彈性蛋白酶II"和原始的“彈性蛋白酶I"。

在20世紀80年代，研究了彈性蛋白酶的催化性質（Ascenzi等人，1983年），並鑒定了抑製劑（Largman等人，1980年，Lestienne等人，1981年，凱特納和申維1984年，Poncz等人1984年，帝國和阿貝爾斯1986年）。1990年代對彈性蛋白酶I和II遺傳(chuan) 信息進行了研究（Ornitz等人，1985年，史蒂文森等人1986年，斯威夫特等人1984年，塔尼等人1987年和蓋斯汀等人1997年）。

彈性蛋白酶最近已用於(yu) 研究細胞外基質分解中的機械力和酶活性（Jesudason等人，2010）。它還研究了它在人工器官發育中的應用（Tedder等人，2010），並被用作研究絲(si) 氨酸蛋白酶催化活性的模型（Tamada等人，2009）。

概述

國際單位： 3.4.21.36

豬胰彈性蛋白酶的分子量為(wei) 25.9 kDa，pH值為(wei) 8.5。雖然彈性蛋白酶將水解各種蛋白質底物，但它在蛋白酶中的特別之處在於(yu) 其水解天然彈性蛋白的能力，彈性蛋白酶是一種不受胰蛋白酶，糜蛋白酶或胃蛋白酶攻擊的底物。大豆胰蛋白酶抑製劑和激肽釋放酶抑製劑抑製蛋白水解物，但不抑製彈性水解活性。彈性蛋白酶是使用改編自範斯坦等人生物化學的方法測定的。生物物理學。Res. Comm.， 50， 1020 （1973） 和使用 Bieth 等人的更可溶性底物， 生物化學醫學， 11， 350 （1974）.

穩定性/儲(chu) 存性：彈性蛋白酶在pH≤3.5時不穩定。當作為(wei) 幹粉儲(chu) 存時，酶在2-8°C下穩定6-12個(ge) 月。 彈性蛋白酶產(chan) 品代碼：ES和ESL在中性pH和濃度大於(yu) 0.25%時溶解度較差。在稀釋到反應混合物或介質中之前，在KCl或堿性緩衝(chong) 液中製備初級溶液是有幫助的，以補償(chang) 離子強度或pH值的變化。在pH 4.0-10.4下穩定。

技術說明：1個(ge) SucAla3NA單位大約相當於(yu) 6個(ge) 彈性蛋白消化單位。水性液體(ti) 懸浮液應無菌處理，以避免細菌汙染。由於(yu) 水懸浮液（代碼：ES）的粘性，應衝(chong) 洗小瓶以回收內(nei) 容物。

特異性

豬彈性蛋白酶I對Ala-Ala和Ala-Gly鍵具有特異性，而彈性蛋白酶II對P1位置的中到大型疏水性氨基酸的底物具有廣泛的特異性（Gertler等人，1977年，Del Mar等人，1980年和Gestin等人，1997年）。豬彈性蛋白酶是有效的彈性蛋白酶，其速率比人類白細胞彈性蛋白酶高20倍（Bieth 1978，Bieth 1986和Largman 1983）。

水解分幾個(ge) 步驟發生。彈性蛋白酶與(yu) 其底物之間形成吸附複合物，隨後形成親(qin) 核攻擊（S214）以形成酰基輔酶中間體(ti) ，並釋放出第一產(chan) 物（底物的C端）。中間體(ti) 在脫酰化步驟中水解，再生活性酶並釋放第二種產(chan) 物（Bieth 1986）。

組成

催化三元組由三個(ge) 氫鍵氨基酸殘基（H71，D119和S214）形成。多肽鏈由兩(liang) 個(ge) 反平行的β-桶結構域組成，它們(men) 形成含有催化三元組的裂縫和一小部分α-螺旋（Bieth 2004）。

分子特性

豬胰彈性蛋白酶由240個(ge) 氨基酸的單肽鏈組成，並含有4個(ge) 二硫橋（Sawyer等人，1973）。它與(yu) 來自其他物種的胰腺彈性蛋白酶具有高度的序列同一性，例如與(yu) 它共享86%身份的大鼠（MacDonald等人，1982）。彈性蛋白酶I和II基因共享序列相似性，特別是在5'近端側(ce) 翼區域，其中包括TATA盒和推定的組織特異性增強子序列（Ornitz等人1985年，史蒂文森等人1986年，Swift等人1984年，塔尼等人1987年和Gestin等人1997年）。

應用

組織解離：由於(yu) 彈性蛋白在結締組織的彈性纖維中含量高，因此彈性蛋白酶經常用於(yu) 解離含有廣泛細胞間纖維網絡的組織。為(wei) 此，它通常與(yu) 其他酶一起使用，例如膠原酶，胰蛋白酶和糜蛋白酶。

膜蛋白增溶

蛋白質序列研究

產(chan) 品詳情

名稱    Elastase - Manual

編號    LS002292

品牌    Worthington