PCR法支原體(ti) 檢測試劑盒說明書(shu)
上海起發生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬於(yu) 菲律宾新利官网开户(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發生物自有品牌,打造優(you) 質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產(chan) 業(ye) 鏈中的國產(chan) 生物試劑品質關(guan) 。未來讓每一個(ge) 和我們(men) 一樣擁有民族情懷的企業(ye) ,共同創世界優(you) 秀的中國生物製造企業(ye) ,圓夢中國。
產(chan) 品詳情
貨號 | 規格 | 價(jia) 格 |
78EA10015-50T | 50T | 240.00 |
產(chan) 品描述
支原體(ti) 汙染會(hui) 對細胞各個(ge) 方麵都造成不良影響,已經成為(wei) 細胞培養(yang) 中高度重視的問題,因此,定期進行支原體(ti) 汙染檢測是十分必要的。本支原體(ti) 檢測試劑盒是采用PCR方法,特異性的檢測各種培養(yang) 細胞生物材料(如細胞培養(yang) 物、實驗動物分泌物、動物血清等)中支原體(ti) 的汙染。試劑盒使用的混合引物是針對支原體(ti) 16s rRNA序列的保守區域設計的特異性引物,可直接使用細胞培養(yang) 液作為(wei) PCR模板,特異性擴增支原體(ti) ,搭配配套的Mycoplasma PCR Mix(2×)一小時內(nei) 即可完成,本試劑盒檢測靈敏度高,可檢測低至20個(ge) 拷貝的支原體(ti) 。
產(chan) 品組分
組成 | 78EA10015-50T |
Mycoplasma PCR Mix(2×) | 1 mL |
Mycoplasma Primer Mix | 100 μL |
Positive Control | 50 μL |
Mycoplasma Free Water | 1 mL |
使用方法
使用方法
1. 樣品準備:取適量待檢細胞培養(yang) 上清於(yu) 潔淨的PCR管中,利用PCR儀(yi) 95℃熱處理5 min後作為(wei) 模板。血清樣本可利用無支原體(ti) 去離子水水稀釋後,取適量樣本於(yu) 潔淨的PCR管中,利用PCR儀(yi) 95℃熱處理5 min後作為(wei) 模板;
2. PCR體(ti) 係配製:每次實驗需設置陰性對照(將1 μL待檢樣品換成等量的無支原體(ti) 去離子水)與(yu) 陽性對照(在1 μL待檢樣品中加入0.5 μL Positive Control後一起作為(wei) Template),實驗時戴一次性口罩與(yu) 手套,謹慎操作,防止操作不當引入外源支原體(ti) 汙染;
3. PCR程序設置:
步驟 | 溫度 | 時間 | 周期 |
Initial Denaturation | 98℃ | 2 min | 1 |
Denaturation | 98℃ | 20 s | 30 |
Annealing | 56℃ | 25 s | |
Extension | 72℃ | 10 s | |
Final extension | 72℃ | 5 min | 1 |
Hold | 4-16℃ | Forever |
4. 凝膠電泳:取10 μL PCR產(chan) 物,使用1%瓊脂糖凝膠進行電泳檢測;
5. 結果分析:每次實驗通過與(yu) 陰性對照、陽性對照檢測結果比較確認樣品支原體(ti) 汙染情況,陽性條帶大小500 bp左右。如陰性對照檢測結果中有條帶很有可能是PCR體(ti) 係中出現汙染,建議重新實驗確認結果。如有必要,也可對PCR產(chan) 物進行常規測序,以確定具體(ti) 的支原體(ti) 種屬。
注意事項
1. 本試劑盒可以檢測M.orale,M.arginini,M.bovis,M.fermentans,M.gallisepticum,M.hominis,M.pirum,Ureaplasma spp,M.hyorhinis,M.pneumoniae,A.laidlawii等至少11種以上支原體(ti) 汙染。
2. 所有試劑在使用前於(yu) 冰上充分解凍、混勻,使用完畢後於(yu) -20℃保存。
3. 每次實驗必須設置陰性對照、陽性對照,實驗組建議設置樣品模板梯度。
4. 操作時必須佩戴口罩,嚴(yan) 格按照PCR操作標準,防止引入外源汙染影響實驗結果。
5. 為(wei) 了確保細胞實驗的可靠性及穩定性,建議定期進行支原體(ti) 汙染檢測。
6. 為(wei) 了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。
運輸及保存方法
冰袋(wet ice)運輸;-20℃保存,有效期12個(ge) 月。
產(chan) 品用途
《PCR法支原體(ti) 檢測試劑盒》(PCR Mycoplasma Detection Kit)可用於(yu) 檢測一切可能含支原體(ti) 的樣品,比如:(1)體(ti) 外細胞培養(yang) 的上清;(2)血清;(3)各種體(ti) 液,如唾液、尿液、鼻腔分泌物等;(4)別的液體(ti) 樣品。本產(chan) 品僅(jin) 供研究使用。
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