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流式細胞術“顯色神器”:SureLight® R-Phycoerythrin(D5-000)全解析

 更新時間:2025-07-11 點擊量:154


RPE-Spectra_D5-000.jpg

🔍產(chan) 品基礎信息  

貨號:D5-000  

品名:SureLight® R-Phycoerythrin(R-藻紅蛋白)  

規格:10mg、50mg、100mg、500mg

品牌:columbia biosesciences

類型:基因工程優(you) 化型藻紅蛋白(Phycoerythrin, PE)  

來源:通過紅藻(如紫球藻)藻膽蛋白基因重組表達,經純化工藝製備的高純度熒光蛋白。  

應用領域:流式細胞術(FCM)、熒光免疫分析(如ELISA、免疫組化)、單細胞測序標記、多色熒光檢測等。  


📝詳細介紹:從(cong) 紅藻到實驗室的“顯色明星"  

SureLight® R-Phycoerythrin(R-藻紅蛋白) (D5-000)是一種經典的熒光標記物,其核心功能是通過吸收特定波長光能並發射更長波長的熒光,實現對生物樣本(如細胞、組織)的可視化檢測。  

它的“出身"自帶優(you) 勢——以紅藻中的天然藻紅蛋白為(wei) 模板,通過基因工程技術優(you) 化了蛋白折疊效率和色素分子(藻膽素)結合能力,最終得到的R-PE純度≥95%(HPLC檢測),熒光量子產(chan) 率較傳(chuan) 統提取的PE提升約30%(數據來源:Columbia Biosesciences內(nei) 部測試)。  

從(cong) 光譜特性看,D5-000的最佳激發波長為(wei) 480-490nm(適配主流488nm氬離子激光器),發射波長為(wei) 565-575nm(覆蓋PE-Texas Red雙色檢測窗口),這使得它在流式細胞術中既能單獨標記目標分子,也能與(yu) FITC(綠光)、PerCP(橙光)等染料組成多色panel,輕鬆區分複雜樣本中的不同細胞亞(ya) 群。  


🎯核心優(you) 勢:為(wei) 什麽(me) 科研人更愛D5-000?  

1. 高亮度,低背景:優(you) 化的藻膽素-蛋白結合結構減少了非特異性熒光淬滅,相同濃度下熒光強度比市售普通PE高25%-40%(第三方實驗室驗證數據),尤其在低豐(feng) 度蛋白標記時優(you) 勢顯著。  

2. 穩定性強:凍幹粉形態在-20℃避光條件下可保存24個(ge) 月(開封後建議6個(ge) 月內(nei) 用完),溶液狀態(PBS緩衝(chong) 液,pH7.4)4℃避光可穩定保存3個(ge) 月,避免傳(chuan) 統PE易氧化失活的問題。  

3. 低內(nei) 毒素,生物相容性高:生產(chan) 全程采用無動物源培養(yang) 基,內(nei) 毒素含量<0.1EU/μg(LAL檢測),適用於(yu) 體(ti) 內(nei) 實驗或臨(lin) 床級檢測試劑開發。  

4. 兼容性強:與(yu) 主流流式細胞儀(yi) (如BD FACSCanto、Beckman CytoFLEX)、熒光顯微鏡(如Leica SP8)及酶標儀(yi) (如Tecan Infinite)均匹配,無需額外調整儀(yi) 器參數。  


❓購買(mai) 疑問&專(zhuan) 業(ye) 解答  

Q1:D5-000是凍幹粉還是液體(ti) ?如何溶解?  

A:提供凍幹粉和預溶溶液兩(liang) 種規格。凍幹粉建議用無菌PBS(pH7.4)或廠商推薦的緩衝(chong) 液溶解,輕柔渦旋至溶解,避免劇烈震蕩導致蛋白變性。  

Q2:流式細胞術中使用D5-000,需要調整激光器功率嗎?  

A:無需額外調整。其最佳激發波長為(wei) 488nm,主流流式細胞儀(yi) 的488nm氬離子激光器或固態激光器均可高效激發,建議激光功率設置為(wei) 100-200mW(具體(ti) 以儀(yi) 器說明書(shu) 為(wei) 準)。  

Q3:多色實驗中,D5-000適合和哪些染料搭配?  

A:推薦與(yu) FITC(激發488nm/發射525nm)、PerCP-Cy5.5(激發488nm/發射670nm)、APC(激發633nm/發射660nm)等染料組合,避免與(yu) 發射光譜重疊的染料(如Cy5)共用,防止串色。  

Q4:儲(chu) 存時需要注意什麽(me) ?  

A:凍幹粉需-20℃避光密封保存(可用鋁箔包裹離心管);溶解後的溶液建議分裝為(wei) 小份,4℃避光保存,避免反複凍融。  

Q5:是否提供批次間一致性驗證報告?  

A:是的!每批次產(chan) 品均經過HPLC純度檢測、熒光量子產(chan) 率測定及功能驗證(如流式細胞術標記效率測試),報告可在下載或聯係客服獲取。  

Q6:能否用於(yu) 體(ti) 內(nei) 成像?  

A:D5-000內(nei) 毒素極低(<0.1EU/μg),理論上可用於(yu) 體(ti) 內(nei) 實驗,但建議先通過預實驗驗證其組織分布和代謝特性(不同物種可能存在差異)。  

Q7:如果標記抗體(ti) 時出現沉澱,怎麽(me) 辦?  

A:可能是抗體(ti) 濃度過高或緩衝(chong) 液pH不適(建議pH6.5-7.5)。可嚐試降低抗體(ti) 濃度(1-5μg抗體(ti) /10μg R-PE),或更換為(wei) 含0.1% BSA的PBS緩衝(chong) 液作為(wei) 反應介質。  

Q8:D5-000的摩爾消光係數是多少?  

A:約1.9×10⁶ M⁻¹cm⁻¹(488nm激發),具體(ti) 數值以產(chan) 品說明書(shu) 為(wei) 準。  

Q9:是否支持定製化修飾(如偶聯其他分子)?  

A:目前主要提供標準型R-PE,定製化服務需聯係商務團隊評估可行性(如修飾位點是否影響熒光特性)。  

Q10:新手第一次使用,需要注意哪些操作細節?  

A:建議先做小劑量預實驗:取1μg R-PE與(yu) 1μg抗體(ti) 混合,4℃避光孵育15分鍾,用流式細胞儀(yi) 檢測陽性/陰性對照,確認熒光信號強度和背景水平後再批量使用。  


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⚡Columbia Biosesciences的熱賣產(chan) 品

貨號

品名

規格

品牌

D11-000-10

SureLight™ Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP)

10mg

Columbia Biosesciences

D27-000-100

SureLight PerCP Cyanine 5.5

100mg

Columbia Biosesciences

D27-000-10

SureLight™ PerCP Cyanine 5.5 – 10mg

10mg

Columbia Biosesciences

D3-1714-1mg

Mouse Anti-C-MYC IgG:SureLight™ APC, 1mg

1mg

Columbia Biosesciences

D3-000-10

SureLight™ Allophycocyanin (APC) – 10mg

10mg

Columbia Biosesciences

AD-EU-ITC-100-1kit

SureLight™ Europium Amine-Reactive Labeling Kit

1kit

Columbia Biosesciences

D5/D42-000-10mg

SureLight™ R-Phycoerythrin

10mg

Columbia Biosesciences

D11-010

Activated SureLight™ Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP), 1mg

1mg

Columbia Biosesciences

D3-010-5

Activated SureLight™ Allophycocyanin (APC) – 5mg

5mg

Columbia Biosesciences

D27-000-5

SureLight™ PerCP Cyanine 5.5 – 5mg

5mg

Columbia Biosesciences

D11-1834

Rabbit Anti-V5 IgG conjugated to PerCP

100ug

Columbia Biosesciences

D17-1310-50ug

Goat Anti-GST IgG: Eu-W1024 – 50ug

50ug

Columbia Biosesciences

D3-2212

Streptavidin: SureLight™ APC, 1mg

1mg

Columbia Biosesciences

D3-1718-100

Mouse anti-DYKDDDDK IgG: SureLight™ APC;100ug

100ug

Columbia Biosesciences

D11-000-500

SureLight™ Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP) – 500mg

500mg

Columbia Biosesciences

D5-000-500mg

SureLight® R-Phycoerythrin

500mg

Columbia Biosesciences

D27-000-50

SureLight™ PerCP Cyanine 5.5

50mg

Columbia Biosesciences

D16-000-10

SureLight PE-777 – 10mg

10mg

Columbia Biosesciences

D17-1310-1mg

Goat Anti-GST IgG: Eu-W1024

1mg

Columbia Biosesciences