BIOHUB●78BEA10011●熱不穩定性耐高鹽核酸酶(HL-SAN)【選購指南】

🔍產(chan) 品基礎信息

- 貨號：78BEA10011  

- 品名：熱不穩定性耐高鹽核酸酶(HL-SAN)  

- 品牌：BIOHUB

- 規格：25 kU

- 儲(chu) 存條件：-20℃避光保存，有效期3年  

- 適用領域：病毒載體(ti) 生產(chan) 、蛋白純化、mNGS樣本處理等  

📝產(chan) 品詳情

無論是實驗室規模樣品製備、還是生產(chan) 規模工藝過程，去除核酸都可以改善工藝流程，如蛋白純化、病毒載體(ti) 製備、mNGS中樣品處理等過程。而核酸酶的選擇，就顯得特別重要。

熱不穩定性耐高鹽核酸酶（HL-SAN)是一種非特異性內(nei) 切酶，在高鹽濃度下具有最佳活性；且該酶在多種緩衝(chong) 液中都有活性，很容易通過還原劑處理而失活。

這些特性使HL-SAN在需要去除和RNA的應用中，更為(wei) 適合。

核酸汙染，特別是宿主基因組汙染，在幾乎所有工藝流程及生物製品的生產(chan) 中，都是需要重點解決(jue) 的問題。

一方麵，宿主的存在，影響目標產(chan) 物的純化及下遊質量分析等。另一方麵，宿主殘留能引起機體(ti) 嚴(yan) 重的免疫反應，是生物製品的關(guan) 鍵質量參數之一，FDA及NMPA等對Host Cell (HCD)有嚴(yan) 格的質控要求。

宿主基因組中，組蛋白與(yu) 形成核小體(ti) ，核小體(ti) 緊密折疊形成結構複雜的染色質。組蛋白與(yu) 間存在強烈的離子作用及疏水作用，再加上特殊的結構，導致宿主很難被準確檢測並清除。

已有文獻表明，高鹽濃度下組蛋白與(yu) 解離相對幹淨，這有利於(yu) 宿主的檢測及去除。但市售的絕大多數核酸酶在高鹽濃度下活性很弱，甚至失活。而耐高鹽的HL-SAN成了這類應用的理想選擇。

📌特點

高鹽條件下，清除效率更高，宿主殘留更少；

pI為(wei) 9.6，容易跟絕大多數蛋白分離；

還原劑存在時，酶易失活，減少對後續流程的影響。

💎活性測定條件

1️⃣圖 1：高鹽度溶液中的最佳活性。HL-SAN 在約 0.5 M NaCl 下具有最佳活性，但在 [NaCl] 和 [KCl] 的廣泛範圍內(nei) 運行。HL-SAN 的活性在 25 mM Tris-HCl 緩衝(chong) 液、pH 8.5、5 mM MgCl 2 和不同的 [NaCl] 或 [KCl] 中測試。最大活性設置為(wei) 100%。

2️⃣圖 2：溫度和活動。HL-SAN 在 ~35°C 時具有最佳活性，但在很寬的溫度範圍內(nei) 起作用（10°C 和 50°C 下的活性為(wei) 20%）。在含有 5 mM MgCl 2 和 0.5 M NaCl 的pH 8.5 的 25 mM Tris-HCl 緩衝(chong) 液中測試 HL-SAN 的活性。

3️⃣圖 3： MgCl 2 和 MnCl 2 濃度對 HL-SAN 活性的影響。

在 25 mM Tris-HCl 緩衝(chong) 液、pH 8.5、0.5 M NaCl 和不同濃度的 MgCl 2 或 MnCl 2 中測試 HL-SAN 的活性。將含有 5 mM MgCl 2的樣品的活性 設為(wei) 100%。

4️⃣圖 4： HL-SAN 將 ss 消化為(wei) ~5-13 nt，將 ds 消化為(wei) ~5-7 nt。ss 最終產(chan) 物的大小從(cong) ~5-13 nt 不等，而 ds 被消化到大約 ~5-7 nt。最終產(chan) 物的大小似乎取決(jue) 於(yu) 序列。底物 1 和 2 是具有不同序列的 ss，底物 3 和 4 是具有相似序列但在不同末端具有 FAM 標記的 ds。底物 5 是 ds，其序列與(yu) 底物 3 和 4 相同，但兩(liang) 端帶有 FAM 標記。

🌱適用範圍

病原微生物檢測應用，如宏基因組測序（mNGS）樣品去除宿主；

蛋白純化，特別是結合蛋白；

病毒載體(ti) 製備，如腺相關(guan) 病毒（AAV）、腺病毒（AdV）等；

其他需要去除宿主的應用等。

🔄注意事項

為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作！

本產(chan) 品主要用於(yu) 科研領域，不宜用於(yu) 臨(lin) 床診斷或其他用途。

🚀質量控製

來源：在畢赤酵母中重組生產(chan) 。

活性：HL-SAN在10-50°C的溫度範圍內(nei) 具有高活性。 活動的最佳 NaCl 濃度為(wei) 0.5 M，工作範圍為(wei) 0.25–1 M。活動需要 Mg2+ (>1 mM)。 工作 pH 範圍為(wei) 7.5-9.5，最佳 pH 值為(wei) 9.0。

比活度：≥ 175 000 Units/mg。

單位定義(yi) ：一個(ge) 單位定義(yi) 為(wei) 在 37°C 下 30 分鍾內(nei) 1 A 在 260 nm 處的吸光度增加，使用 50 μg/ml 小牛胸腺 （D-1501，Sigma）在由 25 mM Tris-組成的緩衝(chong) 液中 HCl，pH 8.5 (25°C)，5 mM MgCl2，500 mM NaCl。

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（注：本文內(nei) 容基於(yu) 品牌公開資料及行業(ye) 常規信息整理，具體(ti) 以品牌信息文檔為(wei) 準。）

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