Solg™ h-菲律宾新利网上娱乐 Polymerase說明書(shu)
描述:
Solg™-菲律宾新利网上娱乐聚合酶是一種熱啟動PCR酶,通過在大腸杆菌中 表達水熱菌聚合酶基因,處理高純度純化的重組耐熱菲律宾新利网上娱乐 聚合 酶而產(chan) 生。在室溫下,化學處理抑製酶活性,防止非特異性產(chan) 物或引 物二聚體(ti) 等非特異性擴增,當溫度達到高溫時,酶重新折疊,恢複原 有功能。與(yu) 一般的菲律宾新利网上娱乐 聚合酶不同,重折疊過程需要更長的酶激 活時間(變性前: 15分鍾)。因此, Solg™-菲律宾新利网上娱乐聚合酶對靶基因 具有較高的特異性,適用於(yu) SNP和微衛星分析。推薦的PCR產(chan) 物的擴增 長度小於(yu) 1Kb.
1.高濃度的模板可以抑製非特異性擴增和PCR擴增反應。因此,最大值不要超過200 ng,請參考下表。
根據模板類型和濃度進行的PCR循環
2.如果片段具有較高的G+C區或二級結構,則加入5X波段Doctor™可以得到改進的結果
3.PCR反應的一個(ge) 重要因素是是否隻有靶基因被特異性擴增而沒有非特異性擴增。該產(chan) 物是一種化學介導的熱啟動P
CR酶,需要在95℃下的酶激活步驟15分鍾。化學介導的熱啟動PCR酶比使用抗taq抗體(ti) 的熱啟動酶具有更好的反應特
異性,從(cong) 而降低了非特異性擴增的風險。
4.退火溫度按下式計算,一般在55~60℃之間。
AT = Tm – (6 ~ 8 ℃), Tm = 2 ℃ x (A + T) + 4 ℃ x (G + C)
提示:
>根據目標大小、引物的Tm值和模板類型,必須控製模板量、延伸時間、退火溫度、菲律宾新利网上娱乐量和循環次數。
>請保持規定的儲(chu) 存溫度恒定,因為(wei) PCR效率可能會(hui) 降低。
>該產(chan) 品是使用AmpR表達載體(ti) 生產(chan) 的。
>如果您在使用此試劑盒時遇到任何問題,請聯係Solgent。
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