虎克實驗室是的自身免疫性疾病實驗動物模型及其相關(guan) 產(chan) 品研發和生產(chan) 企業(ye) ,其創始人Suzana Marusic博士曾在惠氏製藥長期擔任炎性靶點驗證實驗室的主管,負責哮喘和自身免疫性疾病的研究,研發製備出高度相似性的哮喘和實驗性自身免疫性腦脊髓炎小鼠模型,並以此驗證了多個(ge) 藥物靶點。Suzana Marusic憑借其多年來在T細胞分離培養(yang) 、細胞免疫、外周耐受機製及免疫相關(guan) 疾病和腫瘤研究的豐(feng) 富經驗,創立了虎克實驗動物模型公司,致力於(yu) 為(wei) 科研和藥物研發提供的自身免疫性實驗動物模型建立試劑盒,以及相關(guan) 的實驗動物組織和血清。公司目前的實驗動物模型主要包括膠原誘導的關(guan) 節炎模型、實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型、係統紅斑狼瘡、炎性腸病等模型的製備試劑盒,以及多種免疫狀態下動物組織和血清樣本。虎克實驗動物模型提供的模型製備試劑盒以預充免疫原的注射器為(wei) 主,操作簡單,結果可靠,可重複性高。

虎克公司主要產(chan) 品
一、膠原誘導的類風濕關(guan) 節炎模型CIA
類風濕關(guan) 節炎Rheumatoid arthritis (RA)是一種常見的自體(ti) 免疫性疾病,多見於(yu) 關(guan) 節部位,但在心髒結締組織、血管、肺、眼皮膚及腎髒均有發現。RA發病中女性多餘(yu) 男性(約2:1),其症狀包括疼痛、腫脹感和僵硬、粘連、關(guan) 節麵糜爛、骨吸收關(guan) 節變形甚至失去功能。
虎克實驗室在RA實驗動物模型的建立上有著豐(feng) 富的經驗,其核心動物模型膠原蛋白誘導的類風濕關(guan) 節炎模型(CIA)即是常用的類風濕關(guan) 節炎模型,該模型常用DBA/1小鼠建立,但是也可用B10.R111 小鼠, B10.Q 小鼠及Lewis 大鼠建立。
1、虎克公司提供的CIA模型誘導試劑盒
四種試劑盒區別在使用不同來源的膠原蛋白誘導,斜線後為(wei) 相應的免疫佐劑。
2、CIA免疫流程

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3、CIA模型評價(jia) 指標

二、實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型(EAE)模型
虎克公司精通目前幾乎所有常用的EAE 模型,公司創始人Suzana Marusic博士也是過繼轉移型C57BL/6小鼠EAE模型的。如果需要,還可與(yu) 客戶研發/修正現有的EAE模型。以下是目前虎克公司克提供常用建立EAE模型的方案及試劑盒
(1)MOG/CFA誘導的 C57BL/6小鼠EAE模型
(2)PLP139-151/CFA誘導的SJL小鼠模型
(3)gpMBP69-88/CFA誘導的 Lewis 大鼠模型
(4)Spinal cord homogenate 誘導的EAE模型
(5)過繼轉移的EAE模型
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1、虎克公司提供的EAE模型誘導試劑盒
2、EAE誘導流程

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3、EAE模型典型指征

三、係統紅斑狼瘡動物模型Systemic Lupus Erythematosus (SLE)
1、采用MRL/lpr小鼠建立的SLE模型
因MRL/lpr小鼠建立的SLE與(yu) 臨(lin) 床上SLE相似度高,因此是zui常見用於(yu) 建立紅斑狼瘡的動物。虎克公司通常使用11周齡的雌性MRL/lpr小鼠建立SLE模型,如不加處理,該模型一般在17周即可檢測到明顯的腎髒病變。模型評價(jia) 指標為(wei) 每周檢測蛋白尿及體(ti) 重,17周檢測脾髒重量,腎髒病理檢測、抗ds抗體(ti) 檢測、血液尿素氮(BUN)及血清肌酸檢測。下圖為(wei) 典型的以MRL/lpr小鼠建立的SLE模型的指征。

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2、采用(NZB x NZW)F1代雜交小鼠建立的SLE模型
(NZB x NZW)F1代雜交小鼠可發育出與(yu) SLE相似的自體(ti) 免疫性疾病,與(yu) 人類SLE患者類似,該品係動物有高濃度的抗ds及抗核蛋白、蛋白尿症及免疫複合物腎小球腎炎,因此也是研究SLE的理想動物模型。下圖為(wei) 典型的以(NZB x NZW)F1代雜交小鼠建立的SLE模型的指征。


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四、腸炎動物模型
1、DSS誘導的C57BL/6 小鼠腸炎模型
炎性腸病 (IBD)是人類常見的消化道疾病,右旋糖酐硫酸酯鈉(DSS)誘導的IBD模型與(yu) 臨(lin) 床人類IBD疾病在病理學上有共同特征,如體(ti) 重減輕,血性腹瀉及結腸炎的病理學改變。虎克公司誘導的IBD模型是在連續五天C57BL/6小鼠食水中加入3-4 % 的DSS,造成整個(ge) 消化道的炎症,但是結腸尤為(wei) 嚴(yan) 重。當DSS停用後急性腸炎轉變為(wei) 慢性腸炎。下圖為(wei) 典型的腸炎動物模型指征。


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2、CD4+CD45RB(高)誘導的SCID小鼠腸炎模型
該疾病模型可能是zui接近人類IBD疾病的動物模型,其病理學反應及體(ti) 重變化均與(yu) 臨(lin) 床現象相似,且臨(lin) 床上有效的處理在該動物模型也同樣有效。該模型與(yu) 人類IBD疾病不同之處在於(yu) 損傷(shang) 位置不同,小鼠一般局限於(yu) 結腸,而人類則可發於(yu) 整個(ge) 消化道(盡管結腸仍為(wei) 高發位置)。該動物模型的誘導流程如下。

下圖為(wei) 該模型的*指征:


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五、體(ti) 外T細胞功能分析
體(ti) 外脾髒和淋巴結可被抗原反複刺激以分析T細胞產(chan) 生的細胞因子,該方案常用於(yu) 重要研究的預實驗。分析流程如下:

檢測指標如下:

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六、遲發型過敏(DTH)
DTH是一個(ge) 短期評估藥物對細胞免疫反應的常用模型,主要針對Th1 及Th17 細胞。虎克公司製備的DTH模型采用雌性C57BL/6小鼠,用甲基化的牛血清白蛋白乳液(mBSA) 配合福氏佐劑進行免疫獲得。該模型耗時短、成本低,通常在用炎性模型如CIA或EAE之前的預實驗采用。下圖為(wei) 該模型的*指征。

七、體(ti) 內(nei) 脂多糖LPS誘導的炎症模型
在體(ti) 內(nei) 注射細菌脂多糖後機體(ti) 血清中TNF、 IL-6及 IL-1 濃度增高, 可用於(yu) 類風濕關(guan) 節炎初步藥物篩選,再進一步以CIA模型驗證。該模型也是一個(ge) 耗時短、性價(jia) 比高的炎性動物模型,在需要CIA等模型研究前作為(wei) 預實驗有相當大潛力。

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八、體(ti) 外全血LPS刺激
該模型采用Lewis rats,在注射檢測物質1-24小時後,動物全血被收集, 其中部分用於(yu) 分離PK評估,剩餘(yu) 部分用於(yu) 體(ti) 外全血的LPS刺激(或其它抗原刺激),接著用ELISA或細胞因子檢測(CBA) 。實驗流程及典型指征如下圖:

九、自身免疫性疾病研究常用抗原、細胞及動物模型樣本
1、抗原(溶於(yu) 細胞培養(yang) 液中):
MOG35-55、PLP139-151、MBP1-17、OVA323-339 、gpMBP69-88 。
2、用於(yu) T細胞培養(yang) 的胎牛血清:
3、組織和細胞:
(1)EAE動物的脾髒和脊髓,
(2)CIA動物的爪子、脾髒和血清,
(3)SLE(Cyclophosphamide-treated (no or mild proteinuria))動物藥物處理及其對照的腎髒和血清
(4)源於(yu) MOG35-55、PLP139-151、CFA佐劑對照免疫的小鼠及未免疫小鼠對照的活細胞,包括脾細胞、淋巴節細胞。
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