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重組豬源RNase抑製劑說明書

 更新時間:2023-04-21 點擊量:466

重組豬源RNase抑製劑說明書(shu)

上海起發生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬於(yu) 菲律宾新利官网开户(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發生物自有品牌,打造優(you) 質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產(chan) 業(ye) 鏈中的國產(chan) 生物試劑品質關(guan) 。未來讓每一個(ge) 和我們(men) 一樣擁有民族情懷的企業(ye) ,共同創世界優(you) 秀的中國生物製造企業(ye) ,圓夢中國。

產(chan) 品詳情

貨號

規格

價(jia) 格

78BAB10003-100uL

100uL(4KU)

¥200.00

78BAB10003-1ml

1ml (40KU)

¥1600.00

78BAB10003-50ml

50ml (2MU)

¥50000.00

 產(chan) 品描述

本產(chan) 品是以大腸杆菌中進行表達,並通過親(qin) 和層析純化的重組豬源RNase抑製劑,該蛋白特征與(yu) 豬肝和人胎盤來源此類酶相似,可替代天然提取 RNase Inhibitor的應用。本產(chan) 品與(yu) RNase A形成1: 1複合體(ti) ,抑製RNase活性。該反應是可逆的,通過尿素及巰基類試劑能夠解離複合體(ti) ,使RNase複性而抑製劑不可逆失活。本產(chan) 品與(yu) 其它競爭(zheng) 性抑製劑(核酸類,無機磷酸類)不同,可以很容易地通過苯酚處理將其從(cong) 反應體(ti) 係中除去,但不能抑製逆轉錄酶的RNase H的活性。使用時可直接加入含有RNA的反應液中用於(yu) c第一鏈合成、體(ti) 外轉錄和體(ti) 外翻譯等實驗。

產(chan) 品特點

·       c合成

·       體(ti) 外轉錄

·       體(ti) 外翻譯

·       1-Step RT-qPCR

產(chan) 品組分

緩衝(chong) 液成分:20 mM HEPES-KOH(pH 7.6),50mM KCl,8mM DTT,50% (v/v) glycerol。 

 

使用方法

使用方法

溫馨提示:需要用無RNA酶的PCR管中配製RNA/引物預混液

1 c合成

 (1)在無RNA酶的PCR管中配製RNA/引物預混液

組分

反應體(ti) 積(10ul)

Oligo(dT)20

(或Random primer)

(或基因特異引物)

25pmoles

(25pmoles)

(5pmoles)

10mM dNTPs

2µL

模板RNA

2pg-5µg

DNase/Rnase Free Water

10ul

 

(2)65℃加熱5min,立即置於(yu) 冰上

組分

反應體(ti) 積(10ul)

RNA引物預混液

10ul

5x RT Buffer

4µL

BIOHUB Reverse Transcritase

1ul

RNase inhibitor(40U/µL)

1ul

100mM DTT

2ul

DNase/Rnase Free Water

補足20ul

 

(3)輕輕混勻,按如下反應條件設置

逆轉錄反應條件

1

42℃

20-60min

2

99℃

5min

 

備注:逆轉錄溫度可在42-60之間調整,反應時間建議在20-60min內(nei) 調整

   

(4)得到的c溶液可以直接用於(yu) 第二鏈c合成及後續PCR反應。

優(you) 化參考方法

優(you) 化參數

參考範圍

逆轉錄

50-60℃ 5-15min

預變性溫度時間

95-98℃ 10sec-5min

變性溫度

95-98℃ 3sec-10sec

延伸/退火溫度

60-65℃ 5sec-30sec

 

注意事項

1. 本產(chan) 品在PH7〜8時表現最佳抑製RNase活性。

2. 本產(chan) 品發揮活性作用至少添加1 mM的DTT。

3. 本產(chan) 品不抑製RNase H活性及逆轉錄酶活性。

運輸及保存方法

 

-20℃可保存12個(ge) 月。