🔍產(chan) 品基礎信息
- 貨號:BCHM-ASY-0005
- 品名:LCGreen Plus Kits 熒光染料
- 品牌:BioFireDefense
- 規格:1000 Reactions
- 應用領域:高分辨率熔解曲線分析(HRM)、基因分型、突變檢測、甲基化研究
📝詳細介紹
- 技術原理
LCGreen Plus Kits 熒光染料是一種雙鏈飽和熒光染料,通過實時監測PCR產(chan) 物熔解過程中熒光強度的變化,精準識別序列的微小差異(如單堿基突變、SNP、插入/缺失等)。其化學結構在高溫變性時不會(hui) 遷移至解鏈區域,確保熔解曲線分辨率高達0.1°C。
- 核心應用
1. 基因分型:區分雜合子與(yu) 純合子突變(如CFTR基因突變篩查)。
2. 病原體(ti) 鑒定:快速檢測細菌/病毒耐藥基因變異(如結核分枝杆菌)。
3. 甲基化分析:定量評估甲基化水平(如癌症相關(guan) 基因啟動子甲基化)。
4. 質量控製:驗證PCR擴增產(chan) 物特異性,避免非特異性擴增幹擾。
- 性能參數
1.靈敏度:可檢測低至0.1%的突變等位基因。
2.兼容性:支持Roche LightCycler、Applied Biosesystems等主流HRM儀(yi) 器。
3.安全性:無毒性、無致癌性,符合生物安全標準。
🎯核心優(you) 勢
1. 超高分辨率
- 區分單堿基差異(如A/T或C/G突變),熔解曲線峰形差異顯著。
- 支持400bp以內(nei) 短片段分析,適合高密度位點篩查。
2. 閉管操作,0汙染
- 無需開蓋加探針,降低交叉汙染風險,適合臨(lin) 床樣本檢測。
3. 成本效益高
- 無需定製探針,直接替代傳(chuan) 統菲律宾新利网上娱乐Man探針法,節省50%以上成本。
4. 快速實驗流程
- 全程僅(jin) 需15分鍾(傳(chuan) 統方法需2小時),支持高通量樣本處理。
5. 數據穩定性強
- 高信噪比(SNR>30),重複性CV值<2%,確保結果可靠。
❓常見問題解答
Q1:LCGreen Plus是否適用於(yu) 所有HRM儀(yi) 器?
A:兼容主流設備(如Roche LightCycler 480、Qiagen Rotor-Gene),但需驗證儀(yi) 器熱均一性。
Q2:能否檢測甲基化程度?
A:支持!通過MS-HRM(甲基化敏感性HRM)技術,可定量分析甲基化水平(如MGMT基因啟動子)。
Q3:樣本類型有哪些限製?
A:適用於(yu) 樣本(純度OD260/280=1.8-2.0),RNA需先反轉錄為(wei) c。
Q4:如何保存與(yu) 使用?
A:-20℃避光保存,避免反複凍融。推薦工作濃度為(wei) 0.2-0.4μM。
Q5:結果如何解讀?
A:通過HRM分析軟件(如LightCycler® 480 Gene Scanning Software)生成差異圖,對比標準品判斷突變類型。
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